临床检验仪器学

1、临床检验仪器学第一章 概论1. 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位 浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小 的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。2. 误差:当对某物理量进行检测时, 所测得的数值与标称值 (真值 之间的差异。 误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(输入为零时,仪器输出信号的波动 或变化范围。4. 精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程 度。 精度是一个定性的概念, 其高低是用误差来衡量的, 误差大则精度 低,误差小则精度高。5. 可靠性:仪器在

2、规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下,执行其功 能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。6. 重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件下, 在一个不太长的时间间隔内, 连续多次检测同一参数, 所得到的数据 的分散程度。 重复性与精密度密切相关, 重复性反映一台设备固有误 差的精密度。7. 分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、 能响应的输入量 的最小值。8. 线性范围:输入与输出呈正比例的范围,也就是反映曲线呈直线的那一段所对 应的物质含量范围。1. 临床检验仪器具有哪些特点?答:临床检验仪器具有以下特点:结构复杂、涉及的技术领域广、技术先进

3、、精 度高、对使用环境要求严格。2. 临床检验仪器常用的性能指标有哪些?答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差 小;分辨率高;可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。 3. 通常临床检验仪器的分类是从哪两个方面进行的?答:通常以临床检验的方法为主对临床检验仪器进行分类或以检验仪器的工作原 理为主对临床检验仪器进行分类。4. 临床检验仪器有哪些主要部件?答:通常,临床检验仪器有取样装置、预分离系统、分离系统、检测器、信号处 理系统、显示装置、补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等主要部件。第二章 显微镜技术和显微镜1. 光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明

4、将小物体形成放大影像的精密光学仪 器, 由光学系统、 机械装置和照明系统三部分组成。 光学系统由 物镜和目镜组成, 其核心是物镜和目镜中的两组透镜, 其放大成 像的机理是先由物镜形成放大的实像, 再由目镜进一步放大成虚 像,最后在人眼中形成实像。2. 荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产 生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。3. 相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结 构间的对比度, 用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微 镜。4. 激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜 和聚光镜互相共焦点,

5、 使得只有从标本焦面发出的光 线聚焦成像, 而焦面以外的漫射光不参加成像, 改变 焦平面, 可获得细胞或原标本不同层次的图像, 从而 得到样品的三维结构图像。5. 电子显微镜:简称电镜,是利用波长很短的电子束作为照明光源,通过电子流 对细胞样品的投射或反射及电磁透镜的多级放大而在荧光屏上 成像的大型精密仪器。6. 放大率:或称放大倍数,是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的像的大 小相对于原物体大小的比值。7. 数值孔径:又叫镜口率,是物体与物镜间媒质的折射率 n 与物镜孔径角的一半 正弦值的乘积。8. 显微摄影术:是利用显微照相装置,把显微镜视野中所观察到物件的细微结构 真实地记录下来,以供

6、进一步分析研究之用的一种技术。 9. 景深和焦长:在成一幅清晰像的前提下,像平面不变,景物沿光轴前后移动的 距离称 “景深” 。 景物不动, 像平面沿光轴前后移动的距离称 “焦 长” 。10. 视野:又称视场,是指通过显微镜所能看到的标本所在空间的范围。11. 齐焦:当某一物调焦清晰后,变换其他物镜时,也能基本保证焦距适当,成 像清晰。12. 像差:光学仪器不可能使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着高斯光学 的理想光路成像,从而导致成像在形状方面的缺陷。13. 色差:是一种由白光或复色光在即使严格满足高斯条件下也存在的特殊类型的成像缺陷。 当用白光或复色光经透镜成像时, 会因为各种色光存在着

7、 光程差而造成颜色不同、 位置不重合、 大小不一致的不同成像效果, 从 而造成像和物体的较大失真。1. 简述光学显微镜的工作原理。答:显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统, 是利用光学原理, 把人 眼所不能分辨的微小物体放大成像, 供人们提取物质微细结构信息的光学仪 器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜,而焦距较长,靠 近眼睛、 成虚像的透镜组称为目镜。 被观察物位于物镜的前方, 被物镜作第 一级放大后成一倒立的实像, 然后此实像再被目镜作第二级放大, 得到最大 放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。2. 简述光学显微镜的结构组成。答:基本结构包括光学系统和机械系统

8、两大部分。 光学系统是显微镜的主体部分, 包括物镜、 目镜、 聚光镜及反光镜等组成的照明系统。 机械系统是为了保证 光学系统的成像而配置的。 包括调焦系统、 载物台和物镜转换器等运动夹持 部分以及底座、镜壁、镜筒等支持部件。照明装置的主要部件有光源、滤光 器、聚光镜和玻片等。3. 光学显微镜的性能参数有哪些?这些参数间的影响和制约关系如何?答:显微镜的性能参数主要有放大率、数值孔径、分辨率、视场、景深、镜像亮 度、 镜像清晰度、 工作距离和机械筒长。 显微镜的数值孔径与其放大率成正 比 u ,与分辨率、景深成反比,它的平方与图像亮度成正比。因此,使用较 大数值孔径的物镜,其放大率和分辨本领较高

9、,淡视场、景深、工作距离较 小。4. 简述医学检验中常用的荧光显微镜的原理、结构及用途。答:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质, 产生能观察到 的各种颜色荧光的一种光学显微镜。荧光显微镜是由光源、绿色系统和光学系统等主要部件组成。荧光显微镜与 普通光学显微镜主要区别在于光源和滤光片不同。通常用高压汞灯作为光 源,可发出紫外线和短波长的可见光;滤光片有二组,第一组称激发滤片, 位于光源和标本之间,仅允许能激发标本产生荧光的光通过(如紫外线 ; 第二组是阻断滤片,位于标本和目镜之间,可把剩余的紫外线吸收掉,只让 激发出的荧光通过,这样既有利于增强反差,又可保护眼睛免受紫外线的损

