版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领
文档简介
1、第四章第四章 靶基因的获得靶基因的获得直接分离直接分离DNADNA基因组文库或基因组文库或cDNAcDNA文库筛选文库筛选PCRPCR或或RT-PCRRT-PCR扩增目的基因扩增目的基因人工合成较短的人工合成较短的DNADNA片段片段适用于简单的原核生物的基因的获取适用于简单的原核生物的基因的获取直接分离直接分离DNADNADNADNA文库文库cDNAcDNA文库文库构建基因文库筛选目的基因构建基因文库筛选目的基因基因文库基因文库化学合成法化学合成法合成基因合成基因 适用条件：适用条件：分子量较小的目的基因；分子量较小的目的基因；采用传统钓取法较困难的基因（如丰采用传统钓取法较困难的基因（如丰
2、度较低的基因）；度较低的基因）；自然界不存在的基因；自然界不存在的基因；密码子需优化的基因等密码子需优化的基因等合成方向：合成方向：3 5 3 5 合成效率：合成效率：97-98%/97-98%/步步引物纯化：引物纯化：PAGEPAGE全基因合成：合成，退火，连接全基因合成：合成，退火，连接补充一些常识：补充一些常识：应用应用PCRPCR获取目的基因获取目的基因 Thp1细胞细胞 mRNAcDNAPCRMMLVMMLV反转录酶反转录酶TaqDNATaqDNA聚合酶聚合酶例例:ADAM10:ADAM10gccAAGCTTcagcggaaga tggtgttgct ttaCTCGAGcggcgtc
3、tcatgtgtcccatttg HindIIIXhoIPCRPCR产物产物载体载体HinHindIIIdIII和和XhoXhoI I双酶切消化双酶切消化 Dear Dr. Kreutz, I am studying the mechanism of soluble MHC class I release mediated by the metalloproteinase pathway in Dr.Yuri Bushkins lab. ADAM19 is one of our candidate metalloproteinases. From your paper, I noticed t
4、hat you have human ADAM19 cDNA cloned into pcDNA 3.1/V5 vector. So, would it be possible to obtain from you this plasmid? Thank you very much. Yours sincerely, Dr.Jinrong Zhao Room W350T.1 UMDNJ-PHRI 225 WarrenStreet Newark，NJ 07103 USA索要靶基因索要靶基因教学要求教学要求掌握：如何用掌握：如何用PCRPCR法获取目的基因法获取目的基因熟悉：人工合成熟悉：人工合成DNADNA片段方法片段方法了
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
评论
0/150
提交评论