美洲大蠊生物学观察及其提取物抗胃溃疡作用研究

1、湖南中医药大学硕士学位论文美洲大蠊生物学观察及其提取物抗胃溃疡作用研究姓名：罗臣申请学位级别：硕士专业：中西结合基础指导教师：肖小芹20060601摘要为了给药用昆虫美洲大蠊的大量繁殖提供重要的科学依据和详细的实验观察资料，同时也为进一步观察美洲大蠊提取物对不同种类胃溃疡的保护作用。本研究全面系统的观察了美洲大蠊在人工饲养条件下的室内繁殖、发育及其生物学特性和行为学特点，并对其提取物进行了相应的药效学动物实验。首先，在实验室自然温度下，我们观察了美洲大蠊的生殖产卵、孵化、若虫生长、蜕皮、羽化等发育的全过程，以及各发育阶段的食性行为特点，对每鞘含卵数、卵孵率、鞘孵率等生物学特征参数进行分析和统计

2、。其次，以美洲大蠊提取物作为试药，观察不同药物剂量对冷水致小鼠应激型胃溃疡、小鼠醋酸烧灼型胃溃疡，及小鼠无水乙醇致胃粘膜损伤型胃溃疡的保护作用。通过生物学观察，我们发现美洲大蠊的产卵习性和食性受温度的影响较大。动物试验结果也证实了美洲大蠊提取物对小鼠应激胃溃疡型，及小鼠无水乙醇胃粘膜损伤型有较好的治疗效果，对小鼠醋酸烧灼胃溃疡型则效果不太明显。通过以上一系列观察与实验，我们认为美洲大蠊在饲养时应注意控制好温度，并认为其人工提取物对于胃溃疡治疗的确具有进一步研究开发的潜在价值。关键词：美洲大蠊；生殖；生物学；发育；胃溃疡，），。，。，：；：；前言蜚蠊（），俗称蟑螂（或），隶属于节肢动物门（）昆虫

3、纲（）有翅亚纲（）蜚蠊目（）。它是一种古老的昆虫，有三亿五千万年历史。千万年前至今，地球大自然曾发生过无数次变迁，连恐龙也已在自然界灭绝，而蜚蠊不但没有被大自然淘汰，相反其子孙在地球上兴旺发达，遍布世界各地，据世界已记录的蜚蠊目昆虫约种；年统计，全年统计约种。近年来，又有许多新属种被发现，所以目前全球蜚蠊被记录的总数估计已达到种，可见蜚蠊对外界环境条件的变化有着其它生物难以匹敌的适应能力。现今我国已记录蜚蠊种，绝大多数种类栖于室外，营野栖生活，与人类关系不大；室内的常见蜚蠊共有种，包括东方蠊（）、美洲大蠊（）、澳洲大蠊（凡，助曲、凹缘大蠊（乃，印）为世界共通种类是世界害虫。“在我国对人类危害最

4、大的主要有三种：德国小蠊（剧）、美洲大蠊（乃，）、黑胸大蠊（乃，括此外，褐斑大蠊（乃，）、澳洲大蠊（，印）、日本大蠊（丹，）、淡赤褐大蠊（乃，）、东方蜚蠊（）以及斑蠊属的斑蠊（）等与人类关系也较为密切。蜚蠊是重要的疾病传播媒介，不但能携带痢疾杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等多种致病菌；和曲霉菌、青丝霉菌、毛霉等多种霉菌；还能携带蛔虫、钩虫、鞭虫、绦虫等蠕虫卵；阿米巴、贾第虫等原虫包囊以及腺病毒、病毒、脊髓灰质炎病毒等多种病原体。蜚蠊在肠道传染病、寄生虫病等的传播上起到如此重要的作用，严重危害了人类的健康，以至于从年开始，它就被列为医学昆虫，成为重点防治对象。”此外，蜚蠊还是室内主

5、要的变应原，其代谢分泌物、排泄物、皮蜕、尸体等均能诱导人体产生过敏性鼻炎、过敏性哮喘、皮炎等介导的变态反应性疾病。首先于年首次报道蜚蠊是一种重要的变应原，他们通过皮试和支气管激发试验发现，纽约有的哮喘患者对蜚蠊变应原过敏。接着等用蜚蠊虫体粗浸液对支气管哮喘患者进行试验，发现有的哮喘患者对德国小蠊变应原皮试或支气管激发试验呈阳性，肺功能显著下降，并表现出临床症状和哮喘反应，同时伴有血清特异性抗体阳性。如此多的研究表明蜚蠊变应原作为室内主要的吸入性变应原之一，是诱发过敏性哮喘等疾病的重要诱因，尤其对城市儿童、贫困和卫生条件较差地区人群以及蜚蠊防制不力地区人群的健康造成很大威胁，因而世界卫生组织将蜚

