化学毒物致突变作用及其评价PPT学习教案

1、会计学1化学毒物致突变作用及其评价化学毒物致突变作用及其评价第1页/共54页突变突变缺失缺失(deletion):(deletion):重复重复(duplication):(duplication):倒位倒位 (inversion):(inversion):易位易位(translocation):(translocation):整倍体（整倍体（euploideuploid）非整倍体非整倍体(polyploid)(polyploid)数目异常数目异常结构异常结构异常基因突变基因突变碱基置换碱基置换（错配）（错配）框移突变框移突变（缺失、插入）大段损伤大段损伤臂间倒位臂间倒位臂内倒位臂内倒位染色体

2、畸变染色体畸变转换转换(transition)(transition)颠换颠换(transversion)(transversion)第2页/共54页TGAC转换颠换基因突变基因突变-转换与颠换示意图转换与颠换示意图第3页/共54页 A T G C T G G C T A C G A C C G A T G C A C T G T A C G T G A C A c G T T G G C T G C A A C C G原原 DNA颠换颠换转换转换第4页/共54页 C A T C A T C T C A T C A T C A T C A T C 组组 组组 组组 组组 组组 组组 组组 C

3、A T C A T C T C A T C A T C A T C A T 组组 组组 亮亮 异亮异亮 异亮异亮 异亮异亮 异亮异亮移码突变以后A第5页/共54页第6页/共54页Fig 7.4b Metaphase human chromosomes stained with acridine orange to show R banding.第7页/共54页人类23对染色体核型第8页/共54页第9页/共54页 重复是指染色体的片段出现多个拷贝。 重复往往可 改变基因剂量，可能造成表型的显著改变。第10页/共54页第11页/共54页第12页/共54页第13页/共54页第14页/共54页第15页

4、/共54页倒位（倒位（inversioninversion）第16页/共54页第17页/共54页第18页/共54页第19页/共54页第20页/共54页 2003 John Wiley and Sons Publishers第21页/共54页第22页/共54页第23页/共54页 2003 John Wiley and Sons Publishers第24页/共54页第25页/共54页第26页/共54页第27页/共54页体细胞突变生殖细胞突变 良性肿瘤存活突变恶性转化细胞衰老未分化胚胎细胞受损动脉硬化癌变未知疾病 功能或结构畸形流产与死胎胚胎综合症生育功能障碍遗传性疾病基因负荷 老化已分化胚胎细胞

5、受损 DNA受损受损显性致死隐性致死修复的效率修复的效率突变后果示意图第28页/共54页第29页/共54页（一）光修复（一）光修复光修复酶光修复酶(photolyase)(photolyase) UV第30页/共54页UvrAUvrBUvrCOHPDNADNA聚合酶聚合酶OHP （二）切除修复（二）切除修复DNADNA连接酶连接酶ATP的切除修复的切除修复机制机制目目 录录第31页/共54页（三）重组修复（三）重组修复第32页/共54页（四）（四）SOSSOS修复修复 当当DNADNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。发出一系列复杂的反应。

6、在在E. coliE. coli，各种与修复有关的基因，组成，各种与修复有关的基因，组成一个称为调节子一个称为调节子(regulon)(regulon)的网络式调控系的网络式调控系统。统。 这种修复特异性低，对碱基的识别、选择能这种修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。通过力差。通过SOSSOS修复，复制如能继续，细胞修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而是可存活的。然而DNADNA保留的错误较多，导保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。致较广泛、长期的突变。第33页/共54页第34页/共54页 突变型细菌突变型细菌 野生型细菌野生型细菌正向突变回复突变Ames试验原理示意图第35页/共

7、54页第36页/共54页第37页/共54页第38页/共54页第39页/共54页 收集细胞收集细胞低低渗渗固定固定染染色色阅片阅片照相照相第40页/共54页 2003 John Wiley and Sons Publishers第41页/共54页 5%Giemsa染色抗凝血抗凝血BrdU BrdU PRMI16404ml 37oC避光培养48h 37oC培养24h秋水仙素 培养2-4h离心低渗固定制片紫外线照射30min阅片第42页/共54页第43页/共54页第44页/共54页第45页/共54页X YX Y+ XXX X + XYX X + XYX XX XX YX YXXXXXYXYXYXYF

8、1F2XYXY诱变剂诱变剂诱变剂诱变剂SLRL 试验原理试验原理第46页/共54页1.0%NMA 0.7%LMA100ul+细胞混悬液0.7%LMA 溶解（4oC至少4h）展开20min 电泳25v 300mA 中性化（3-5次） 染色镜检加盖玻片第47页/共54页第48页/共54页Image Analyses Tail lengthComet lengthtail with low intensityTail with high intensity (big tail moment)Intensitylength第49页/共54页Image Analyses Evaluation of different parameters:migrationcomet lengt