10、伤光学系统主要有反光镜、聚光镜、目镜、物镜、照明系统等组成。荧光显微镜可用于观察检测细胞中能与荧光染料特异结合的特殊蛋白、 核酸 等,其标本染色简单。荧光图像色彩鲜亮,而且敏感度较高。5. 电镜的基本类型有哪些?各有什么特点?答:电镜的基本类型有透射电子显微镜与扫描电子显微镜。 透射显微镜与扫描电 子显微镜都用于反复打与分辨微小结构, 这两种技术通过标本对电子束的影 响来探测标本结构。 透射电子显微镜的电子束穿过标本, 聚焦成像于屏幕或 显像屏上, 扫描电子显微镜的电子束在标本表面进行扫描, 反射的电子聚焦 成像于屏幕或显像屏。 透射电子显微镜用于研究超薄切片标本, 有极高分辨 率, 可给出细

11、微的胞内结构。 扫描电子显微镜可以反映未切片标本的表面特 征。6. 扫描电镜与透射电镜相比有哪些特点? 能 够 与 直 接 观 察 样 品 表 面 的 结 构 , 样 品 尺 寸 可 大 至 120mm*80mm*50mm; 样品制备过程简单,不用切成薄片; 样品可以在样品室作三度空间的平移和旋转,因此,可以从各种角度对 样品进行观察; 景深答,图像富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍,比 透射电镜大十几倍; 图像的放大范围广,分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍,它基 本上包括了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介 于光学显微镜与透射显微镜之间,可达 3nm ;

12、电子束对样品的损伤与污染程度较小; 在观察形貌的同时,还可利用从样品发出的其他信号作成分分析。 7. 电镜由哪几个主要部分组成?对成像质量影响较大的部件有哪些?答:电子显微镜主要由电子光学系统(电子透镜和电子枪 、真空系统、供电系 统、机械系统和光差显示系统等几部分组成。对成像质量影响较大的部件有电子透镜和电子枪。电子透镜存在各种 镜差, 这是影响成像这两个的主要因素。 在实际设计中, 是通过适当缩小口 径、 提高加速电压、 增大电极圆筒或线圈直径及减低放大率来减少球差, 通 过降低电子的初速度、提高加速电压和稳定电源电压来减少色差的。8. 光学显微镜与电子显微镜的主要区别有哪些? 照明源不同

13、。 电镜所用的照明源是电子枪发出的电子流, 而光镜的照明源 是可见光。 有雨电子流的波长远短于光波波长, 故电镜的放大及分辨率显 著高于光镜。 透镜不同。 电镜中起放大作用的物镜时电磁透镜, 而光镜的物镜则是玻璃 磨制而成的光学透镜。 电镜中的电磁透镜共有三组, 分别与光镜中聚光镜、物镜和目镜的功能相当。 成像原理不同。 在电镜中, 作用于被检样品的电子束镜电磁透镜放大后达 到荧光屏上成像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理 是, 电子束作用于被检样品时, 入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射, 有雨样品不同部位对电子有不同散射度, 故样品电子像以浓淡呈现。 而光 镜中样品的物像以

14、亮度差呈现, 它是由备件样品的不同结构吸收光线多少 的不同所造成。 所用标本制备方式不同。电镜观察所用组织细胞标本的制备程序较复杂, 技术难度和费用都较高,在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的 试剂和操作, 最后还需将包埋的组织块切成超薄标本片。 而光镜观察的标 本则一般置于载玻片上,如细胞涂片标本,细胞滴片标本等。9. 简述相衬显微镜的工作原理、结构特点及其主要用途。答:相衬显微镜的基本原理是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差, 从而提 高了各种结构间的对比度, 使各种结构变得清晰可见。 光线透过标本后发生 折射, 偏离了原来的光路同时被延迟了 1/4(波长 , 如果再增加或减少 1

15、/4, 则光程差变为 1/2,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减小,提高反差。 相衬显微镜的结构特点:(1环形光阑。位于光源与聚光镜之间,作 用是使透过聚光镜的光线形成空心光锥,聚焦到标本上 ; (2相位板。在 物镜中加了涂有氟化镁的相位板, 可将直射光或衍射光的相位推迟 1/4, 并 能吸收直射光(背景光的光强,使直射光与衍射光的光强趋于一致,能更 好地突出干涉的效果。相衬显微镜主要用于观察活细胞和未染色的标本。 第三章 离心技术和离心机1. 离心现象:物体远离圆心运动的现象,也叫离心运动。2. 重力沉降:液体中的微粒受重力的作用,较重的微粒下沉与液体分开。3. 沉降速度:在强大离心力的作用

16、下,单位时间内物质的运动的距离。4. 扩散现象:在介质中,扩散是由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要 是由于密度差引起的,这种现象称为扩散现象。5. 解释 RCF :相对离心力。是指在离心力场中,作用于颗粒的离心力相当于地球 重力的倍数,单位是重力加速度“ g ” 。6. 沉降系数:是指颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。7.K 系数:是用来描述在一个转子中,将粒子沉降下来的速率。也就是溶液恢复 成澄清程度的一个指标。1. 什么事离心技术,离心技术主要用于哪些方面?答:应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术, 实现离心技术的仪器是离心机。 离心技术主要用于各种生物

