微生物(精装版)

1、微生物复习题一、名词解释1、病原微生物：指能引致宿主机体损伤的微生物。2、菌落：指细菌在固体培养基上经一定时间生长繁殖形成肉眼所见的单个细菌集团。 3、质粒：细菌独立于核体外的遗传物质，多位环状双股DNA结构。（质粒可以自我复制，随宿主细胞分裂传递给子代细胞。可以编码质粒细菌许多重要生物学状。）4、荚膜：某些细菌细胞壁外围包绕一层界限分明、且不易被洗脱的粘液性物质。其厚度02 m，称为荚膜。功能：是细菌毒力的组成部分，与细菌的致病性有关。5、细菌生长曲线：细菌在一个有限体系中的生长称为群体生长。 任何细菌的群体生长均服从同一规律，以培养时间为横坐标，细菌数的对数为纵坐标作图可以得到生长曲线。6

2、、毒力： 微生物引致宿主损伤的能力。 7、巴氏消毒法：是以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法。 8、噬菌体：是感染细菌、支原体、螺旋体、放线菌以及蓝细菌等的一类病毒，亦称细菌病毒。 9、SPF动物：是指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原性微生物的动物。10、外毒素：是某些病原菌在生长繁殖过程中所产生的对宿主细胞有毒性的可溶性蛋白质。 11、包含体：是某些病毒感染细胞产生的特征性的形态变化，可通过固定染色而后在光学显微镜下检测。 12、串珠试验： 在含有青霉素0.5IU/ml的培养基中，由于细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，原生质体相互连接成串，称

3、为“串珠反应”。 13、卡介苗：一种用来预防儿童结核病的预防接种疫苗。 14、病毒颗粒：在电子显微镜下显现一定的形态，具有完整的病毒结构，有感染性的病毒粒子。 15、病毒复制：只在活细胞内进行，其方式有别于其他微生物，是以病毒基因为模板，在酶的作用下，分别合成其基因及蛋白质，再组装成完整的病毒颗粒，这种方式称为复制。是病毒感染宿主、引致疾病的过程。包括吸附、穿入与脱壳生物合成、组装与释放等步骤。 16、朊病毒：是一种具有感染性和自我复制能力的因子，也叫做普列昂或蛋白质侵染因子。 二、简述 、问答题1、与医学相关的微生物有哪些？答：与医学有关的原核细胞型微生物均属真细菌，包括细菌、真菌（包括霉菌

4、和酵母菌）、放线菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、和病毒等。2、微生物学的先驱有那些？他们的主要成绩是什么？答：吕文虎克 微生物的发现者。1683年用200倍的显微镜,第一次看见到微生物。 巴斯德 微生物的奠基人。1） 研究了发酵的本质，开创微生物生理研究 2） 对巴氏杆菌、狂犬病等病原作了开创性的研究。3）发明了疫苗。Koch 1） 建立科赫定律。 2） 对结核杆菌、炭疽杆菌等病原作了开创性的研究。3） 对微生物的分离、培养、染色技术作出巨大贡献。 Lister 建立消毒技术 3、微生物学有哪些特性？答：1）形态微小 需要用光学显微镜放大400一 1000倍才能看见；有些必须放大几万倍才

5、能观察清楚。 2） 结构简单 3） 分布广泛 在自然界广泛分布，空气、水域、 人 体、动植物体表等。 4） 繁殖迅速 生长繁殖速度快，一般细菌20 30分钟一代。 4、细菌的基本结构和特殊结构有哪些？答：细菌的基本结构是指各种细菌都具有的细胞结构：包括细胞壁、细胞膜、细胞质、核物质、细胞内含物。细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞。5、细菌形态、结构特性在细菌鉴定中的作用。答：细菌的基本形态可分为球状、杆状、和螺旋状三种，分别称为球菌、杆菌和螺旋菌1)球菌 细胞呈球形或近似球形 1、单球菌 尿素微球菌 2、双球菌 肺炎双球 3、四联球菌 四联球菌 4、八叠球菌 藤黄八叠球菌 5、链球菌 化

