动物细胞融合与单克隆抗体

1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原理原理诱导方法诱导方法用途用途细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞全能性细胞全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性物理、化学方法物理、化学方法获得杂种植株获得杂种植株制备单克隆抗体制备单克隆抗体物理、化学、物理、化学、灭活的病毒灭活的病毒注射抗体1.1.向小鼠体内注射抗原，小向小鼠体内注射抗原，小鼠通过免疫系统产生抗体鼠通过免疫系统产生抗体2.2.提取小鼠血清提取小鼠血清3.3.从血清中分离抗体从血清中分离抗体缺点：缺点：产量低！产量低！纯度低！纯度低！抗体的特

2、异性差！抗体的特异性差！ 感染病原体后，体内产生相应的效应感染病原体后，体内产生相应的效应B B细细胞胞, ,分泌抗体分泌抗体, ,体内抗体多达百万种体内抗体多达百万种! ! 每个每个B B淋巴细胞只能产生一种抗体。淋巴细胞只能产生一种抗体。B B淋巴细胞淋巴细胞也有百万种！也有百万种！想要获得大量的单一抗体，可以体想要获得大量的单一抗体，可以体外外克隆某个克隆某个B B淋巴细胞淋巴细胞。单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念 单单: : 单个细胞单个细胞 克隆克隆: : 无性繁殖无性繁殖 单克隆单克隆抗体抗体: :单个细胞克隆产生的单个细胞克隆产生的化学化学性质单一、特异性强性质单一、特异性强的抗

3、体的抗体B B淋巴细胞不具备增殖淋巴细胞不具备增殖能力！怎么办？能力！怎么办？ 骨髓瘤细胞具备无限增殖能骨髓瘤细胞具备无限增殖能力，但是不能产生抗体！力，但是不能产生抗体！ 能不能制造既能产生单一抗能不能制造既能产生单一抗体，又能无限增殖的细胞？体，又能无限增殖的细胞？ 请用箭头把以下代表制备过程步骤的的字母按正确请用箭头把以下代表制备过程步骤的的字母按正确顺序连接起来。顺序连接起来。注射抗原注射抗原1.为什么要向小鼠为什么要向小鼠注射抗原？注射抗原？诱导产生特定的效应诱导产生特定的效应B B细胞细胞2.从小鼠体内提取的从小鼠体内提取的B淋淋巴细胞是一种吗？巴细胞是一种吗？不是。小鼠在注射抗原

4、前，可能不是。小鼠在注射抗原前，可能接受过其它病原体刺激，产生多接受过其它病原体刺激，产生多种淋巴细胞种淋巴细胞注射抗原注射抗原3. 诱导细胞融合诱导细胞融合的方法是什么？的方法是什么？4. 诱导后有多少诱导后有多少种杂交细胞？种杂交细胞？B1B2B3B4BnB B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B1B2B2B3瘤瘤瘤瘤B1瘤瘤B3B4B2瘤瘤B3瘤瘤三种融合细胞：三种融合细胞：BB融合：融合：瘤瘤融合：瘤瘤融合：B瘤融合：瘤融合：多种多种1 1种种多种多种杂交瘤细胞杂交瘤细胞注射抗原注射抗原第一次筛选第一次筛选第二次筛选第二次筛选筛选筛选杂交瘤杂交瘤细胞细胞筛选筛选产特定抗体产特定抗体的

5、杂交瘤细胞的杂交瘤细胞选择培养基选择培养基有限稀释：将杂交瘤细胞稀释，使每孔细胞不超过一个。 抗体检测：用专一抗体检测阳性细胞。筛选筛选产特定抗体产特定抗体的杂交瘤细胞的杂交瘤细胞流程归纳体内培养体内培养免疫免疫促融促融一筛杂交瘤一筛杂交瘤二筛特定抗体二筛特定抗体体内外体内外培养培养单克隆抗体特点：单克隆抗体特点：特异性强特异性强灵敏度高灵敏度高可大量制备可大量制备单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用诊断试剂诊断试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速 (“生物导弹生物导弹” 单抗导向，药物为弹头单抗导向，药物为弹头)植物体细胞杂交与单克隆抗体制备比较植物体细胞杂交与单

6、克隆抗体制备比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备原理原理融合前处理融合前处理促融方法促融方法用途用途过过程程第一步第一步第二步第二步第三步第三步第四步第四步膜流动性、细胞全能性膜流动性、细胞全能性膜流动性、膜流动性、细胞增殖细胞增殖去壁去壁注射抗原注射抗原物理法化学法物理法化学法物理、化学、物理、化学、生物法生物法去壁去壁免疫处理免疫处理促融促融促融促融再生壁再生壁一筛杂交瘤，二筛特定抗体一筛杂交瘤，二筛特定抗体组织培养组织培养体内外培养体内外培养疾病的诊断、治疗、预防疾病的诊断、治疗、预防获得具优良性状的杂种植株获得具优良性状的杂种植株1. 1.

7、在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时，将抗原注在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时，将抗原注射到小鼠体内，可获得（多选）射到小鼠体内，可获得（多选） A AT T淋巴细胞淋巴细胞 B B浆细胞浆细胞 C C抗体抗体 D D记忆细胞记忆细胞BCD2.2.生物导弹生物导弹”是指是指A.A.单克隆抗体单克隆抗体 B.B.杂交瘤细胞杂交瘤细胞C.C.产生特定抗体的产生特定抗体的B B淋巴细胞淋巴细胞D.D.在单抗上连接抗癌药物在单抗上连接抗癌药物D3. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定

8、培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞 A B C D C4.4.下列过程中，发生膜融合的是（多选）下列过程中，发生膜融合的是（多选）A A植物体细胞杂交植物体细胞杂交B B受精过程受精过程C C氧进入细胞中的线粒体氧进入细胞中的线粒体D D浆细胞分泌抗体浆细胞分泌抗体ABD5 5“白菜白菜甘蓝甘蓝”杂种植株是将白菜与甘蓝的原生质体杂种植株是将白菜与甘蓝的原生质体进行融

9、合得到杂种细胞，再经组织培养而获得的。对此下进行融合得到杂种细胞，再经组织培养而获得的。对此下列说法正确的是列说法正确的是A A培育出的培育出的“白菜白菜甘蓝甘蓝”植株不能结籽植株不能结籽B B该培育过程不遵循孟德尔的遗传定律该培育过程不遵循孟德尔的遗传定律C C培育过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等培育过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程过程D D动物细胞融合技术与上述培育过程所应用的基本技术动物细胞融合技术与上述培育过程所应用的基本技术完全相同完全相同B6.6.对下列有关实例形成的原理的解释，正确的是对下列有关实例形成的原理的解释，正确的是A A、无子番茄的获得是利用了多倍体育种的原理