消毒剂使用和消毒效果验证ppt课件

1、消毒剂运用及效能验证2019.4l 能消除以细胞繁衍形状出现的微生 l 物污染的化学物质。消毒剂的习惯定义：消毒剂的分类定义USP29 抗菌剂Antiseptic)化学杀菌剂(Chemical Disinfectant)清洁剂(Cleaning Agent)消毒剂(Disinfectant)卫生洗涤剂(Sanitizing Agent)杀孢子剂(Sporicidal Agent)灭菌剂(Sterilant Agent)化学主份类别举例醛类杀孢子剂2戊二醛醇类一般消毒剂，抗菌/病毒70%异丙醇、75酒精含氯和次氯酸钠杀孢子剂0.5%次氯酸钠酚类一般消毒剂500g/g氯甲酚、氯二甲酚臭氧杀孢子剂8

2、气体重量过氧化氢气态灭菌剂，液体杀孢子剂，抗菌剂4g/g，1025溶液，3溶液替代缩二胍抗菌剂0.5%氯己定（洗必泰）过氧乙酸液态/气态灭菌剂0.2%，1g/g环氧乙烷气态灭菌剂600g/g季铵盐类一般消毒剂，抗菌剂200g/g苯扎氯铵（洁尔灭）-丙内酯杀孢子剂100g/g消毒剂配制按供应商的运用阐明进展配制和储存纯化水、注射用水干净室及相关受控环境运用，应进展除菌过滤。温度提高，杀菌效能增大。效能验证时，在常温下配制。影响消毒剂效能的要素： pH温度，浓度材质和附着物质溶剂水接触时间微生物的类型和数量 消毒剂作用机理钝化胞内酶活性，影响细胞的正常代谢酚类阻断物质运输通道季铵盐类电荷，附着于细

3、胞膜特定部分电荷破坏微生物细胞膜的构造和功能醛类、含氯、过氧化物微生物对消毒剂的耐受性构成生物膜粘性多糖物质消毒剂的相互作用中和反响固有耐受性和概率残存致死剂量微生物抗力由小到大陈列普通为：细菌繁衍体真菌繁衍体真菌孢子病毒分枝杆菌细菌芽孢消毒消毒剂剂的的选择选择需控制的微生物的类型和数量市售消毒剂的抗菌谱消毒剂的品牌浓度、运用方法和接触时间待消毒物体的材质和对消毒剂的兼容性能够影响杀菌效能的外表有机物数量反复运用，对设备外表的腐蚀程度对操作者的平安性和清洁剂/其它消毒剂的相容性交替运用方案和对产品的影响 消毒消毒剂验证剂验证的目的：的目的： 经过经过特定的微生物与某消毒特定的微生物与某消毒剂剂

4、在在规规定的运用定的运用浓浓度下，接触度下，接触规规定的定的时间时间后，后，对对微生物微生物进进展培育、展培育、计计数，数，调查调查消毒消毒剂剂的的消毒消毒/杀杀菌效果。菌效果。消毒消毒剂验证剂验证的内容：的内容：运用中稀释检测use-dilution tests)对不同浓度下，对消毒剂的效能进展挑选针对不同规范菌株和环境微生物，确认接触时间外表挑战实验surface challenge tests)运用规范菌株和典型环境分别微生物选择适宜的浓度和接触时间，进展实验获得挑战微生物数量下降的对数值对运用新消毒剂前后环境微生物的检出频率和数量进展统计学评价无菌消费区域、GMP要求消毒剂验证步骤：第