6、脓链球菌 6、葡萄球菌 金黄色葡萄球菌2）杆菌 细胞呈杆状或圆筒状，是细菌中种类最多的 一般分为两类。 单杆菌 大肠杆菌 链杆菌 炭疽芽孢杆菌3）螺旋菌 细胞呈弯曲状，根据其弯曲情况不同可分为弧菌和螺旋菌二类。 弧菌 逗号弧菌 螺菌 鼠咬热螺菌6、细菌的合成代谢产物有哪些？有何意义？答：细菌除了合成核酸、蛋白质、多糖等菌体必需成分外，还合成一些比较复杂的特殊产物。这些产物可积累在细胞内，或排出细胞外积累在它们生活的环境中。1）热原质(pyrogen)许多革兰氏阴性菌在生长中能产生一种耐热物质，将它注入人体或动物体内，可以引起发热反应，这种物质被称为热原质(致热原)。热原质是革兰氏阴性菌的脂多糖

7、。2）毒素（toxin）细菌的一些代谢产物对动植物细胞有毒杀作用的称毒素。毒素大多具有蛋白质的性质，其毒性很强，包括外毒素和内毒素。肉毒杆菌产生的内毒毒素、破伤风杆菌产生的破伤风毒素的毒性强，这些毒素是菌体生长过程产生并分泌到细胞外的，因此称为外毒素。3）细菌素 大多数细菌会产生抑制或杀死近缘细菌的物质，把这些物质称为细菌素。细菌素与抗生素不同，不具抗生素那样的较广泛的抗菌谱，只有具有特异性细菌素受体的近缘细菌才对细菌素敏感，吸附细菌素而被杀死。由于细菌之间产生的细菌素是不同的，因此有可能利用细菌素鉴定细菌。4）色素 色素是许多细菌在培养过程中合成的一些带有不同颜色的代谢产物。常见的色素有红、

8、黄、橙、绿、青、蓝、紫、褐黑等色。这些色素可分为水溶性色素和脂溶性色素。水溶性色素可使培养基带上颜色，如绿脓杆菌产生绿脓菌素可使培养基呈黄绿色；脂溶性色素局限在菌落上面，不扩散到培养基内，如金黄色葡萄球菌的色素等。7、细菌群体生长繁殖分几个时期？简述各时期特点。答：分为迟缓期、对数生长期、稳定期和衰亡期4个阶段。1）迟缓期延迟期细胞生长特点是代谢活跃、分裂迟缓。具体体现在以下几个方面：细胞体积增；新陈代谢活跃， RNA含量增高；原生质嗜碱性加强；对不良条件较敏感；但细胞分裂延迟。2）对数生长期此期细菌，其个体形态、化学组成、染色性和生理特性均较典型、代谢旺盛、生长迅速、代时稳定， 所以是研究基

9、本代谢的良好材料，也是发酵生产的良好种子，有利于在短时期内获得大量细菌，以缩短发酵周期。3）稳定期平衡期细胞内的贮藏物(如肝糖、脂肪粒、淀粉等)和代谢产物的积累达到高峰，因此生产中应考虑发酵液在此期放罐。对芽胞菌而言，此期形成大量的芽胞，适用于该菌的菌种保藏，或芽胞的收集。工业生产上常通过补料、调节pH等方法延长稳定期，以便积累更多的抗生素，提高产量。4）衰亡期衰亡期的细胞形态无典型，呈现多形性，甚至畸形，大小不一，革兰氏染色性改变，有的细胞自溶，释放出氨基酸，抗生素或酶类等。8、简述细菌生长繁殖的条件。答：细菌的培养条件 细菌在适宜的环境条件下才能生长繁殖。影响生长的环境因素很多诸如营养、温