6、蠊划归为环境中重要的变应原。正是由于以上诸多因素，使得蜚蠊长期以来被作为害虫加以防制。有关于蜚蠊防治方法、防治药物以及药物与抗药性之间关系等方面的研究常见于报道。然而，蜚蠊作为重要的医学昆虫，不仅有危害人类的一面，也有造福人类的一面。现已在许多昆虫体内发现了广谱高效抗细菌肽、抗真菌肽，并已将其中的某些抗菌肽通过基因工程技术表达并检出有抗菌活性。对于有着亿万年生存历史的蜚蠊而言，其生存环境差，能携带并与许多种的病原体并存而不罹病，其独特的免疫系统很值得研究，并取得了一定进展，已被逐步用于癌症临床治疗。另外，蜚蠊虫体浸液被用于对外源性哮喘患者进行免疫治疗能减轻临床症状。目前已有多种蜚蠊虫体变应原已

7、被确认并得到分离纯化，在临床上应用于变态反应性疾病的诊断和脱敏治疗。重组变应原的构建、表述、分离纯化及生化、免疫特性分析等方面的研究也取得了重要的进展。蟑螂作为药用，最早记载于神农本草经，以蜚蠊名列为中晶，谓“味成、寒，生川泽，治血瘀症坚、寒热，破积聚，喉咽痹，内寒无子”。后来历代医书也均有类似记载。有资料表明以美洲大蠊为主的提取物具有促进组织生长愈合及抗氧化、护肝养胃、促进胃肠溃疡愈合、抗炎、治疗外伤创面等方面的作用，以及对肿瘤、虚症、结核病及心血管疾病等有辅助治疗作用。蜚蠊正逐渐成为药用昆虫应用的研究热点。本文以美洲大蠊为主要研究对象，围绕它的医学和药用价值开展了系列研究。第一章美洲大蠊生

8、物学特性研究本章以分布最广、最为常见的蜚蠊优势种之一的美洲大蠊（）为材料，通过实验室人工饲养，观察记录其生物学特性和行为特点，为大规模人工饲养、综合利用其医药资源补充和积累实验资料。美洲大蠊属节肢动物门（）昆虫纲（）有翅亚纲（）蜚蠊目（）蜚蠊科（）大蠊属（凫，印），为我国室内蜚蠊优势种之一，同时，也是室内重要害虫之一，除和其他室内生活的蜚蠊一样损坏衣物，偷吃及污染食品外，其体内外能携带多种病原体，如痢疾杆菌、沙门氏副伤寒甲、乙杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌及蛔虫、钩虫、蛲虫、兰氏贾弟鞭毛虫等。据报道在美洲大蠊的肠道常能保存着活性霍乱弧状细菌、结核病杆菌、麻疯杆菌等。另外，美洲大蠊是人类哮喘、皮肤过敏

9、等变态反应性疾病的重要诱因之一，赖乃揆等于对包括美洲大蠊在内的几种主要室内蜚蠊分别进行了抗原性及免疫活性的研究，结果显示：美洲大蠊在皮试、特异性、嗜硷陆粒细胞脱颗粒试验中呈强阳性反应，并发现美洲大蠊若虫其免疫原性及反应原性均较雄性、雌性成虫为强。因此，该种蜚蠊与人的健康有很密切的关系。据调查其在海拔高度仍能很好地生存，说明该种蜚蠊对外界环境条件的变化有极强的适应能力，再加上其较强的繁殖能力，可通过各种交通工具等被带到世界各地，因此该种在世界各地分布极广，成为世界性的害虫，在我国包括浙江、江苏、上海、武汉、江西、北京、辽宁、黑龙江、陕西、河北、台湾、福建、广东、广西、四川、云南、贵州、海南等地均

10、有分布。”材料与方法材料年月从云南大理购得美洲大蠊卵荚一批，在室内孵化后，实验室自然温度条件下常规饲养繁殖。供试美洲大蠊为室内繁殖的第代和第代成虫。方法孵化将购回的卵荚置孵化瓶中，让其在室内自然条件下孵化。孵化瓶用塑料输液瓶制作，剪去瓶颈处狭小部分，剩余容积约，消毒液消毒，清水洗净晾干，瓶口以纱布覆盖，橡皮筋扎紧，以防孵出的若虫逃逸。孵出若虫移至饲养缸中饲养。饲养根据研究需要，将饲养方式分为两种：观察饲养，即单缸饲养，将同一卵荚孵出的若虫移入单独的饲养缸中，编号饲养；繁殖饲养，即混合饲养，将孵出的同龄若虫混合于大饲养缸中饲养繁殖。饲养缸采用玻璃缸，长、宽、高，顶部用纱窗作盖，保持通风。饲养缸中

11、放置小木块数块，用硬纸板做成像养蜂用的隔板，垂直放在箱子内，增加蜚蠊的栖息面积，箱底放食物和水。养殖密度为每平米头左右。相对湿度维持在。每投放饲料和饮水，及时清理剩余食物，保持饲养缸卫生，定期观察记录。待养出成虫开始产卵后，将卵荚取出，分别放入青霉素瓶中，用纱布封口，每瓶个，每天观察记录卵荚变化及孵化情况。孵化出的第二代虫体继续进行上述饲养。“饲料及饮水饲料为兔饲料（植物纤维、米糠和小麦粉混合物）、饼干渣和剩余饭菜。喂食时置于小食盒中。饮水为蒸馏水，置培养皿中，内浸脱脂棉，以防若虫饮水时溺毙。食物和饮水每次投放量以够食为准。记录投放食物的种类和数量。虫种鉴另确认依据形态分类学方法，从卵荚、若虫