5、一步：在实验室对代表细菌在规定的运用浓 度和规定的作用时间进展确认。第二步：运用不同材质的载体，进展模拟实验第三步：完成验证报告，构成SOP。 验证用菌种：金黄色葡萄球菌、铜绿色假单胞菌、沙门氏菌、大肠埃希菌、枯草杆菌、白色念珠菌、黑曲霉、环境分别菌。菌种选择的原那么:代表性,普遍性,规范菌种。(环境中常见的污染菌)。菌种的要求：不得超越5代。采用适宜的方法保管。验证菌种：挑战微生物(USP 29)AOAC挑战菌典型环境分离菌杀菌剂：大肠埃希菌ATCC 11229金黄色葡萄球菌ATCC 6538铜绿假单胞菌ATCC 15442杀菌剂：藤黄微球菌，表皮葡萄球菌，杰氏棒杆菌 ，泡囊假单胞菌 杀真菌

6、剂：白色念珠菌ATCC 10231或2091产黄青霉ATCC 11709黑曲霉菌 ATCC 16404杀真菌剂：产黄青霉，黑曲霉菌 杀孢子剂：枯草芽孢杆菌ATCC 19659杀孢子剂：球形芽孢杆菌 ，苏云金芽孢杆菌 预备性实验一选择适宜的中和剂Letheen肉汤、D/E中和肉汤酚类，季铵盐类、TAT肉汤根底吐温20卵磷脂胰蛋白胨消毒剂中和剂醇类稀释或吐温80戊二醛甘氨酸和亚硫酸氢钠次氯酸钠硫代硫酸钠氯己定吐温80和卵磷脂氯化汞及其它汞制剂硫乙醇酸季铵盐类吐温80和卵磷脂酚类稀释或吐温80和卵磷脂D/E中和肉汤每升配方配方胰蛋白胨胰蛋白胨 5 g 5 g酵母膏酵母膏 2.5 g 2.5 g葡萄糖

7、葡萄糖 10 g 10 g硫乙醇酸钠硫乙醇酸钠 1 g 1 g硫代硫酸钠硫代硫酸钠 6 g 6 g亚硫酸氢钠亚硫酸氢钠2.5 g2.5 g吐温吐温 80 5 g 80 5 g卵磷脂卵磷脂 7 g 7 g溴甲酚紫溴甲酚紫 0.02 g 0.02 g最终最终 pH 7.6 pH 7.60.2 0.2 于于 25 25预备预备性性实验实验二二中和剂毒性将10100 CFU的微生物参与到中和剂中薄膜过滤，冲洗，培育，计数与菌液对照组比较，回收率应70预备预备性性实验实验三三中和效能将消毒剂和中和剂混合记录时间参与10100 CFU微生物薄膜过滤，冲洗，培育，计数与菌液对照组比较，回收率应70验证方法

8、- 薄膜过滤法菌悬液和消毒剂直接混合，在不同的时间间隔条件下过滤，培育后评价。验证预备： - 测试菌液预备 增菌过夜，并调整至106108 CFU/ml - 消毒剂稀释至规定浓度。 分装10ml于假设干无菌试管中；试管上标注消毒时间：如“1分钟组 ，“5分钟组 ，“10分钟组或其他要求的时间段。- 配制中和剂分装100ml，300ml验证步骤1：- 接种 接种各验证菌种至盛有待验证消毒剂的试管使接后浓度104 CFU/ml)，混合均匀，并立刻开场计时。- 中和、过滤将消毒剂倾入100ml中和剂中，混合，稀释如需求，过滤，然后用100ml中和剂清洗滤膜，滤过3次。- 阳性对照 用无菌水替代消毒剂，步骤同上。验证步骤2： 培育和计数 取下滤膜放入规定的培育基平板，在规定的温度、时间培育后，记数。和阳性对照相比，微生物数量下降应至少3个对数值细菌芽孢至少2个对数值。验证步骤3：外表挑战实验根据设备的实践情况，选择不同材质的载体。玻璃，不锈钢，塑料薄膜，乳胶，墙面涂料，地面材质接种，并确认实践数量接触杀菌、中和、过滤正确运用消毒剂1稀释消毒剂时运用纯化水、注射用水设备运用后作彻底清洁将环境常见菌列入验证范畴轮换运用不同的消毒剂，消毒剂间要用无菌水充分清洗正确运用消毒剂2运用消毒