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1、1实验三:蒽酮比色定糖法2一、实验目的一、实验目的学习分光光度法的基本原理学习分光光度法的基本原理学习对蔬菜和食品中糖含量进行测定的方法学习对蔬菜和食品中糖含量进行测定的方法3二、实验原理二、实验原理: 溶液中的物质在光的照射激发下,产生对光的吸收效应,不同的物质具有各自选择性的吸收光谱,因此,当某单色光通过溶液时,能量会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质浓度有一定比例关系,即符合于比色原理比尔定律4 A:为吸光度, T:为透射比,是投射光强度比上入射光强度 c:为吸光物质的浓度 b:为吸收层厚度 :是当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的西光物质时,起其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层

2、厚度b成正比. 5二、实验原理二、实验原理蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。蒽酮可以和游离的己糖或多糖中的己糖基,戊醛糖及己糖醛酸反应,反应后溶液呈蓝绿色,在620nm处有最大吸收。 蒽酮可与其他一些糖类发生反应,但显现的颜色不同。当样品中存有含较多色氨酸的蛋白质时,反应不稳定,呈现红色。对于特定的糖类,反应较稳定。 本法多用于测定糖原含量,亦可用于测定葡萄糖含量。 6三,实验试剂三,实验试剂:取0.2g蒽酮溶于100mL 80%(V/V)硫酸中,当日配制使用; : (可滴加几滴甲苯作防腐剂); (1) 。 7四四 、实验操作步骤、实验操作步骤1. : 取干试管6支,依次加入 ,,,,并依次用蒸馏水补足体积到,各管均加入蒽酮试剂,震摇混匀。沸水浴准确煮沸10 min,室温放置10min,用1号试管溶液调零,比色测定A620(同时测定样品)。 82. :无蛋白糖溶液样品溶液,吸取置试管中,再加入蒽酮 试剂,沸水浴中煮沸10分钟,取出后冷却10min后比色,其他条件与

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