17、样品的分离、 纯化和制备, 在细 胞生物学和分子生物学的每一进程中,总可见到离心技术的运用。2. 离心机的工作原理是什么?1 离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进 行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。2 悬浮液在高速旋转下,有雨巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒以一定 的速度沉降,从而使溶液得以分离。3 颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。4 微粒在重力场下移动的速度和微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及 液体的黏度有关。5 离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强答的离心力,迫使液体中微 粒克服扩散加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮

18、力密度的物质 分离开。3. 什么事离心机及离心现象?答:当物体所受外力小于运动所需要的向心力时, 物体将向远离圆心的方向运动。 物体远离圆心运动的现象。也叫离心运动。4. 离心力的数学表达公式是什么?答:公式 Fc=m2r=m(2*N/602r=4*2N 2rm/3600式中 是旋转角速度, N 是每 分钟转头旋转次数, r 为离心半径, m 为质量。5. 什么叫最小离心力场及最大离心力场?答:通常称离心管顶部到旋转中心的距离为最小半径 R min , 该处承受的离心力场 为最小离心力场。 通常称离心管底部到旋转中心的距离为最小半径 R max , 该 处承受的离心力场为最大离心力场。6. 常

19、用的离心方法分几类?答:常用的离心方法大致可分为平衡离心法、 等密度离心法、 经典式沉降平衡离 心法等三类7. 差速离心法的优、缺点是什么?答:差速离心法的优点:(1操作简单; (2分离时间短、重复性高; (3样品 处理量大。缺点(1分辨率有限、分离效果差; (2壁效应严重; (3颗 粒被挤压,离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。8. 什么是密度区带离心法?答:又称为区带离心法, 是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀和沉降平衡, 在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上, 形成不同区带的分 离方法。9. 什么是速率区带离心法?答:速率区带离心法是根据分离的粒子在离心力作

20、用下, 在梯度液中沉降速度的 不同, 离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层次形成几条分 开的样品区带,达到彼此分离的目的。10、什么是等密度区带离心法?答:党不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮 起, 一致沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上 (即等密度点 形成区带, 称为等密度区带离心法。11. 低速离心机的大致结构有哪些?答:结构较为简单,由电动机、离心转盘(转头 ,调速器、定时器、离心套管 与底座等主要部件构成。第七章 电化学临床分析技术和临床相关仪器1. 电化学分析法:利用溶液电化学性质将被测物质的浓度转变成电学参数而进行 检测的方法2. 离子选

21、择性电极:用特殊敏感膜制成的、对溶液中特定离子具有选择性响应的 电极。3. 基流:党 PO 2的值为零时,电路中存在的微小电流值。4.PO 2电极:PO 2电极是一种氧化还原电极,电流的大小与血液样品中 PO 2值有 关。5.PCO 2电极:又称为 “ Severinghaus ” 电极, 主要由玻璃电极、 参比电极以及 CO 2渗透膜组成的,电位值随血液 PCO 2的大小变化而变化。1. 什么是电化学分析法?它利用哪些电化学特性进行检测?答:电化学分析法是利用溶液电化学性质将被测物质的浓度转变成电学参数而进 行检测的方法。电化学特性包括电位、电流、电导和电量等。2.pH 测定的基本原理是什么

22、?常使用什么电极进行检测?答:pH 值检测常用残壁电极为正极,以指示电极为负极, 组成一个电化学电池, 通过测量电池的电动势 E 而测得响应溶液的 pH 值。 电池的电动势 E 与样本 中 pH 值的大小之间有下列关系式 E=k+2.303RTpH/F, 常利用玻璃电极检测 血液样品的 pH 值。3. 离子选择性电极的工作原理是什么?其基本组成部分有哪些?答:离子选择性电极是一种用特殊敏感膜制成的, 对溶液中特定离子具有选择性 响应的电极。其电极电位与血液样品离子的浓度 C x 之间有如下关系: E ISE x f x /(nf。 将 ISE 与残壁电极浸入样品溶液中构成原电池, 通过测量 E

23、 , 便求得被测离子的活度或浓度。 离子选择性电极通常由电极管、内参比电极、内参比溶液和敏感膜四个部分组成。4. 氧分压 PO 2电极属于何类电极?简述其组成。答:PO 2电极是氧化还原电极,对氧的测量是基于电解氧的原理实现的。血液样 品中的 O 2借助电极外的 PO 2梯度透过渗透膜而浸入电极。党外加电压在 0.4V0.8V内时, O 2在铂阴极被还原。 当 PO 2梯度相对稳定时, 就产生一个 稳定的电解电流, 称为极限扩散电流。 因此, 通过测定电流变化即可测定血 液标本中的氧气分压。5. 简述电解质分析仪的基本构成。答:湿式电解质分析仪由离子选择性电极、参比电极、分析箱、测量电路、控制

24、 电路、驱动电机和显示器等组成。6.PCO 2电极属于何种电极?简述其组成。答:PCO 2电极是气敏电极,是由 pH 玻璃电极和银氯化银电极组装在一起的 复合电极。复合电极装入有机玻璃圆筒中,塑料套上有气体渗透膜,内装 PCO 2电极外缓冲液(含 NaHCO 3-NaCl ,它的 pH 可以因血液的 PCO 2而改 变。7. 常见的电解质分析仪这样进行分类?答:如果按自动化程序分类, 电解质分析仪可分为半自动电解质分析仪和全自动 电解质分析仪; 按工作方式分类, 电解质分析仪可分为湿式电解质分析仪和 干式电解质分析仪; 按常见电解质分析仪分类, 电解质分析仪可分为自动电 解质分析仪、函电介质分