12、到成虫，层层筛选把关，重点以成虫的形态特征为依据，只有完全符合美洲大蠊分类鉴别特征者才用作试虫，以防他种蜚蠊混入。结果美洲大蠊成虫形态描述雄虫体长，前胸背板（长宽）×，前翅长衄，总长衄。雌虫体长衄，前胸背板（长×宽），前翅长一砌，总长。（如图卜所示）属中大型昆虫。背腹扁平，呈长椭圆形，红褐色或褐色，体色因虫龄而有所变化。体表有油状光泽。雌雄虫体形相似，但雌虫体稍宽于雄虫。整个虫体分头、胸、腹三个部分。头部小，隐于前胸背板下方，从虫体背面观只能看到头硕端的一小部分，其颈部可以自由地向前后左右活动，所以其口器不是固定的下口式，而能向前伸展。头部有单眼、复眼及触角各一对。复眼较大

13、，位于头上部两侧，占据了头的较大部分，单眼位于触角的内上方，白色点状，其皮下集聚着感觉细胞。头顶及两复眼间为黑褐色，复眼间距雄虫狭雌虫宽；下颚须淡褐色，端部两节褐色。触角发达，呈鞭状，由多节组成，其长度超过尾端，是重要的感觉器官。口器是典型而发达的咀嚼式口器，由上唇、大颚、舌、小颚、下唇构成。胸部由前胸、中胸和后胸三部分构成，而各部分又均由背板、腹板和侧板构成。前胸背板近梯形，前缘几乎平直，后缘缓弧形，边缘黄色，中央红褐色，近前缘处有“”形淡黄色斑，中部有赤褐色蝶形斑。中胸和后胸背板形状几乎相同。在中胸和后胸的前方各有一对气门开！。胸部腹面骨化程度差，膜质部分宽。有步足三对，分别长在前胸、中胸

14、、后胸的腹面，均发达，与其善于爬行有关。第一步足股节较长而粗大，腹面长有刺。有翅两对，均发达，前翅超过腹部末端，雄虫翅稍长于雌虫。双翅平时重叠于腹部背面。前翅革质，比后翅窄但稍长，深褐色。后翅膜质，半透明，浅褐色。前缘脉基部分又，肘脉有不完全短脉和横脉。腹部赤褐色，宽而扁平，但雄虫较雌虫稍窄而圆。腹部由十节组成，背板十个，雌雄虫的第十背板均特化为肛上板，雄虫第九背板和雌虫第八、九背板板均狭小不明显。第十腹节特化为外生殖器。雄虫第九腹板特化为下生殖板，其端部两侧长有尾刺一对。雌虫下生殖板无尾刺。在肛上板基部两侧长有尾须一对。尾须是重要的感觉器官，由多节构成，上面长有许多感觉毛，这些毛难感受空气的

15、流动、振动。在肛上板的内面有肛门开口，在腹部节侧面背板和腹板之间均有气孔。雄性外生殖器位于腹部末端，在肛上板和下生殖板之间，受肛上板和下生殖板保护，平时不露出体外，因此从体外看不到外生殖器。掀开肛上板或把肛上板除掉，可看到雄性外生殖器全部。美洲大蠊雄性外生殖器非常复杂，阳体骨化程度高，左右不对称，由左阳体、右阳体和腹阳体三部分构成，而左阳体和右阳体又有数量不等、形状各异的分支，其形态非常独特。左阳体位于阳体的左侧，有个分枝，第分枝最长位于左侧，向内呈小钩状，在钩的根部处向内长有一小细刺。第分枝呈倒置的蘑菇状。第分枝呈“月牙”形。第分枝呈狼牙棒状。右阳体位于阳体的右侧，有个分枝。第分枝端部分叉，

16、呈“”字型，尤其外侧有锯齿状突起。第分枝端部尖细似镰刀状。腹阳体位于阳体的腹面，宽而大，其基部稍窄，向端部渐变宽大，端部圆形，片状较薄，并向上弯，经阳体右方弯向背部。雌性外生殖器位于第七腹节的腹板处，有三对产卵管其中一对在第八腹节，另外两对在第九腹节。生殖孔开口于其前下方的腔内，此腔为生殖腔，后面宽大部分为卵荚室，生殖腔的上面上贮精囊的开口。卵在生殖腔内受精后，受精卵由产卵管集中排入卵荚室，再由附属腺分泌出特殊物质，将受精卵包起来形成卵荚。图美洲大蠊成虫形态美洲大蠊的生活史美洲大蠊的个体发育分为两个阶段：第一阶段为胚胎发育，是在卵内完成的，卵的发育期约为天；第二阶段为胚后发育，从孵化为幼虫到成

17、虫性成熟为止，历时半年左右，经十次左右蜕皮。从幼虫变为成虫要经历外部形态、内部构造以及生活习性上的一系列变化。美洲大蠊属渐变态类昆虫，若虫与成虫的形态和生活习性都差不多，只是若虫的翅发育不完全，生殖器官尚未成熟，每经历一次脱皮后其翅和生殖器官逐渐发育生长。美洲大蠊属渐变态昆虫，其生活史分为卵、若虫、成虫三个阶段。若虫发育为成虫后不久即可交配，从交尾到卵荚产出约需一小时。成虫的寿命为年。”卵荚卵受精后，外包分泌物，形成卵荚产出，卵荚是逐步排出的，刚露出的卵荚呈黄白色，然后逐步变深，至产出时呈棕红色，硬而具有弹性，几天之后变为深咖啡色。卵荚刚产下时表面不具粘性，雌虫用口器在卵荚表面舔上粘液，就易被

