人教版高中生物选修1专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段练教师版

1、选修1专题5课题2多聚酶链式反应扩增DN*段（练）1.下列有关PCR技术中引物的叙述，正确的是（）A.引物是一小段DNA分子或双链RNA分子B.扩增一个DN册子至少需要的引物数目等于新合成的DNA子链数目C.两种引物之间能够发生碱基互补配对D.DNAm合酶只能从引物的5/端连接脱氧核甘酸【答案】B【解析】引物是一小段单链DNA或RNA,可与DNA母链通过碱基互补配对进行结合，A错误；扩增一个DNA分子至少需要的引物数目等于新合成的DNA子链数目，B正确；引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合，两种引物之间不能发生碱基互补配对，C错误；DNA聚合酶只能从引物的3/端连接脱氧核昔酸，D错误。2

2、.小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述正确的是（）A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B.用PCR方法扩增目的基因时需要知道基因的全部序列C. PC林系中G-C碱基对含量将影响使DNAB链的所需温度D. PC林系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶【答案】C【解析】设计扩增目的基因的引物时，要考虑表达载体相关序列，从而保证目的的基因能与表达载体相连接及正常表达，A错误；用PCR方法扩增目的基因的前提是：要有一段已知目的基因的核甘酸序列，以便根据这一序列合成引物，因此不

3、需要知道基因的全部序列，B错误；在每个双链DNM子中，碱基对A与T之间有2个氢键，C与G之间有3个氢键，且DNA分子含有的氢键数越多，其热稳定性就越高，因此PCR体系中G-C碱基对含量将影响使DNAS链的所需温度，C正确；PCR体系中一定要添加耐高温的热稳定DNA聚合酶，而从受体细胞内提取的DNA聚合酶不耐高温，D错误。3 .有关PCR术的说法，不正确的是（）A. PC双一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术B. PC叱术的原理是DNAa链复制C.利用PCR术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核甘酸序列D.PCRT增中必须有解旋酶才能解开双链DNA【答案】D【解析】A、PCR

4、ir称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，A正确；B、PCR术以解开的双链作为模版，利用的原理是DNA复制，B正确；C前提是要有一段已知目的基因的核甘酸序列以便合成引物，C正确；H双链DNA莫版在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA可见该过程不需要解旋酶解开双链DNAD错误.4 .有关PC破术的说法，不正确的是（）A. PC双一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术B. PC叱术的原理是DNAa链复制C.利用PCR术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核甘酸序列D.PCRT增中必须有解旋酶才能解开双链DNA【答案】D【解析】A、PCRir称为聚合酶

5、链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，A正确；B、PCR技术以解开的双链作为模版，利用的原理是DNAM制，B正确；C、前提是要有一段已知目的基因的核甘酸序列以便合成引物，C正确；D、双链DNA莫版在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA可见该过程不需要解旋酶解开双链DNAD错误.5 .引物的作用是（）A.打开D.NA.双链B.催化合成D.NA.子链C.提供模板D.使D.NA.聚合酶能够从引物的3端开始复制【答案】D【解析】PCR术的原理是D.NA.复制，而D.NA.的复制需要引物，其主要原因是D.NA.聚合酶只能从3端延伸D.NA.链。因此，引物的作用是使D.NA.聚合酶能

6、够从引物的3端开始复制。6 .复性温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度冷却至40C60C,可使引物和模板发生结合。PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA莫板链的重新结合，原因不包括（）A.由于模板DNA比引物复杂得多B.引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞C.模板链加热解旋已经变性不可能再次结合D.加入引物的量足够多而模板链数量少【答案】CDN册子变成单链，碱基序列未发生改变，冷却后仍可以进【解析】复性的原理是碱基互补配对，解旋后行复性，C项错误。7 .PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不同，它们是（PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或

7、RNAPCR过程不需要DN咪合酶PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的PCR过程中，DNA需要解旋，直接以双链DNW模板进行复制A.B.C.D.【答案】C【解析】PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA正确；PCR程需要而t高温的DNAM合酶，错误；PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的，正确；PCR过程中，DNA不依靠解旋酶解旋，而是利用高温解旋，然后以单链DNW模板进行复制，错误。故C正确。8 .PCR技术中下列说法错误的有几项（）复性的目的是使原来分开的DNA的两条单链重新连接成双链PCR技术是扩增完整的DN6子DNA聚合

