甲氧基乙氧基与羟丙氧基测定法二部检验标准操作规程

1、1. 目的：建立甲氧基、乙氧基与羟丙氧基测定法(二部)检验标准操作规程，并按规程进行检验，保证检验操作规范化。2. 依据： 2.1. 中华人民共和国药典2010年版二部。3. 范围：适用于所有用甲氧基、乙氧基与羟丙氧基测定法(二部)测定的供试品。4. 责任：检验员、质量控制科主任、质量管理部经理对本规程负责。5. 正文：5.1. 本法系采用气相色谱法（附录V E）或容量法测定甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙纤维素或羟丙甲纤维素等药用辅料中所含的甲氧基、乙氧基和羟丙氧基。可选择第一法或第二法测定，当第二法测定结果不符合规定时，应以第一法测定结果为判定依据。5.2. 第一法（气相色谱法）。5.2.1.

2、 色谱条件与系统适应性试验：用25%苯基-75%甲基聚硅氧烷为固定液，涂布浓度为20%的填充柱，或用6%氰丙基苯基-94%二甲基硅氧烷（或极性相近的固定液）为固定液的毛细管色谱柱；起始温度为100，维持8分钟，再以每分钟50的速率升温至230，维持2分钟；进样口温度为200；检测器【氢火焰离子化检测器（FID）或热导检测器（TCD）】温度为250。理论板数按正辛烷峰计算不低于1500（填充柱）或10000（毛细管柱），对照品峰与内标物质峰的分离度应符合要求。取对照品溶液1l，注入气相色谱仪，连续进样5次，计算校正因子，相对标准偏差应不大于3.0%。5.2.2. 测定法：取供试品约65mg，精密

3、称定，置已称重的反应瓶中（可取10ml的顶空进样瓶），加己二酸80mg，精密加入内标溶液（取正辛烷0.5g，置100ml量瓶中，加邻二甲苯溶解并稀释至刻度，摇匀，即得）与57%氢碘酸溶液各2ml，密封，精密称定，于130150振荡60分钟，或在130150加热30分钟后，剧烈振摇5分钟，继续在130150加热30分钟，冷却，精密称定，若减失重量小于反应瓶中内容物的0.50%，且无渗漏，可直接取混合物的上层液体作为供试品溶液；若减失重量大于反应瓶中内容物的0.50%，则应按上法重新制备供试品溶液。另取己二酸80mg，置已称重的反应瓶中，精密加入内标溶液与57%氢碘酸溶液各2ml，密封，精密称定，

4、根据供试品中所含甲氧基、乙氧基和羟丙氧基的量，用注射器穿刺加入相应的碘甲烷、碘乙烷和2-碘丙烷对照品，精密称定，两次称重结果相减即为对照品的加入量。振摇约30秒钟，静置，取上层液体作为对照品溶液。取供试品溶液与对照品溶液各1l，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算，并将结果乘以系数【碘甲烷（分子量141.94）转换为甲氧基（分子量31.03）系数为0.2186；碘乙烷（分子量155.97）转化为乙氧基（分子量45.06）系数为0.2889；2-碘丙烷（分子量169.99）转换为羟丙氧基（分子量75.09）系数为0.4417】即得。5.3. 第二法（容量法）。5.3.1. 羟丙氧

5、基测定。5.3.1.1. 蒸馏装置：如图一。图中D为25ml双颈蒸馏瓶，侧颈与外裹铝箔的长度为95mm的分馏柱E相连接；C为接流管，末端内径为0.251.25mm，插入蒸馏瓶内；B为蒸汽发生管(25mm×150mm)，亦具末端内径为0.251.25mm的气体导入管，并与C相通；F为冷凝管，外管长100mm，与E连接。G为125ml具刻度的带玻塞锥形瓶，供收集馏液用。D与B均浸入可控温的电热油浴A中，维持温度为155。5.3.1.2. 测定法：取各品种项下规定量的供试品，精密称定，置蒸馏瓶D中，加30(g/g)三氧化铬溶液10ml。于蒸汽发生管B中装入水至近接头处，连接蒸馏装置。将B与

6、D均浸入油浴中(可为甘油)，使油浴液面与D瓶中三氧化铬溶液的液面相一致。开启冷却水，必要时通入氮气流并控制其流速为每秒钟约1个气泡。于30分钟内将油浴升温至155，并维持此温度至收集馏液约50ml，将冷凝管自分馏柱上取下，用水冲洗，洗液并入收集液中加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)滴定至pH值为6.97.1(用酸度计测定)，记下消耗的容积V1(ml)，而后加碳酸氢钠0.5g与稀硫酸10ml，静置至不再产生二氧化碳为止，加碘化钾1.0g，密塞，摇匀，置暗处放置5分钟，加淀粉指示液1ml，用硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)滴定至终点，记下消耗的容积V2(ml)。另作空白