18、粘着在周围物体上，从而起到保护卵荚的作用。人工饲养美洲大蠊收集卵荚时，宜在粘液干透前，此时卵荚没有粘牢，收获时不易损坏。卵荚长圆柱形，略扁，呈豆荚状，由左右两片合成，一侧有锯齿缘，为幼虫孵化时的出口处，幼虫的头端对着出口处。卵荚长约，宽，内合枚卵，其长度与含卵数成正比例（如图所示）。一般来说，卵荚越长，含卵数越多。卵就在卵荚里发育，卵的发育期约为天，卯荚的发育需一定的温度和湿度，一般是气温高而卵期短。若虫形成后，卵荚老化变脆，若虫从锯齿缘处爬出，出荚前蜕一次皮，将皮留在锯齿缘出口处。据此可判断幼虫出荚与否。图美洲大蠊卵荚孵化通常情况下，只有含有受精卵的卵荚在适宜的温度、湿度等条件下才能卵出若虫

19、。由于外界气候条件的影响，不同时期产出的卵荚其卵期长短有明显差别。就长沙的自然条件，据观察，每年月底以前产出的卵荚，在当年即可孵出若虫；月份产出的卵荚只能部分孵出若虫，部分要到第二年才能孵出；月分以后产出的卵荚一般当年不孵出。表美洲大蠊不同月份所产卵荚的卵期从表可以看出，月份所产卵荚，胚胎发育时间正值春末夏初，气温适宜，有利于胚胎快速发育，所以卵期较短；月所产的卵荚，胚胎发育时值夏、秋季，气温较高，也比较适合胚胎发育，可能由于天气较干燥，卵期较前者略长；月份所产卵荚，只有部分能在当年孵化，如果是中下旬所产，或当年冬季来临早，这些卵荚要到第二年才能孵化，所以卵期范围长；月份所产卵荚，一般当年不再

20、孵化，要到第二年气温回升后才能孵化，所以平均卵期最长。表美洲大蠊卵荚孵化率统计表表美洲大蠊卵孵化率统计表，卜和表可以看出，、月份所产虫卵孵化率最高，而、月份卵荚孵化率最高，、月份所产虫卵和卵荚孵化率最低，这可能与气候变化及雌虫的虫龄有关。若虫刚刚孵出的若虫呈乳白色，体细长柔软，长约，孵出约分钟左右，虫体变为灰白色，再经小时后变为黑褐色，虫体变得粗短扁平，长约。若虫的形态特征与成虫很相似，但有几点不同：若虫虫体一般小于成虫（除高龄若虫外）；成虫有发达的翅而若虫无翅；若虫的生殖器尚未发育成熟：若虫的外骨骼稍软，体表斑纹和体色较浅。（如图一所示）图美洲大蠊若虫羽化为成虫体色变化蜕皮和羽化若虫自卵荚孵

21、出后，迅速生长，体积增大，经过一定时间其外骨骼限制了虫体继续生长发育，此时必须蜕去外骨骼重新形成新的外骨骼。接近蜕皮时，若虫寻找合适地点，离群独处，但不远离其他伙伴。若虫不进食，且动作及反应明显迟缓，身体慢慢鼓胀，在其头盖呈倒“丫”字型处裂开一条线，然后慢慢地将皮蜕下。每脱皮一次虫体长大一次，生长和蜕皮呈周期性交替进行。两次蜕皮之间的龄期长短与季节（温度）的密切关系。若虫经十次蜕皮，历时半年到一年左右发育为成虫。”若虫经最后一次蜕皮后，即可清晰的看到折叠着的前后翅。蜕皮完成几分钟后，虫体体力得以恢复，即开始展翅。展翅时，虫体头部朝上，身体攀附在纸板、木架或饲养缸缸壁上，与地面保持垂直，虫体前后

22、伸缩、左右摇摆，前翅逐渐伸展，翅脉清晰可见。在前翅伸展的同时，皱缩的后翅也慢慢展开，双翅向后逐渐伸展到虫体尾部，最后虫体作大幅度抖动，整理肢体及双翅。至此，整个展翅过程完成，耗时约分钟。虫体休息数分钟后即可活动自如。生殖舜口产卵美洲大蠊雌雄异体，卵生。雌雄交配后十天左右产卵，其繁殖力强，雌虫一生可产卵荚个，平均产卵个。美洲大蠊繁殖期很长，长沙地区人工饲养的美洲大蠊一年中有个月可以产卵，野生个体，除严冬外其余时间都可采到怀有卵荚的雌虫。繁殖最旺盛的季节为夏季，、月份产卵最多（如图卜所示）。食物充足，气候温暖潮湿时每周可产卵荚个。当夏季高温且食物充足时，美洲大蠊会发生孤雌生殖，即雌虫不经交配也能产