8、酶不能从头开始合成DNA只能从5端延伸DNA链DNA引物在细胞外可在DN咪合酶的作用下合成A.有一项B.有二项C.有三项D.有四项【答案】D【解析】PCR全称为聚合酶链式反应，PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，原理是DNA复制，前提条件是要有一段已知目的基因的核甘酸序以便合成一对引物，条件还包括模板DNA四种脱氧核甘酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），具体过程有高温变性：DNAB旋过程；低温复性：引物结合到互补链DNA;中温延伸：合成子链.PCRT增中双链DNAB开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。故D正确。9 .下列关于PCR的描述中，正确的是（）PC幅

9、一种酶促反应引物决定了扩增的特异性扩增DNARJ用了热变性的原理扩增的对象是氨基酸序列A.B.C.D.【答案】D【解析】PCR术的I念是PCRir称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA勺核酸合成技术，原理是DNAM制，前提条件是要有一段已知目的基因的核甘酸序列以便合成一对引物，条件还包括模板DNA四种脱氧核甘酸、一对引物、热稳定DN咪合酶（Taq酶），具体过程有高温变性：DNAB旋过程；低温复性：引物结合到互补链DNAk;中温延伸：合成子链.PCRT增中双链DNAB开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。10 .用PCRT法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱。

10、其中1号为DNA标准样液（Marker）,10号为蒸储水，PCR时加入白模板DNA如图所示。据此做出的分析，错误的是（）A. PCR物的分子大小在250-500bp之间B. 3号样品为不含目白基因的载体DNAC. 9号样品对应植株不是所需的转基因植株D. 10号确定反应体系等对结果没有干扰【答案】B【解析】PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段，49号是转基因植株，理论上应包含目的基因，结合2号野生型和10号蒸储水组的结果，推测包含目的基因的片段大小应为250500bp,A正确；3号PCR结果包含250500bp片段，应包含目的基因，B错误；9号PCR结果不包含250500

11、bp片段，所以不是所需转基因植株，C正确；10号放入蒸储水，可排除反应体系等对结果的干扰，D正确。11.金属硫蛋白（MT是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCFT增过程示意图如下，请回答下列问题：&根DMA弓胸1%物2（1）从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA通过获得用于PCRT增。（2）图中步骤1代表,步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。（3） PCFT增时，退火温度的设定是成败白关键。退火温度过高会破的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但的引物需

12、要设定更高的退火温度。（4）如果PC即应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有（填序号：升高退火温度降低退火温度重新设计引物）。【答案】（1）逆转录cDNA（2）变性（3）引物与模板GC含量高（4）【解析】（1）PCR扩增目的基因，首先要有目的基因作为模板，所以从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过逆转录获得cDNA,从而用于PCR扩增。（2）构建重组质粒，首先用限制酶切割含目的基因的DNA片段和质粒，所以位于目的基因两端的引物中需要增加适量的限制酶位点。设计的引物之间不能有碱基互补配对，否则引物自连，不能与模板相连。（3）图中步骤1、2、3分别表示变性、退火、延伸，这三个步骤组成

13、一轮循环。（4）退火表示引物与模板链相连，若温度过高会破坏引物与模板的碱基配对。由于G-C间三个氢键，A-T间两个键，所以G-C含量越高的引物，退火温度越高。（5）PCR反应得不到任何扩增产物，可能是退火温度过高，导致引物与模板不能相连，或引物间相互配对，引物自连，不能与模板相连，可通过降低退火温度或重新设计引物进行改进。12.近十年来，PCR术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。DNA祥品单链DNA寡聚核昔酸引物

14、游离核普酸连接两个完整的双模板与DNA单链形到DNA单链上链DNA分子成配对结构（1）PCR技术能把某一DNA段进行扩增，依据的原理是：。（2）加热使DNA双链打开，这一步是打开键，称为,在细胞中是在的作用下使此键断裂。当温度降低时，引物与模板端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DN酚子，此过程中加入四种脱氧核甘三磷酸的目的是,遵循的原则(4)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATR酶以外，至少还需要三个条件.即：液体环境、适宜的和。(5)PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为、三个步骤。【答案】(1)DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对(2)氢解旋解旋酶(3)3既是原料，又能提供能量碱基互补配对原则(4)温度酸碱度(5)变性、退火和延伸【解析】(1)PC叱术又称聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DN6子的核酸合成技术。PCFa术能把某一DNA片段进行扩增，依据的原理是：DNA分子具有双螺旋结构和DNA分子中碱基的互补配对。(2)加热使D