10、度、pH、氧及其他气体等等。1）营养物质 细菌生长所需的基本营养物质可分为碳源、氮源、无机盐、生长因子和水分。根据各种细菌不同的营养要求，选用不同的培养基，以满足其生长的需要。 2）温度 原核生物对温度的适应表现为多样性，范围7.5 75之间。最适生长温度意味着维持最大速率生长的温度。大体上分为三类：嗜热菌 能在4590条件下生长。嗜冷菌 能在一7520范围内生长。嗜温菌 能在2045 3）pH 多数细菌最适生长的pH范围很窄，约为6.08.0。多数病原性细细菌(pH7.2-7.6)在中性或微碱环境中生长良好。 4）气体 微生物对气体的需求根据细菌对氧的需求可分为需氧菌、厌氧菌和兼性厌氧菌。5

11、）渗透压 9、试述湿热灭菌的原理和种类。答：1、利用沸水或水蒸汽消毒灭菌，水分容易穿透物品，热传导快，能迅速提高物品内部的温度；2、蛋白质凝固是高温杀菌的主要环节，湿热灭菌时蛋白质易于吸收水分，凝固变性；3、蒸汽与物品接触凝结成水，放出潜热，提高温度，加速微生物的死亡。1）煮沸法2）高压灭菌法3）间歇灭菌法 4）巴氏消毒法10、简述基因水平的柯赫法则。答：基因水平的柯赫法则1）在致病菌株中检出某些基因或其产物，而无毒力菌株中无基因或其产物。2）有毒力菌株的某个基因被损坏，则菌株的毒力应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内，后者成为有毒力菌株。3）将细菌接种动物时，这个基因应在感染的过程中表

12、达。4）在接种动物检测到这个基因产物的抗体或产生免疫保护。11、试述内毒素与外毒素的区别。区别要点外毒素内毒素存在部位细菌细胞在生长繁殖过程中分泌至周围环境中存在于菌细胞内，为细胞壁结构成分细菌细胞甭解释才释放出来产生菌主要为某些革兰氏阳性菌产生，也有少数阴性菌产生大多数革兰氏阳性菌所具有化学成分蛋白质磷脂-多糖-蛋白复合物稳定性性质不稳定，对热敏感，紫外线、氧化剂、重金属盐可破坏性质稳定，耐热，不被紫外线、氧化剂、重金属盐、破坏，能被酸水解抗原性强弱毒性作用毒性极强，对组织气管有特异选择性作用，引起特异性毒性反应毒性较弱，对组织器官无特异性选择作用，引起相同的毒性反应甲醛溶液处理经处理，毒性

13、完全丧失但保留其抗原性而成为类毒素经处理，毒性可降低，但不能成为类毒素12、简述细菌毒力减弱的方法。答：1）长时间在体外连续培养传代 病原菌在体外人工培养基上连续多次传代后，毒力一般都能逐渐减弱乃至失去毒力。2）在高于最适生长温度条件下培养 例如炭疽工型和号疫苗，均是将炭疽杆菌强毒株在4243培养传代育成。3）在含有特殊化学物质的培养基中培养 如广为采用的结核病卡介苗(BCG)，系将牛型结核杆菌在含有胆汁的马铃薯培养基上每15天传1代，持续传代13年后育成。4）在特殊气体条件下培养 如无荚膜炭疽芽孢苗是半强毒菌株在含50动物血清的培养基上，在50C02的条件下选育的。5）通过非易感动物 如猪丹

14、毒弱毒苗(GC42)系将强致病菌和株通过豚鼠370代后，又通过鸡42代选育而成。 6）通过基因工程的方法 去除毒力基因或用点突变的方法使毒力基因失活，可获得无毒力菌株或弱毒菌株。但对多基因调控的毒力因子较难奏效。13、常见的细菌变异现象有哪些？答：1)形态结构变异 鞭毛 芽孢 荚膜 2)菌落的变异 S R3)抗原变异 细胞成分尤其是细胞表面成分(如细胞壁、鞭毛、荚膜等)的细微变异而引起抗原性变化的突变型。 另外一些病毒基因易发生改变，往往抗原也会改变。4) 抗性变异 这是一类能抵抗有害理化因素的突变类型，根据其抵抗对象的不同可分为抗药性、抗紫外线和抗噬菌体等突变型。这些抗性突变型在遗传学基本理