23、出卵荚，其中部分卵荚还可孵出若虫，但不能传代。当食物缺乏时，美洲大蠊有相互残杀和吃食卵荚的习惯。美洲大蠊的产卵性不受昼夜节律影响，但受温度影响较大，而且当室温降到时，几乎不产卵，蛰伏不活动，出现麻木状态，如低温持续时间较长，则出现冻死现象。图月产卵量统计美洲大蠊的行为观察求偶与交配若虫发育为成虫后不久即可交配。求偶交配多在夜间点后至凌晨点前进行。求偶时，雄性表现不安，四处活动，常边爬边飞。遇上雌性，张开翅，有时在雌性周围转几圈，然后倒爬，朝雌性腹部对接，动作迅速，交接上后，原地不动，交尾达小时之久。交尾时，多数是雌翅后端搭在雄翅后端上方，少数是雄翅后端搭在雌翅后端上方，雄性触角向上下左右不停地

24、探动，雌性不作探动。受惊动时，大多是雄性拖着雌性逃逸。交尾结束后，雌雄虫分开，各奔东西。避光性和聚集性美洲大蠊喜好黑暗、隐蔽的环境，白天多隐匿在避光的缝隙、墙角等阴暗场所，夜间出来活动，在美洲大蠊生活的场所，夜晚突然开灯，就可看到它们四处逃逸。所以我们在饲养美洲大蠊时，在饲养缸中放置一些折叠纸板、纸筒供其栖息。美洲大蠊喜好聚集，尤其是低龄若虫常常群聚在一起，这可能与分泌的信息素有关。栖息时往往栖息在生活空间的最下层。我们观察到，在饲养缸中越是底层虫子密度越大。“”“食性与食量美洲大蠊是杂食性昆虫，食普板广，对食物选择性不严格，但是有它们相对喜好的食物。我们曾分别用馒头、面包、饼干、油饼、绿豆等

25、食物投喂，前两者日耗量比其他各种都大，说明美洲大蠊较偏好发酵类淀粉性食物。投喂的水果中，西瓜的耗量明显高于苹果、梨子、葡萄等。美洲大蠊的食量大小与其生理活动的活跃情况成正比，一年中、月份的食量最大（如图所示），这也是它们繁殖最为旺盛的季节。美洲大蠊均有耐饥饿不耐干渴的习性，饲养中我们发现，连续天不给食物，它们仍能生存并四处活动，若连续天不给水，只喂干粮，它们多数死亡，或处于蛰伏状态。我们在实验观察中还发现美洲大蠊有一种非常重要的行为习性，即互相残杀。即使在食物、饮水供应充足的条件下，仍频有互噬的现象出现，包括食卵、噬皮蜕、噬幼龄若虫和蜕皮若虫等情况。食卵现象比较多见，饲养缸中常见被食卵荚的残余

26、部分，尾部夹持卵荚的雌虫被其他成虫追咬的情形也时有发生。但未发现若虫之间或成虫之间互食现象，所以它们仍能群聚在一起。图月份食量变化分析与讨论：无论是对美洲大蠊的开发利用，还是对它们进行综合防治，首先必须弃清楚它们的生物学特性。本研究通过室内自然条件，饲养美洲大蠊，全面系统地观察记录其生物习性和行为特征，在前人工作的基础上，补充、完善归纳和系统整理了相关资料，为对其进行人工大规模饲养及综合防治提供了可靠的实验依据。尤其是对人工饲养具有指导意义。我们在饲养过程中没有对温度加以控制，目的是为了了解其自然条件下的有关资料，真实掌握其自然状态下的生物学特性和行为习性，特别是季节消长规律，这些资料可为综合

27、防治服务，也为人工饲养提供最佳依据。影响美洲大蠊生存条件的因素有四个：温暖、潮湿、食物丰富和多缝隙的阴暗环境。人工饲养的最佳温度、湿度应在长沙地区夏秋季平均温度、湿度附近寻找，以便提供其最有利生长繁殖的条件。如果在自然温度下饲养，则有必要在温度过低时对若虫、虫卵采取保护措施，以提高存活率；投放的食物以它们喜爱的食物为佳，并考虑价廉、多品种和营养搭配；生活场所要多摆放些小木板、折叠纸板等以提供栖息处，木板、纸板等提供的缝隙以容纳一个虫体为宜，这样既提供了栖息地，又给它们相互残杀造成不便；保障饮水，保持饲养室清洁，防止蜘蛛、螨类等天敌进入，这也是养好美洲大蠊要注意的重要环节。在饲养中我们发现，单缸

28、饲养的各若虫之间发育历期基本接近，虫龄基本同步，混合饲养的各若虫之间发育历期差别较大。同时，单缸饲养较混合饲养发育的历期长，生长速度慢，这可能与它们喜欢聚集有关。所以人工饲养时宜采用相近龄期若虫混合饲养，这一方面能节约养殖设备，减少成本，便于大规模养殖，另一方面又能批量收获同龄期成虫。由于美洲大蠊有自相残杀习性，饲养时室内虫：密度不宜太大，同龄若虫可同缸饲养，不同龄若虫应分开饲养。到了产卵期应及时收获卵荚，移入孵化缸中，以防卵荚被成虫吃掉。第二章美洲大蠊提取物抗胃溃疡作用的研究蜚蠊（）是一种古老的昆虫（蟑螂），在地球上已生存了亿年，千百年来一直被人类视为害虫而消灭之，然而面对人类最原始或最现代