25、析的血气分析仪和含电解质分析的自动生化分析 仪。8. 电解质分析仪到的日常维护包含哪几个方面?答:日常维护应按照使用说明树上的要求,进行每日维护,每周维护,半年维护 和停机维护。9. 电解分析仪流路系统的保养包括:流路保养和全流路清洗。10. 在电解分析仪中电极系统的保养包括:钠电极、钾电极、氯电极和参比电极。 11. 在电解分析仪中,仪器的哪些部位最易发生管路堵塞?如何排除故障? 答:采样针与空气检测器部分、 电极腔前端与末端部分、 混合器部分以及泵管和 废液管。 管路堵塞排除方法是:(1 采样针与空气检测器部分。 确定阻塞后, 可直接用清洗液进行保养管路,亦可拆下空气检测器,用 NaClO

26、 溶液反复 冲洗进样针和空气检测器即可; (2 电极腔前端与末端部分。 可用清洗液进 行管路清洗保养,亦可将电极全部拆下,将电极腔用 NaClO 溶液浸泡 2分 钟左右,再反复清洗即可; (3混合器部分。主要用清洗液或去蛋白液进行 混合器清洗程序,亦可将混合器拆下用注射器将 NaClO 溶液注入混合器浸泡几分钟,然后反复冲洗即可; (4泵管和废液管的堵塞。可将废液泵管放 松, CO 2电极山不敢端废液管拔出, 用注射器吸入清洗液或蒸馏水冲洗吸管 路即可。12. 简述血气分析仪的基本结构及工作原理。答:血气分析仪的基本结构可分为电极、管路和电路三大部分。其工作原理是:被测血液样品在管路系统的抽吸

27、下,进入样品室内的测量 毛细管中。测量毛细管的管壁上开有四个孔,孔内分别插有 pH 、 PCO 2和 PO 2三支测量电极和一支参比电极。其中 pH 和 pH 参比电极共同组成对 pH 值的测量系统。 血液样品进入样品室的测量管后, 管路系统停止抽吸, 样品 同时被四个电极所感测。 电极产生对应于 pH 、 PCO 2和 PO 2三项参数的电信 号。 这些电信号分别镜放大、 模数转换后送到微处理机。 经微机处理系统处 理、运算后,再分别被送到各自的显示单元显示或打印机打印出测量结果。 测量系统的所有部件包括温度控制、 管道系统的动作等均由危机或计算机芯 片控制。13. 在电解分析仪中,如何进行

28、电极系统的保养?答:电极系统的保养主要包括钠电极、钾电极、氯电极和参比电极的保养。坚持 每日用厂家提供的清洁液和钠电极调整是最基本的保养。 钾电极为选择性膜 电极, 使用过程中会吸附蛋白质, 影响电极的响应灵敏度。 每月至少更换一 次内充液。 氯电极为选择性膜电极, 使用过程中亦可吸附蛋白质, 最好用物 理法进行膜电极的清洁。14. 简述血气分析仪电路系统的工作原理。答:电路系统工作原理是:被测样品通过 S 型的样品预热器, 被吸入到电极测量 室内,样品分别被由 pH 、 PCO 2、 PO 2、 Hct 、 Na +、 K +、 Cl 、 Ca 2+、 、 GLU 和参比电极所组成的电极测量

29、系统有选择的检测,并转化成相应的电极信 号, 这些信号经各种的频道被放大, 再经模数转换后变成数字信号, 经微机 处理、运算后,由荧光屏显示出来或从打印机打印出结果。15. 血气分析仪液路系统具有哪两种功能?气路系统的供气方式有几种?答:液路系统的两种功能,一是提供 pH 值电极系统定标用的两种缓冲液,二是 自动将定标和测量时停留在测量毛细管管中的缓冲液或血液冲洗干净。 气路 系统的供气方式有两种, 一是压缩气瓶供气方式, 又叫外配气方式; 另一种 是气体混合器供气方式,又叫内配气方式。16. 血气分析时,标准液和标准气分别用于何种电极的定标?答:血气分析时, pH 电极使用 7.383和 6

30、.840两种标准缓冲液来进行定标; PO 2和 PCO 2电极用两种混合气体来进行定标。 第一种混合气含 5%的 CO 2和 20%的 O 2;第二种含 10%的 CO 2,不含 O 2。17. 一般的血气分析仪使用哪 4种电极?答:pH 、 PCO 2、 PO 2电极和 pH 参比电极。18. 血气分析仪内部具有哪两个泵?答:一为真空泵,另一为蠕动泵。可利用这两个泵来完成仪器的定标、测量和冲 洗。19. 在血气分析仪中,如何对 pH 电极进行保养?答:如果 pH 电极在空气中暴露 2h 以上,应将其放在缓冲液中浸泡 6h24h才能 使用。 血液中的蛋白质容易粘附在电极表面, 必须经常按血液

31、缓冲液 水 空气的顺序进行清洗。 亦可用随机附送的含蛋白质水解酶的清洗液或自配 的 0.1%胃蛋白酶盐酸溶液浸泡 30分钟以上,用生理缓冲液洗净后浸泡备 用。若清洗后仍不能正常工作,应更换电极。第十一章 流式细胞技术与流式细胞仪1. 流式细胞仪:是以激光为光源,集流体力学、电子物理技术、光电测量技术、 计算机技术、 细胞荧光化学和单克隆抗体等技术为一体的新型高 科技仪器。2. 流式细胞术:应用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的生物颗粒进行快 速的、多参数的定量分析和分选的技术。3. 狭缝扫描流式细胞仪:被检细胞直径大于激光光斑直径,当细胞通过光束时, 细胞各部分被依次先后扫描, 得到一维的

