实验一植物组织中自由水和束缚水含量的测定2011-11-17-精

1、实验一植物组织自由水和束缚水含量的测定 目的要求目的要求 通过植物组织自由水和束缚水含量的测定，进一步加深学生对植物体内水分存在状态、含水量与植物生命活动的关系，熟悉阿贝折射仪的使用。通过植物组织自由水和束缚水含量的测定，进一步加深学生对植物体内水分存在状态、含水量与植物生命活动的关系的理解，熟悉阿贝折射仪的使用。实验原理 自由水未被细胞原生质体颗粒吸附，可以自由移动、蒸发和结冰，也可以作为溶剂；束缚水则被细胞原生质胶体颗粒吸附而不易移动，因而不易蒸发和结冰，不能作为溶剂，也不易被溶质夺取。基于上述特点以及水分依据水势差而移动的原理，将植物组织浸入高浓度（低水势）的糖溶液中一定时间后，自由水可

2、全部扩散到糖液中，组织中便留下束缚水。自由水扩散到糖液后（相当于增加了溶液中的溶剂）便增加了糖液的重量，同时降低了糖液的浓度。 测定此降低了的糖液的浓度，再根据原先已知的高浓度糖液的浓度及重量，可求出浓度降低了的糖液的重量。用浓度降低了的糖液的重量减去原来高浓度糖液的重量即为植物组织中的自由水的重量（即扩散到高浓度糖液中的水的质量）。最后用同样的植物组织的总含水量减去此自由水的含量即为植物组织中束缚水的含量。 植物体内自由水和束缚水含量及其比值常与植物的生长及抗性由密切关系。自由水含量较多时，代谢活动较强，生长速度也较快，但抗性往往降低；而束缚水含量多时，则情况相反。所以自由水与束缚水含量是植

3、物抗性生理的一个指标。 实验内容实验内容 1植物组织总含水量的测定2植物组织自由水含量的测定3植物组织中束缚水含量的计算材料、仪器设备及试剂1. 材料 新鲜植物叶片或其他植物材料。2. 仪器设备 阿贝折射仪，天平（感量0.1mg和0.1g），烘箱，干燥器，称量瓶，打孔器，烧杯，瓷盘，量筒。 3. 试剂 重量百分浓度为30%35%的蔗糖溶液。 实验步骤1、植物中总含水量的测定（1）取称量瓶3只（三次重复，下同），依次编号并分别准确称重（W1）。（2）取生长一致的待测植株，各选部位、长势、叶龄一致的有代表性叶数片，用打孔器钻取小圆片150片（注意避开粗大的叶脉），立即装到上述称量瓶中（每瓶随机50

4、片），盖紧瓶盖并精确称重（W2）。 (3）将称量瓶连同小圆片置烘箱中105下烘15min以杀死植物组织细胞，再于90 烘1h，待冷却后再进行称重（W3）。 W2W3植物组织的总含水量 100% W2W1根据上式可分别求出三次重复所得到的植物组织总含水量的值，并进一步求出平均值。2、植物组织中自由水含量的测定（1）另取称量瓶3个，编号并分别准确称重（W1）。（2）用打孔器打取小圆片150片（植物材料选取同上），立即随机加入3个称量瓶重（50片瓶），盖紧瓶盖并立即称重（W2）。（3）3个称量瓶中各加入30-35的蔗糖溶液5ml左右，分别准确称重（W4）,经减压处理后置于暗处1.5h。（4）用阿贝折

5、射仪分别测定各瓶糖液的浓度。糖液原来的浓度为C1，浸过植物组织后的糖液浓度为C2。则植物组织中的自由水百分含量可由下式算出： C1 C2 (W4 W2) C2 植物中自由水的含量 100% W2 W1 根据上式同样可求三个不同的测定值，并进一步求出其平均值。温度温度2020时折光系数测定糖液中含糖量的百分数时折光系数测定糖液中含糖量的百分数折光系数20糖折光系数20糖折光系数20糖折光系数20糖1.333001.34609.01.360418.01.375727.01.33370.51.34689.51.361218.51.370027.51.33441.01.347510.01.362019

6、.01.377428.01.33511.51.348310.51.362919.51.378328.51.33582.01.349111.01.363720.01.379229.01.33652.51.349911.51.364520.51.380129.51.33723.01.350712.01.365421.01.381030.01.33793.51.351512.51.366221.51.381930.51.33864.01.352213.01.367122.01.382831.01.33934.51.353013.51.367922.51.383831.51.34005.01.353814.01.368723.01.384732.01.34085.51.354614.51.369623.51.385632.51.34156.01.355415.01.370424.01.386533.01.34236.51.356215.51.371324.51.387433.51.34307.01.357116.01.372125.01.388434.01.34387.51.357916.51.373025.51.389334.51.34458.01.358