29、化的杀灭手段仍能顽强生存至今，可见其体内具有最优秀的生物活性物质和特殊的生理机制，以及超强的生命信息维护系统，从而才能使它成为世界上最古老，繁衍至今最成功的昆虫类群之一。（中国药学大辞典、（中药大辞典、中国药用动物志、全国中草药汇编等近、现代药学专著均记载蜚蠊有“活血、散瘀、化积、消疳、解毒、利尿、消肿”等功能，并用于治疗疔疮、喉蛾、痈肿、蛇虫咬伤等。姚廉等学者经考证认为，以上典籍中记载的药用蜚蠊，其基源及原动物应为蜚蠊目蜚蠊科大蠊属的美洲大蠊（见，印）、澳洲大蠊（盘“埘功、褐色大蠊（只）、黑懒夫蠊忸堙幻等，具有活性组分的蜚蠊提取物可用于治疗外创伤面、妇女生殖道疾病、心血管疾病及乙型肝炎等。由

30、于美洲大蠊提取物内含有多种具药用价值的活性成分，其淋巴含海藻糖（，的，了功、肌醇（、原儿茶酸葡糖苷（等糖蛋白；角皮和肌肉中含多种氨基酸，其中有苷氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、丝氨酸、苏氨酸、精氨酸、天冬酰氨等。此外还含有多种信息素、神经介质肽和神经色酮、，异黄蝶呤，黄蝶呤，一羟色氨，多巴氨，一氨基丁酸，软骨素（），皮肤素（）、硫酸角质素，透明质酸（）等，这些成分对于修复创伤溃疡面具有一定的作用，因此本文着重以未报到的应激型溃疡为重点并对比乙醇及醋酸型溃疡的治疗效果，来研究美洲大蠊提取物治疗溃疡的途径。实验材料与方法药物：西米替丁（安徽金太阳生化药业有限公司，

31、国药准字）美洲大蠊提取物制备：水提液制备：选取一月内美洲大蠊成虫，转移至供水但撤食的玻璃缸内饲养天，待成虫吐尽内容物后，一。冷冻处死，乙醇短时间清洗虫体表面，蒸馏水淋洗两遍，凉干，剪去翅、足、触须后称取约放入碾钵中，加入蒸馏水碾磨，置。冰箱中冷冻，如此反复次，直到虫体被充分磨成匀浆。将匀浆移入离心管中，定容至，离心，分离上层油状物和下层沉淀，取中间上清液，离心，分离上层油状物和下层沉淀，取中间上清液，一冰箱静置过夜。浓缩、醇洗：将粗提获得的上清液置沸水浴中加热至沸腾蒸发，待上清液浓缩至原有体积时生成大量棕灰色沉淀，冷却后离心分钟，弃去上层油状物和下层沉淀，取中间澄清液，加热至。左右，趁热加入乙

32、醇（：），不断搅拌，冷却至室温后，离心分钟，除去上清液，得白色沉淀物，乙醇反复沉淀三次。精制：取白色沉淀物加热溶解，再加入体积活性碳，不断搅拌，加热，趁热过滤，用少量蒸馏水洗活性碳二次，合并每次洗滤液，乙醇重结晶。动物：健康昆明小鼠，体重，兼用，由中南大学实验动物中心提供。实验结果对小鼠应激型胃溃疡模型的影响取小鼠只，早古各半，随机分为组。生理盐水对照组，西米替丁组，美洲大蠊高剂量组，美洲大蠊低剂量组。高剂量组体重灌胃，低剂量组体重灌胃，西米替丁组体重灌胃，给药体积均为，生理盐水对照组给予同体积生理盐水。每日灌胃次，连续给药。第日灌胃后，禁食，不禁水，未次所试药物一般在应激前一给予。用乙醚将小

33、鼠轻度麻醉，固定四肢捆绑于木板上使其无法自由活动。然后头部向上垂直浸入度的水中，水浸至小鼠剑突部位。浸泡卜后，将小鼠断头或拉脱颈椎处死。打开腹腔，结扎幽门后将全胃取出。向胃内注入福尔马林；再将胃浸泡于福尔马林，以固定胃内外层沿胃大弯剪开胃，用自来水轻轻冲洗去掉胃内容物，将胃展平在玻璃板上，用棉球轻轻拭去附挂于胃粘膜上的血丝，观察腺胃部的胃粘膜缺损用解剖显微镜，测量每个粘膜损伤的长度，每只鼠所有损伤的长度总和即为该鼠的溃疡指数，并计算溃疡抑制百分率。“”溃疡抑制百分率（对照组溃疡指数一给药组溃疡指数）对照组溃疡指数表美洲大蠊对小鼠应激型胃溃疡的影响（±）注：与空白对照组比较对小鼠醋酸烧