32、细胞轮廓组方 图, 可计算出细胞直径大小、 核直径大小、 核浆比例等 一系列的形态学信息的流式细胞仪。4. 鞘液流:流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动,形成包绕样品流的流束。5. 侧向角散射:侧向角散射是指与激光束正交 90o 方向的散射信号。6. 长通滤光片:能使特定波长以上的光通过,特定波长以下的光不能通过的滤光 片。7. 短通滤光片:与长通滤光片相反,特定波长以下的光通过,特定波长以上的光 被吸收或返回。8. 带通滤光片:带通滤光片允许一定波长范围内的光通过,一般滤光片上有两个 数值, 一个为允许通过波长的中心值, 另一个为允许通过光波段 的范围。9. 细胞自发荧光:细胞自身在激光照射下发

33、出微弱的荧光信号。10. 零分辨率的流式系统:一般流式细胞仪的激光光斑为椭圆形,光斑直径大于 被检细胞体积, 只能提供细胞内某种生物化学成分的参数, 不能对细胞形态以亚细胞形态进行分辨, 所以称之 为零分辨率的流式系统。11. 分选收获率:指被分出的细胞占原来溶液中该细胞的百分比。12. 分选速度:指每秒可提取所要细胞的个数。13. 分选纯度:指要分选的目的细胞占分选出细胞的百分比。1. 简述流式细胞仪生物学颗粒分析原理。答:经特异荧光染料染色后的样品沿流动室的轴心向下流动, 流动室轴心至外壁 的鞘液也向下流动, 形成包绕细胞悬液的鞘液流, 鞘液和样品流的喷嘴附近 组成一个圆柱流束, 与水平方

34、向的激光束垂直相交。 染色的细胞受激光照射 后发出荧光,这些信号分别被光电倍增管接收,经过计算机储存、计算、分 析这些数字化信息,就可得到细胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性 质等物理和生化指标。2. 对 BCA 进行评价的指标有哪些?答:在细胞计数、血红蛋白测定方面,主要评价仪器测试样本的总变异、携带污 染率、现行范围、可比性和准确性等,这对保证检验质量讲起主要作用。 3. 如何对 BCA 进行分类?答:按自动化程度分半自动血细胞分析仪、 全自动血细胞分析仪、 血细胞分析工 作站、血细胞分析流水线;按检测原理分电容型、光电型、激光型、电阻抗 型、联合检测型、干式离心分层型、无创型;按对白

35、细胞的分类水平分二分 群、三分群、五分群、五分群 +网织红 BCA 。4. 流式细胞仪依据什么进行分类?各类型有什么特点?答:流式细胞仪根据功能不同可分为临床型和科研型。 临床型只有分析功能, 没 有分选功能,仪器的光路调节系统固定,自动化程度高,操作简单,易学易 掌握。 科研型既有分析功能又有分选功能, 可加速将所感兴趣的细胞分选出 来, 并可将单个或指定个数的细胞分选到待定的容器里, 同时可选配多种波 长和类型的激光器,适用于更广泛更灵活的科学研究。流式细胞仪根据其结构不同又可分为一般流式细胞仪和狭缝扫描流式细胞 仪。前者的激光光斑为椭圆形,光斑直径大于被检细胞体积,只能提高那个 细胞内某

36、种生物化学成分的参数,不能对细胞形态和亚细胞形态进行分辨。 狭缝扫描流式细胞仪是一种高分辨率的检测仪器, 被检细胞直径大于激光光 斑直径,细胞通过光束时各部分被依次扫描,根据荧光信号的先后,就可得 到一维的细胞轮廓组方图,可计算出细胞直径大小、核直径大小、核浆比例 等一系列的形态学信息。5. 简述联合检测型 BCA 白细胞分类计数的实质和共有特点。答:实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、 嗜碱性粒细胞检出, 发现 异常细胞。共有特点:均使用了鞘流技术,将细胞重叠限制到最低限度。 6. 联合检测型 BCA 在白细胞分类上主要有哪些技术?答:联合检测型 BCA 在白细胞分类技术上主要有:(

37、1容量、电导。光散射联 合检测技术; (2电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术; (3多角度激光 散射、电阻抗联合检测技术; (4光散射与细胞化学检测技术。7. 流式细胞仪所检测的信号有哪些?这些信号代表的意义和作用是什么?答:流式细胞仪所检测的信号有散射光和荧光信号。(1散射信号:散射光分为前向角散射和侧向角散射,两个参数组合,可区分 经裂解红细胞处理后外周血白细胞中淋巴细胞、 单核细胞和粒细胞三个细胞 群体, 或在未进行裂解红细胞处理的全血样品中找出血小板和红细胞等细胞 群体。(2荧光信号:一种是细胞自身在激光照射下发出微弱的荧光信号,另一种是 经过特异荧光素标记细胞后, 受激发照射得到的荧