15、论研究中起很重要作用，是一种重要的选择性标记。5)毒力变异6) 营养变异 该型是一类重要的生化突变型，指的是某种微生物经基因突变后，由于代谢过程中某些酶的丧失而成为必须添加某种营养成分才能正常生长的突变型。14、试述金黄色葡萄球菌的致病因素及所致疾病。答：金色葡萄球菌可产生多种毒素和酶作为致病物质酶:凝固酶、纤维蛋白溶酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、脂酶等。毒素：细胞毒素（a、b、g、d、杀白细胞素）、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1、肠毒素等。其他：粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖等。常引起两类疾病:化脓性疾病 例如创伤感染、脓肿、蜂窝织炎、乳腺炎、关节炎、败血症和脓毒败血症等。毒素性疾病 被葡萄球

16、菌污染的食物或饲料引起人或动物的中毒性呕吐、肠炎及人的毒素休克综合征等。 15、细菌性病料如何进行微生物学诊断？答：1）病料采集原则1、无菌概念2、采取有病变部位3、采取时间，濒临死亡，一般不超过6小时4、适当保存5、及时送检2）微生物诊断步骤1、形态观察 病料触片、涂片，瑞氏染色，姬姆萨染色2、分离培养 适宜培养基分离 适宜菌落形态、革兰氏染色观测形态3、生化鉴定4、血清学鉴定 凝集反应、琼扩试验、标记抗体技术5、动物试验：选择敏感动物接种。16、猪丹毒杆菌的微生物学诊断要点有哪些？答：1) 显微镜检查 采取高热期病猪耳静脉血作涂片，死后采取心血及肝、脾、肾、淋巴结等制成涂片,染色镜检。如发

17、现少量典型杆菌，可初步确诊。2) 分离培养 分离培养时可用含有葡萄糖或马血清半固体琼脂培养基。为提高分离率可加入结晶紫或叠氮钠，也可加入新霉素或万古霉素，抑制某些杂菌生长。3)细菌鉴定 李氏杆菌鉴别诊断。用鸽子肌肉注射0.5培养物，3-5天死亡。 4）血清学检查 可采用凝集试验（ESCA）,又称生长凝集试验，特异性试验。17、试述炭疽芽孢杆菌的生物学特性。答：1)形态及染色特性本菌为革兰氏阳性粗大杆菌，长38 m，宽1.5 m，无鞭毛，不运动。芽孢呈椭圆形，位于菌体中央，芽孢囊不突出菌体。在动物体内菌体单在或35个菌体形成短链，相连的菌端平截而呈竹节状。在动物体或含有血清的培养基上能形成荚膜，

18、但在普通培养基中不形成荚膜(图3-3-1)。荚膜有较强的抗腐败能力，当菌体因腐败而消失后，仍有残留荚膜显示，称为“菌影。在猪体内的此菌形态较为特殊，菌体常弯曲或部分膨大，轮廓不清。在培养基中，此菌常形成长链，并于培养1824 h后开始形成芽孢。一般认为动物体内的炭疽杆菌只有在暴露接触空气中的氧气之后，才能形成芽孢。芽孢成熟后，菌体的躯壳消失，因此在陈旧的培养物中能见到游离芽孢。2)培养特性本菌为需氧菌，在氧不足的情况下虽然也可以生长，但较差。可生长的温度范围为1540 ，最适生长温度为3037 。最适pH为7.27.6。对营养要求不高，普通培养基中即能良好生长。在普通琼脂上培养24 h后，强毒

19、菌株形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥、边缘呈卷发状的粗糙型菌落(图332)；无毒或弱毒菌株菌落较小，形成表面较为光滑湿润、边缘比较整齐的光滑型菌落。在血液、血清琼脂平板上或在碳酸氢钠琼脂上，置于体积分数为5%二氧化碳的环境中培养，强毒菌株可形成圆形隆起、光滑湿润、有光泽的黏液型菌落。在血液琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可轻微溶血。在普通肉汤中培养24 h后，上部液体仍清朗透明，液面无菌膜或菌环形成，管底有白色絮状沉淀，若轻摇试管，沉淀会往上升起，卷绕成团而不消散。在明胶穿刺培养中，细菌除沿穿刺线生长外，向四周呈直角放射状生长，整个生长物好似倒立的雪松状。经培养23 d后，明胶表面逐渐被液化