34、灼型胃溃疡的影响取小鼠只，随机分为组：生理盐水对照组，西米替丁组，美洲大蠊高剂量组，美洲大蠊低剂量组。高剂量组体重灌胃，低剂量组体重灌胃，西米替丁组体重灌胃，给药体积均为，生理盐水对照组给予同体积生理盐水。每日灌胃次共。从日给药后，开始禁食。于末次给次后，各组小鼠均灌胃醋酸只，后处死动物，结扎幽门和贲门。取出胃，胃内注射福尔马林液，并置于福尔马林液中固定后，沿胃大弯切开，用自来水轻轻冲洗去掉胃内容物，将胃展平在玻璃板上，用棉球轻轻拭去附挂于胃粘膜上的血丝，观察腺胃部的胃粘膜缺损用解剖显微镜，测量每个粘膜损伤的长度，每只鼠所有损伤的长度总和即为该鼠的溃疡指数，并计算溃疡抑制百分率。“溃疡抑制百分

35、率（对照组溃疡指数一给药组溃疡指数）对照组溃疡指数×表美洲大蠊对小鼠醋酸烧灼型慢性溃疡的影响（±）注：与空白对照组比较；对小鼠乙醇型胃粘膜损伤的影响取小鼠只，随机分为组：生理盐水对照组，西米替丁组，美洲大蠊高剂量组，美洲大蠊低剂量组。高剂量组体重灌胃，低剂量组体重灌胃，西米替丁组体重灌胃，给药体积均为，生理盐水对照组给予同体积生理盐水。每日灌胃次共。从日给药后，开始禁食。于末次给次后，各组小鼠均灌胃无水乙醇只，后处死动物，结扎幽门并口责门。取出胃，胃内注射福尔马林液，并置于福尔马林液中固定后，沿胃大弯切开，用自来水轻轻冲洗去掉胃内容物，将胃展平在玻璃板上，用棉球轻轻拭去附挂

36、于胃粘膜上的血丝，观察腺胃部的胃粘膜缺损用解剖显微镜，测量每个粘膜损伤的长度，瘀血点计分，线状瘀血点长度小于者计分，者计分，者计分，大于者计分，将全胃计分相加即为该鼠的溃疡分数，并计算溃疡抑制百分率。“”溃疡抑制百分率（对照组溃疡分数一给药组溃疡分数）对照组溃疡分数表美洲大蠊对小鼠无水乙醇所致胃粘膜损伤的影响（土）注：与空白对照组比较；结论：结果表明，美洲大蠊高剂量组对小鼠应激型胃溃疡抑制率可达具有明显的保护作用。另外，美洲大蠊高剂量组对小鼠无水乙醇所致胃粘膜损伤抑制率为也具有一定的保护作用。但是美洲大蠊提取物对小鼠醋酸烧灼型胃溃疡抑制率只为保护作用不明显。分析与讨论一般认为应激性胃溃疡产生包

37、括各种刺激（冷、热、电、低血压、休克等）经大脑边缘系统和下丘脑传导到延髓和迷走神经，再沿脊髓传导到脏神经，脏神经兴奋导致胃粘膜局部毛细血管收缩，血管收缩后产生一系列继发生反应包括：“血管内皮细胞转化为，产生：”、：等；引起中性粒细胞浸润，并刺激中性粒细胞释放：等。从而造成胃粘膜微循环不能正常运行，粘膜缺血、缺氧，由此可导致胃粘膜粘液和碳酸氢盐分泌不足、局部前列腺素合成不足，上皮再生能力减弱等改变，胃粘膜屏障因而受损。“此外，目前认为中枢净上腺素也可能参与了应激性胃溃疡发生，但对其作用认识不一致。“”阻断受体可明显促进胃粘膜内：合成，加强粘液屏障功能，减轻应激性胃溃疡，提示外周：受体可能参与介导

38、应激性胃溃疡。但也有实验发现阻断脑内肾上腺素合成可加重应激性胃溃疡，提示肾上腺素可减轻应激性胃溃疡。糖皮质激素在糖皮质激素发病中的意义研究结果也不一致。抑制释放可明显减轻冷束缚应激小鼠胃粘膜病变严重程度。但另有文献报告阻断小鼠垂体一肾上腺皮质轴，以造成皮质功能不全后，血浆皮质醇含量明显降低，此时施以水浸束缚应激，与未阻断垂体一肾上腺皮质轴小鼠相比，胃粘膜血流降低更明显，用皮质醇替代治疗后，胃粘膜血流降低程度减轻。国内文献报告用糖皮质激素合成抑制剂将小鼠血浆皮质酮维持在应激前水平，则应激后胃粘膜病变减轻，但后反加重，提示糖皮质激素增多对糖皮质激素有影响，但较复杂。由于乙醇具亲酯性和溶脂能力，高浓

39、度乙醇因而可直接破坏胃粘膜屏障。粘膜屏障的正常保护功能是维持胃腔与胃粘膜内氢离子高梯度状态的重要保证，当上述因素导致胃粘膜屏障破坏，则胃腔内氢离子便会反弥散进入胃粘膜内，从而迸一步加重胃粘膜的损害，最终导致胃粘膜康烂和出血。上述各种因素亦可能导致十二指肠液反流人胃腔增加，其中的胆汁和各种胰酶，参与了胃粘膜屏障的破坏。此外乙醇能造成胃壁环行肌强力收缩，抑制胃粘膜分泌。乙醇在胃粘膜细胞外还可直接产生自由基，容易生成，一“”因此乙醇型胃溃疡与活性氧有关，可能原因是：引起的细胞功能异常，导致磷脂酶激活，花生四烯酸生成增加，等生成相应增加。由于等能够强烈收缩血管，引起包括活性氧在内的多种损伤因子增加，从