38、光信号, 通过对这类荧光 信号的检测和定量分析能了解所研究细胞的存在和定量。7. 光学法血凝仪从光路结构上分哪几类?答:根据仪器光路结构的不同又可分为散射比浊法和透射比浊法:(1 散射比浊 法:根据待测样品在凝固过程中散射光的变化来确定凝固终点; 其光源、 样 本、接收器成直角排列;接收器得到的完全是浊度测量所需的散射光。 (2 透射比浊法:根据待检样品在凝固过程中吸光度的变化来确定凝固终点; 其 光源、 样本、 接收器成一直线排列; 接后期得到的事很强的透射管不光合较 弱的散射光。第十二章 血液分析技术与相关仪器1. 血细胞分析仪:指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床常规检 验仪

39、器。2.VCS 技术中 V 、 C 、 S 各代表什么意思:V 代表体积,采用电阻抗进行血细胞 计数和体积测量; C 代表电导,依据细胞可影响高频电流传导的特性,采用 高频电磁探针测量细胞内部结构, 细胞内核浆比例, 质粒的大小和密度, 从 而区别体积完全相同而性质不同的两个细胞; S 代表光散射,对细胞颗粒的 构型和颗粒质量有较强的鉴别能力, 通过测定单个细胞的散射光强度把粒细 胞分开。1. 血细胞分析仪 BCA 的概念及功能是什么?答:概念:指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床常规检验仪器。 主要功能:血细胞计数;白细胞分类;血红蛋白测定;相关参数计算。2. 简述电阻抗(库尔特

40、血细胞检测原理。答:血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体, 其电阻值大于稀释溶液 的电阻值; 血细胞通过检测器的孔径感受区时, 检测器内外电极之间的恒流 源电路的电阻值瞬间增大, 产生电压脉冲信号; 脉冲信号数等于通过的细胞 数,脉冲信号幅度大小与细胞大小成正比。3. 简述电阻抗血细胞分析技术的应用及其特点。答:应用:白细胞计数和分群、血小板计数、红细胞平均体积和血小板平均体积 测定及获得其他相关参数等。缺点:(1白细胞分类计数不特异; (2技术 所限,影响红细胞有关参数的准确性; (3血小板计数的干扰因素多; (4 不易发现异常细胞。4. 简述电阻抗型 BCA 和联合检测型 BCA

41、的基本结构。答:基本结构:主要由机械系统、电学系统、血细胞检测系统、血红蛋白测定系 统、计算机和键盘控制系统以不同形式的组合而构成。5. 联合检测型 BCA 在白细胞分类上主要有哪些技术?答:联合检测型 BCA 在白细胞分类技术上主要有:(1容量、电导、光散射联 合检测技术; (2电阻抗、射频和细胞化学联合检测技术; (3多角度激光 散射、电阻抗联合检测技术; (4光散射与细胞化学检测技术。6. 血凝仪常用检测原理有哪些?答:血凝仪常用的检测原理主要:有凝固法、底物显色法、免疫学方法、干化学 技术法检测原理等。凝固法原理是最基本、最常用的方法。7. 简述血凝仪光学法检测原理。答:光学法属凝固法

42、的一种; 是利用一束光线通过样品杯, 样品杯中的血浆在凝 固过程中导致血浆浊度发生变化; 投射光或散射光的强度也发生改变; 仪器 根据光强度的变化来判断血浆凝固终点的检测方法称为光学法检测原理。 8. 简述双磁路磁珠法的测定原理。答:属词磁电检测原理。 在测试杯德两侧各有一组驱动线圈, 它们产生恒定的交 替电磁场, 使测试杯内特质的去磁小钢珠保持等幅震荡运动; 凝血激活剂加 入后, 随着纤维蛋白的增多, 小钢珠的运动振幅逐渐减弱; 另一组测量线圈 感应到小钢珠运动的变化;仪器将运动幅度衰减到 50%时确定为凝固终点。 9. 简述凝固法与免疫学方法中的透射比浊、散射比浊的区别。答:凝固法是检测血

43、浆在凝固过程中所致一系列物理量的变化, 来反映相关因子 的活性, 也称生物物理法。 凝固法中的透射比浊、 散射比浊是根据血浆中的 纤维蛋白原逐渐转变成纤维蛋白, 导致血浆浊度发生变化, 进行光电比浊测 定。 而免疫学方法中的透射比浊。 安设比浊虽属光电比浊原理的光学法, 但有抗原抗体参与。 前者是血浆凝固过程中纤维蛋白形成所致的浊度, 后者是 相应的抗原抗体反应形成的复合物所致的浊度。10. 血凝仪光学法与双磁路磁珠法主要区别及优缺点是什么?答:主要区别在于:前者是检测血浆凝固过程中光信号的变化, 后者是检测该过 程中磁电信号的变化。 光学法血凝仪测试的优点在于灵敏度高、 仪器结构简 单、易于

44、自动化。缺点是样本的光学异常、测试杯的光洁度、加样中的气泡 等都会成为测量的干扰因素。 双磁路磁珠法不受溶血。 黄疸、 高血脂症及气 泡的严重影响;该法有利于血浆和试剂的充分混匀。11. 简述半自动和全自动血凝仪的基本结构。答:半自动血凝仪的基本结构:主要由样本和试剂预温槽、 加样器、 检测系统 (光 学、 磁场 及微机组成。 全自动血凝仪基本结构包括:样本传送及处理装置、 试剂冷藏位、 样本及试剂分配系统、 检测系统、 计算机、 输出设备及附件等。 12. 简述全自动血凝仪的主要特点及其维护与保养。答:主要特点(1自动化程度高; (2检测方法多; (3速度快; (4项目任 意组合, 随机性;

