小鼠巨噬细胞功能测定ppt课件

1、1.1.实验目的实验目的 了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬景象的原理；了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬景象的原理；熟习和掌握巨噬细胞吞噬实验的方法。熟习和掌握巨噬细胞吞噬实验的方法。小鼠巨噬细胞功能测定小鼠巨噬细胞功能测定 2.2.实验原理实验原理 巨噬细胞具有吞噬、分泌和参与免疫巨噬细胞具有吞噬、分泌和参与免疫应对的各种功能，是机体免疫程度和功能应对的各种功能，是机体免疫程度和功能的重要目的，与抗肿瘤免疫也有重要关系的重要目的，与抗肿瘤免疫也有重要关系。本实验将鸡红细胞注入小鼠腹腔时，会。本实验将鸡红细胞注入小鼠腹腔时，会被腹腔中的巨噬细胞吞噬。取小鼠腹腔液被腹腔中的巨噬细胞吞噬。取小鼠腹腔液涂片、染色，在

2、显微镜下察看可见鸡红细涂片、染色，在显微镜下察看可见鸡红细胞被吞噬的景象。计算吞噬百分率和吞噬胞被吞噬的景象。计算吞噬百分率和吞噬指数，可判别巨噬细胞的吞噬功能，据此指数，可判别巨噬细胞的吞噬功能，据此可判别机体的非特异性免疫程度。可判别机体的非特异性免疫程度。3.3.实验器材实验器材 1 1 器具：注射器、离心管、器具：注射器、离心管、载玻片、平皿、烧杯、橡皮乳头、解剖载玻片、平皿、烧杯、橡皮乳头、解剖剪和镊子、解剖盘。剪和镊子、解剖盘。 2 2 资料：无菌生理盐水、资料：无菌生理盐水、HanksHanks液、液、6%6%淀粉肉汤液、瑞氏染色淀粉肉汤液、瑞氏染色液、液、 1% 1%鸡红细胞悬

3、液、鸡红细胞悬液、 小鼠。小鼠。 4.4.实验方法小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能体内实验方法小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能体内测定法测定法1 1实验前实验前3d3d，给小鼠腹腔内注射无菌，给小鼠腹腔内注射无菌6%6%淀粉淀粉肉汤液肉汤液1ml1ml。 2 2实验当天，给小鼠腹腔注射实验当天，给小鼠腹腔注射1 1的鸡红细的鸡红细胞悬液胞悬液1ml 1ml ，轻，轻 揉腹部使鸡细胞分散，令其活动揉腹部使鸡细胞分散，令其活动2030min2030min。 3 3然后颈椎脱臼处死小鼠，仰卧固定。常规然后颈椎脱臼处死小鼠，仰卧固定。常规消毒腹部皮肤，消毒腹部皮肤， 左手持镊提起腹中部皮肤。右手用左手持镊提起腹中部皮

4、肤。右手用剪子剪长剪子剪长5mm5mm的小口，的小口， 从剪口处朝头、尾部用力，扯开皮从剪口处朝头、尾部用力，扯开皮肤，暴露腹壁。肤，暴露腹壁。 5提起腹前壁，避开血管剪一小口，用毛细吸管吹吸提起腹前壁，避开血管剪一小口，用毛细吸管吹吸混匀腹腔内液体，并搜集于试管内。混匀腹腔内液体，并搜集于试管内。6在干净的载玻片上滴加一滴腹腔液制造涂片在干净的载玻片上滴加一滴腹腔液制造涂片 。待涂。待涂片晾干后，瑞氏染液染色片晾干后，瑞氏染液染色5min。 7结果判别：高倍镜结果判别：高倍镜/油镜下镜检。镜下可见巨噬细胞油镜下镜检。镜下可见巨噬细胞核呈蓝色，被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形，其胞浆呈红色而核核呈蓝色

5、，被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形，其胞浆呈红色而核被染成蓝色。计数巨噬细胞吞噬鸡红细胞情况，计算吞噬百被染成蓝色。计数巨噬细胞吞噬鸡红细胞情况，计算吞噬百分率和吞噬指数。分率和吞噬指数。 吞噬百分率：即吞噬百分率：即100个巨噬细胞中吞噬有鸡红细胞的个巨噬细胞中吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数。巨噬细胞数。 吞噬指数：将吞噬指数：将100个巨噬细胞中所吞噬的鸡红细胞个巨噬细胞中所吞噬的鸡红细胞总数除以总数除以100即得吞噬指数，即平均每个巨噬细胞吞噬的鸡即得吞噬指数，即平均每个巨噬细胞吞噬的鸡红细胞数。红细胞数。 未被吞噬的鸡红细胞未被吞噬的鸡红细胞吞噬了鸡红细胞吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞的巨噬细胞5.5.本卷须知本卷须知 1涂片的薄厚要适当，否那么影响计数。涂片的薄厚要适当，否那么影响计数。2小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。3如小鼠腹腔液过少，可腹腔注入适量如小鼠腹腔液过少，可腹腔注入适量Hanks液揉动液揉动 后再取。后再取。 4剪开小鼠腹腔时应防止出血，否那么将影响实验结果剪开小鼠腹腔时应防止出血，否那