40、而损害粘膜细胞。“”美洲大蠊提取物的作用途径可能与下丘脑一垂体一肾上腺刺激激素的分泌与调控有关，如可刺激。分泌，这主要是因为此类激素具有：增加血管张力，降低血管通透性，拮抗组胺等炎性介质对血管的扩张作用，减轻局部充血，减少白细胞和体液的渗出。稳定溶媒体膜，减少因为溶酶体破裂而造成的组织蛋白酶和水解酶释放，减少组织分解和爽性介质释放。抑制中性白细胞、单核细胞和巨噬细胞向炎性部位募集。此外美洲大蠊提取物还可能参与了体内活性氧自由基的清除。总之，美洲大蠊提取物抗胃溃疡作用可能通过抑制炎性介质的产生以及增加糖皮质激素的合成而实现，但由于炎症反应机制复杂，其具体作用尚需进一步研究。总结本研究全面系统的观

41、察了美洲大蠊在人工饲养条件下的室内繁殖、发育及其生物学特性乖行为学特点，通过在实验室自然温度下，观察美洲大蠊的生殖产卵、孵化、若虫生长、蜕皮、羽化等发育的全过程，以及各发育阶段的食性行为特点，并对每鞘含卵数、卵孵率、鞘孵率等生物学特征参数进行分析，我们发现美洲大蠊的产卵习性和食性受温度的影响较大，且其食杂性较强，通常在夜间卜时左右进行交配，为半变态昆虫。此外，我们以关洲大蠊水提取物作为试药，观察不同药物剂量对于不同的胃溃疡模型作用效果，结果发现美洲大蠊提取物对小鼠应激胃溃疡型，及小鼠无水乙醇胃粘膜损伤型有较好的治疗效果，但对小鼠醋酸烧灼胃溃疡型则效果不明显。因此，我们认为美洲大蠊提取物有进一步

42、研究利用的药用价值，可以通过人工规模饲养，提取有效药用成分开发研制新药。致谢本项研究得到了导师肖小芹教授的亲切指导，感谢导师三年来对我的无微不至的关怀，使我对人生的意义有了新的认识。感谢中南大学湘雅医学院汪世平教授对整个研究提供了众多的支持；感谢本校何永恒老师、朱斌，顿老师、赵爱民老师、杨志波老师为本项研究提出了宝贵的建议；感谢徐绍锐老师、吴仕筠老师为该项目提供了坚实的研究基础和帮助；感谢余俊龙老师、戴橄老师、彭先楚老师、李文凯老师为实验提供了大量的技术指导；感谢卿蕊老师、张驹学友的大力协助；感谢吕志跃博士、何卓博士、周松华硕士、刘雪琴硕士、刘芬硕士、姜孝新硕士、范九波硕士、张家祥学友等全体课

43、题组成员的支持和协助。在此表示衷心的感谢！参考文献】梁铁麟蜚蠊医学昆虫（陆宝麟主编），北京：人民军医出版社，一冯平章，郭予元，吴福祯中国蟑螂种类及防治北京：中国科学技术出版社，】胡修元蜚蠊可能引起传播的疾病中国媒介生物学及控制杂志，（）：贺金生医学动物防制，（）：吴福祯中国小蠊属的蜚蠊种类及其分布、生活习性和经济意义昆虫学报，（）：曾晓，柯海萍，胡建波，佟颖，薛素琴北京市德国小蠊对种杀虫剂的抗性测定中国媒介生物学及控制杂志，（）：】周萌霁，杨承亮，卢永仪医学动物防制，（）：】林启彬中国的蜚蠊昆虫化石昆虫学报，（）：，（）：江雪峰，何胜国近年来蟑螂防治研究进展】昆虫知识，（）：黄钢，刘玉欣河北省

44、城市蜚蠊综合防制策略【医学动物防制，（）：沈培谊，蔡昌曜浙江省室内蜚蠊种类及其分布的调查【中国媒介生物学及控制杂志，（）：刘守义中药药理与临床】（）：徐叔云，卞如濂，陈修药理实验方法学【北京：人民卫生出版社，陈奇中药药理实验方法学北京：人民卫生出版社，王汝俊中药药理与临床】（）：】陈灏珠实用内科学第版；北京：人民卫生出版社，：张海燕，吴淑珍，李剑敏，方军胃癌和胃溃疡间质中肥大细胞的研究温州医学院学报；：王凌娟，张雯胃溃疡及实验性胃溃疡模型中国烧伤创疡杂志；：余书勤，安鲁凡，单世明瑞巴匹特对小鼠急性胃溃疡的黏膜保护作用中国新药杂志；：【】，。：卜附录美洲大蠊分子生物学研究进展摘要】：本文报告了近年来有关于美洲大蠊分子生物学方面的研究进展，着重阐述了其抗原、血淋巴、神经肽及抗菌类物质等研究的最新成果。并认为家族是最重要的抗原家族，它在激