45、 (5 测量精度好, 易于质控和标准化; (6 智能化程度高, 功能多; (7价格昂贵; (8对操作人员的素质要求高。维护和保养:(1 清洗或更换空气过滤器; (2检查及清洁反应槽; (3清洗洗针池及通针; (4检查冷却剂液面水平; (5清洁机械导杆和转动部分并钾润滑油; (6 即使保养定量装置; (7更换样品及试剂针; (8数据备份及恢复等。 13. 简述血凝仪的临床应用。答:临床应用主要有:(1凝血系统的检测,常规筛选实验和单个凝血因子含量 及活性的测定。 (2抗凝系统的检测。 (3纤维蛋白溶解系统的检测。 (4 临床用药监测等。14. 简述毛细管黏度计的工作原理与基本结构。答:毛细管黏度

46、计是依据牛顿流体遵循泊肃叶定律而设定的。 即一定体积的液体, 在恒定的压力驱动下,流过一定管径的毛细管所需的时间与黏度成正比。 基本结构:包括毛细管、储液池、控温装置、计时装置等。15. 简述旋转式黏度计的工作原理与基本结构。答:以牛顿粘滞定律为理论依据。 锥板式黏度计是同轴锥板构型, 平板和锥体间 充满被测样本; 调速电机带动圆形平板同速旋转; 当圆形平板以某一恒定角 速度旋转时, 转动的力矩通过被测样本传递到锥体; 样本越黏稠, 传入的力 矩越大。 当此力矩作用用锥体时, 立即被力矩传感装置所俘获, 其信号大小 与样本黏度成正比。基本结构:包括样本传感器、 转速控制与调节系统、 力矩测量系

47、统、 恒温系统。16. 毛细管黏度计有何特点?答:价格低廉、操作简单、速度快、易于普及;测定牛顿流体黏度结果可靠,使 用血浆、 血清样本测定; 难以反映全血等非牛顿流体的黏度特性; 全血在毛 细管中的不同部位, 剪切率不一样, 黏度亦不一样; 不能直接检测某一剪切 率下的表观黏度;对进一步研究 RBC 、 WBC 的变形性和血液的粘弹性等也 无能为力。17. 旋转式黏度计有何特点?答:能提供所需不同角度下的剪切率; 在被测液体中各流层的剪切率一致, 使液 体在剪切率一致的条件下做单纯的定向流动; 可以定量的了解血液、 血浆的 流变特性, RBC 与 WBC 的聚集性、变形性、时间相关性等很多流

48、变特性。 操作使用较为简单, 是目前血液流变学研究和应用较为理想的仪器。 但价格 较毛细管黏度计要贵一些,操作要求也更精细一些。18. 什么情况下需对黏度计进行非技术性能评价?指标有哪些?答:性能评价在仪器安装、维修及使用一定时间后,至少每半年,应对仪器准确 度、分辨率、重复性、灵敏度与量程进行一次检验。第十三章 尿液分析技术和相关仪器1. 年沉渣细胞的识别分析:仪器通过对前向散射光波形(散射光强度和散射光脉 冲宽度前向荧光波形(荧光波段和荧光脉冲宽度 和电阻抗值的大小综合分析, 得出细胞的形态、 细胞 截面面积、 染色片段的长度、 细胞容积等信息并绘出 直方图和散射图。 仪器通过分析每个细胞

49、信号波形的 特性来对其进行分类。2. 试剂带的反射率:R=R试纸 /R空白 =Tm C s /(T s C m *100%T m 为试纸块对测量波长的反射强度, T s 为试纸块对参比波长的辐射强度。 C s 为空白对测量波长的反射强度, C m 为空白对参比波长的反射强度。 3. 尿 11项分析仪:可以检测包括尿蛋白、尿 pH 、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、 尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素 C 的尿液分 析仪。1. 尿液分析仪是如何进行分类的?答:尿液分析仪按工作方式可分为湿式尿液分析仪和干式 尿液分析仪。其中干 式尿液分析仪主要着眼于自动评定干试纸法的测定结果, 因其结构简单、

50、使 用方便,目前临床普遍应用。尿液按测试项目的数量可分为 8项尿液分析仪、 9项尿液分析仪、 10项尿液 分析仪、 11项尿液分析仪和 12项尿液分析仪。检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿 pH 、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿 潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素 C 和浊度。尿液分析仪按自动化程度可分为半自动尿液分析仪和全自动尿液分析仪。 2. 简述试剂带结构。答:采用了多层膜结构, 第一层尼龙膜起保护作用, 防止大分子物质对反应的污 染;第二层绒制层,包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层可破坏维生素 C 等 干扰物质,试剂层含有试剂成分,主要与尿液中所测定物质发生化学反应, 产生颜色变化;第三

51、层是固定有试剂的吸水层,可使尿液均匀快速地浸入, 并能抑制尿液流到相邻反应区; 最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持 体。3. 尿液分析仪的检测原理是什么?答:把试剂带浸入尿液中后, 出了空白块外, 其余的试剂块都因和尿液发生了化 学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有 关, 颜色越深, 相应某种成分浓度越高, 吸收光量值越大, 反射光量值越小, 反射率也越小。 反之, 反射率越大。 即颜色的深浅与光的反射率成比例关系, 而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系。 所以只要测得光的反 射率即可以求得额尿液中各种成分的浓度。4. 简述尿液分析仪的结构。答:尿液分