20、呈漏斗状。在含0.050.5 IU/mL青霉素的培养基中培养时，幼龄炭疽杆菌细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串珠状，称为“串珠反应。若培养基中青霉素含量加至10 IU/mL时，则完全不能生长或轻微生长。这是炭疽杆菌所特有的，可与其他需氧芽孢杆菌鉴别。3)生化特性本菌能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖、蕈糖和甘油，不发酵阿拉伯糖、木糖和甘露醇。能水解淀粉、明胶和酪蛋白。VP试验阳性，不产生靛基质和H2S，能还原硝酸盐。牛乳经24 d凝固，然后缓慢胨化，不能或微弱还原美蓝。4)抗原结构已知本菌有荚膜抗原、菌体抗原、保护性抗原和芽孢抗原4种主要抗原。荚膜抗原，仅见于有毒菌株，与毒力有

21、关；其抗原刺激产生的抗体无保护作用，但其反应性较特异，故依此建立了各种血清学鉴定方法，如荚膜肿胀试验及免疫荧光抗体法等，均呈较强的特异性。菌体抗原是存在于本菌细胞壁及菌体内的半抗原，此抗原于细菌毒力无关，但性质稳定，即使在腐败的尸体中经过较长时间，或经过加热煮沸甚至高压蒸汽处理，抗原性不被破坏；常用的Ascoli反应，加热处理抗原依据于此。但此法特异性不高，其他需氧芽孢杆菌能发生一定程度的交叉反应。保护性抗原是一种胞外蛋白质抗原成分，在人工培养条件下也可产生，为炭疽毒素的组成成分之一，具有免疫原性，能使机体产生抗本菌感染的保护力。芽孢抗原是芽孢的外膜、中层、皮质层一起组成的炭疽芽孢的特异性抗原

22、，它具有免疫原性和血清学诊断价值。5)抵抗力本菌繁殖体的抵抗力不强，与一般非芽孢菌大致相同，60 加热3060 min，或75 加热515 min即可杀死，常用消毒剂均能于短时间内将其杀死，如0.4 g/L的碘液、质量分数为0.5%的过氧乙酸10 min即可将其杀死。对青霉素、链霉素、红霉素、氯霉素等多种抗生素及磺胺类药物高度敏感，可用于临床治疗。在未解剖的尸体中，细菌可随腐败而迅速崩解死亡。芽孢的抵抗力特别强，在干燥状态下可长期存活。需经煮沸1525 min，121 灭菌510 min，或160 干热灭菌1 h方被杀死。实验室干燥保存40年以上的炭疽芽孢仍有活力。干燥皮毛上附着的芽孢，也可存

23、活10年以上。牧场一旦被其污染，传染性常可保持2030年。对于曾经掩埋炭疽尸体的土地，必须加以严格控制。在开垦后的头12年，只准种植黑麦、蒜、三叶草等植物，因其根系可分泌一种杀死炭疽杆菌的物质，能起到净化土壤的作用。常用的消毒剂是新配的质量分数为20%的石灰乳或质量分数为20%的漂白粉作用48 h，质量分数为01%的升汞作用40 min或质量分数为4%的高锰酸钾15 min。炭疽芽孢对碘特别敏感，质量分数为004%的碘液10 min即将其破坏，但有机物的存在对其作用有很大影响。此外，过氧乙酸、环氧乙烷、次氯酸钠等都有较好的效果。皮毛消毒可用加有质量分数为2%盐酸的5%(质量分数)的食盐水，于2