7、试验，分别记下消耗的氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)与硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)的容积Va与Vb(ml)，按下式计算，即得。羟丙氧基的含量()(V1M1KV2M2)×(0.0751W)×100式中 K为空白校正系数M1VaM2Vb；V1为供试品消耗氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)的容积，ml；V2为供试品消耗硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)的容积，ml；Va为空白试验消耗氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)的容积，ml；Vb为空白试验消耗硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)的容积，ml；W为供试品的重量，g；M1为氢氧化钠滴定液的浓度，mol/L

8、；M2为硫代硫酸钠滴定液的浓度，mol/L。0.0751为羟丙氧基（OCH2CHOHCH3）的毫摩尔质量。5.3.2. 甲氧基测定。5.3.2.1. 仪器装置：如图二。A为50ml圆底烧瓶，侧部具一内径为1mm的支管供导入二氧化碳或氮气流用；瓶颈垂直装有长约25cm、内径为9mm的直形空气冷凝管E，其上端弯曲成出口向下、并缩为内径2mm的玻璃毛细管，浸入内盛水约2ml的洗气瓶B中；洗气瓶具出口为一内径约7mm的玻璃管，其末端为内径4mm可拆卸的玻璃管，可浸入两个相连接的接受容器C、D中的第一个容器C内液面之下。5.3.2.2. 测定法：取干燥的供试品（相当于甲氧基10mg），精密称定，置烧瓶中

9、，加熔融的苯酚2.5ml与氢碘酸5ml，连接上述装置；另在两个接收容器内，分别加入10醋酸钾的冰醋酸溶液6ml与4ml，再各加溴0.2ml；通过支管将CO2或N2气流缓慢而均衡地(每秒钟12个气泡为宜)通入烧瓶，缓缓加热使温度控制在恰使沸腾液体的蒸气上升至冷凝管的半高度(约至30分钟使油液温度上升至135140)，在此温度下通常在45分钟可完成反应(根据供试品的性质而定， 如果供试品中含有多于两个甲氧基时，加热时间应延长到13小时)。而后拆除装置，将两只接收器的内容物倾入250ml碘瓶(内盛25醋酸钠溶液5ml)中，并用水淋洗使总体积约为125ml，加入甲酸0.3ml，转动碘瓶至溴的颜色消失，

10、再加入甲酸0.6ml，密塞振摇，使过量的溴完全消失，放置12 分钟，加入碘化钾1.0g与稀硫酸5ml，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于0.5172mg的甲氧基。5.4. 注意事项。5.4.1. 碘甲烷、碘乙烷和2-碘丙烷均为极易挥发性物质，应在进样前，打开反应瓶密封盖后，立即将上层液体移入进样瓶；进样瓶的密封性应良好。5.4.2. 碘甲烷、碘乙烷和2-碘丙烷均应避光保存，放置过程中释放出碘，使溶液颜色逐渐加深，每次测定前应进行标化（见附注），含量计算时应进行折算。5.4.3. 57%氢碘酸可直接从市场购

11、买，也可取市售的氢碘酸试剂置于全玻璃仪器中，加适量次亚磷酸，使氢碘酸的颜色由棕色变为无色，加热，同时缓缓通入氮气，收集126127的馏分，纯化后的氢碘酸贮藏于有良好密封性的棕色玻璃瓶中，充氮保存。5.5. 附注。碘甲烷、碘乙烷和2-碘丙烷的标化。5.5.1. 纯度测定（气相色谱法）。避光操作。用6%氰丙基苯基-94%二甲基硅氧烷（或极性相近的固定液）为固定液的毛细管色谱柱；起始温度为60，维持8分钟，再以每分钟10的速率升温至150，维持10分钟；进样口温度为200；检测器【氢火焰离子化检测器（FID）或热导检测器（TCD）】温度为250。取本品1l，注入气相色谱仪，记录色谱图，按不加校正因子的峰面积归一化法计算主峰相对百分含量，不得低于99.5%。5.5.2. 含量测定（容量法）。避光操作。取乙醇10ml，置100ml量瓶中，精密称定，加碘甲烷（或碘乙烷、或2-碘丙烷）1.0ml，精密称定，用乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取20ml，置100ml量瓶中，精密加硝酸银滴定液（0.1mol/L）50ml与硝酸2ml，时时振摇2小时，避光，放置过夜，继续时时振摇2小时，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液20ml，精密量取续滤液50ml，加硫酸铁铵