52、析仪一般由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。5. 现代尿液分析仪的光学系统有几种?答:有三种。滤光片分光系统:采用光源灯(卤灯发出的白光通过球面积分仪 的通光筒照射到试剂带上,试剂带把光反射到球面积分仪中,透过滤色片, 得到特定波长的单色光,照射到光电二极管、上,实现光电转换。LED 系统:采用了可发射特定波长的发光二极管(LED 作为检测光源,两个 检测头上都有三个不同波长的光电二极管, 对应于试剂带的检测项 目分别为红、橙、绿单色(660nm 、 620nm 、 555nm ,它们相对于 检测面以 60o 照射在反应区上。作为光电转换器件的光电二极管垂 直安装在反应区的上方,在检测光

53、照射的同时接收反射光。CCD 系统:采用了目前比较简短的光学元件 CCD 技术进行光电转换。它们把 反射光分解为红绿蓝(RGB :610nm 、 540nm 、 460nm 三原色, 又将三原色的每一种颜色分为 2592色素,这样整个反射光分为 7776色素,可精确分辨颜色由浅到深的各种微小变化。 CCD 的基 本单元是 MOS (金属氧化物半导体 ,当光照射到 CCD 硅片上时, 在栅极附近的半导体内产生电子空穴对, 其多数载流子被栅极电压排开,少数载流子则被收集在势阱中形成信号电荷。将一定规则 变化的电压加到 CCD 各电极上, 电极上的电子或空穴 (信号电荷 就能沿着半导体表面按一定方向

54、移动,形成电信号。6. 尿沉渣分析仪由几大类型?答:迄今为止尿沉渣分析仪大致有两类, 一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像 分析,得出相应的技术资料和实验结果;另一类是流式细胞术分析。7. 简述流式细胞术尿沉渣分析仪的结构。答:它包括光学检测系统、液压系统、电阻抗检测系统和电子系统。8. 简述流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理。答:测定是应用流式细胞术和电阻抗的原理进行的。 当一个尿液标本被稀释并经 染色、 染色后, 靠液压作用通过鞘液流动池。 反应样品从样品喷嘴出口浸入 鞘液流动室时, 被一种无粒子颗粒的鞘液包围, 使每个细胞以单个纵列的形 式通过流动池的中心 (竖直 轴线, 在这里每个尿液细胞

55、被氩激光光束照射。 每个细胞有不同程度的荧光强度、 前向散射光强度和电阻抗的大小。 仪器将 这种荧光、 散射光等信号转变成电信号, 并对各种信号进行分析, 最后得到 每个尿液标本产生出的直方图和散射图。 通过分析这些图形, 即可区分每个 细胞并得到有关细胞形态。9. 尿沉渣分析仪的安装、使用注意事项是什么?答:(1安装。仪器必须安装在通风好,远离电磁干扰源、热源,防止阳光直接 照射,防潮的稳定水平实验台上(最好是水泥台上 。环境大小应适宜,仪 器两侧至少有 0.5m 空间, 仪器后面最少有 0.2m 空间。 最好安装在有空调装 置的房间内(室内温度为 15o C 30o C ,最适温度为 25

56、o C 相对湿度应为 30% 85% 。(2使用和注意事项。安装新仪器时或每次仪器大维修之后,必须对仪器 技术性能进行调试,这对保证检验质量起着重要的作用。全自动尿沉渣分析 仪的鉴定必须由仪器制造公司的工程师来进行。每天开机前,操作者要对仪 器的状态进行全面检查,确认无误后方可开机。开机时严格按说明书进行操 作,仪器先进行自检,自检通过后,仪器再进行自动冲洗并检查本底。本底 检测和质控通过后,方可进行样品测试。下列情况应禁止上机测试:(1尿液标本血细胞数 >2000/l 时,会影响下一个标本的测定结果;(2尿液标本使用了有颜色的防腐剂或荧光素,可降低分析结果的可 信性;(3尿液标本中有较

57、大颗粒的污染物,可引起仪器阻塞。10. 简述 UD 自动染色鸟车闸分析仪的主要功能和特点。答:(1仪器定量准确,具有极高的重复性; (2系统自动化、智能化程度 高,具备灵活的操作方式; (3克服了不染色方法易误认、漏检的缺点,提 高了典型沉渣成分的检出率; (4符合标准化要求,克服认为因素后,使尿 沉渣分析达到尿沉渣分析的规范化、标准化的要求; (5安全洁净,减少了 对实验室及操作人员的污染; (6智能控制,软件功能强大,可全面好 i 先 人机对话; (7功能齐备,人性化设计,环保节约、易于摆放和观察。 11. 自动尿液分析质控物选择的要求有哪些?答:对质控物的要求必须达到以下几点(1质控物应

58、成分稳定,批内分装均匀, 易于保存和运输,复溶后成分无变化。 (2选择质控物时,最好使用多项复 合控制品。 有条件的实验室最好同时好使用高、 低两个值的质控物。 也有人 利用红细胞、 白细胞醛化固定, 霉菌孢子固定, 作为有形成分的质控物。 (3 在一天内做质控时最好使用同一份质控物,并采用高、低两种质控物对照。 (4根据各实验室的具体亲狂每天或隔日随机做质控检测,使用不同批号 的试剂带钱均需做质控, 并对仪器进行校正。 (5 质控物的测定结果哟与某 些原因超出质控要求的范围表示失控, 则需从检查试剂带、 质控物、 校准仪 器等方面查找原因。第十五章 自动生化分析技术和相关仪器1. 后分光:即光源光线直接透过样品,提供过光栅,再进行吸光度的检测,可连 续检测不同波长的反应。2. 全息反射式光栅:是在玻璃上覆盖一种金属膜后制得的光栅,有一定相差,易 被腐蚀。