24、530 下浸泡40 h，或于室温2025 和相对湿度40%68%的室内，将环氧乙烷与溴甲烷按144的比例混合，以每立方米空间15 kg的用量熏蒸24 h。18、病毒的基本特征有哪些？答：个体微小（15300nm），能通过细菌滤膜，不具细胞结构；每种病毒只含一种核酸，DNA或RNA；没有核糖体和酶系统，不能独立进行代谢活动，营专性细胞内寄生；不能进行二分裂，通过特有的复制方法进行繁殖。19、什么是病毒体？其基本结构如何？答：成熟的、结构完整的，具有可感染性的单个病毒。等同于病毒体、病毒粒或病毒子。完整的病毒颗粒主要由核酸和蛋白质组成。核酸构成病毒的基因组，为病毒的复制、遗传和变异等功能提供遗传信

25、息。由核酸组成的芯髓被衣壳包裹，衣壳与芯髓一起组成核衣壳，构成病毒体的基本结构。20、简述病毒分离培养的方法。答：病毒必须在活细胞中方能进行生命活动，因此早期对病毒生物学特性的研究主要通过动物接种（鼠、兔、犬、牛、猴等）以培养病毒。目前动物接种仅限于研究病毒或毒株的致病性或为确切诊断某种病毒为病原体。个别病毒（如流感病毒）必须在鸡胚中进行分离培养。受精鸡胚的羊膜腔和尿囊腔均可用以分离流感病毒。21、疱疹病毒科的特点有哪些？常见的病毒有哪几种？P356答：疱疹病毒在外环境中不易存在，一般需要密切接触才能传染，尤其是通过交配、舔等导致的黏膜感染。在集约化养殖的牛、猪、鸡场中最易发生。许多甲亚科的成

26、员感染后产生局部病灶，尤其是皮肤、呼吸道和生殖道的黏膜。疱疹病毒可通过持续感染代代相传，此种动物周期性排毒。在某些情况下也可垂直感染。除少数例外，每种疱疹病毒都有其专一的宿主，即使宿主的种群不大，因其潜伏感染也能传代不断。常见的有伪狂犬病毒（猪疱疹病毒1型，猪）、禽传染性喉支气管炎病毒（禽疱疹病毒1型，鸡）、马立克病毒（禽疱疹病毒2型，鸡）、鸭瘟病毒（鸭疱疹病毒1型，各种鸭及水禽，只有一个血清型）。22、与细菌致病性有关的细菌结构有哪些？答：革兰阳性菌细胞壁的磷壁酸、革兰阴性菌细胞壁的脂多糖（类脂A）、荚膜、鞭毛、菌毛、23、人工培养细菌的用途及其意义。答：1)在医学中的应用 细菌培养对疾病的

27、诊断、预防、治疗和科学研究等多方面都具有重要的作用。 1.传染性疾病的病原学诊断 取患者标本，进行细菌分离培养、鉴定和药物敏感试验。是诊断传染性疾病最可靠的依据，同时也可指导临床治疗用药。 2.细菌学研究 研究细菌的生理、遗传变异、致病性、免疫性和耐药性等，均需人工培养细菌。人工培养细菌还是人类发现尚不知道的新病原菌的先决条件之一。 3.生物制品的制备 将分离培养出来的纯种细菌，制成诊断菌液，供传染病诊断使用。制备疫苗、类毒素以供预防传染病使用。将制备的疫苗或类毒素注入动物体内，获取免疫血清或抗毒素，用于传染病治疗。上述制备的制剂统称生物制品，在医学上有广泛用途。 2)在工农业生产中的应用 细菌在培养过程产生多种代谢产物，经过加工处理，可制成抗生素、维生素、氨基酸、有机溶剂、酒、酱油、味精等产品。细菌培养物还可用于处理废水和垃圾、制造菌肥和农药，以及生产酶制剂等。 3)在基因工程中的应用 因为细菌具有繁殖快、易培养的特点，所以大多数基因工程的实验和生产先在细菌中进行。如将带有外源性基因的重组 DNA转化给受体菌，使其在菌体内获得表达，现在用此方法已成功制备出胰岛素