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文档简介
1、会计学1生物化学生物化学-第第8章章-酶学通论酶学通论活化能在一定温度下1 摩尔底物全部进入活化 状态所需的自由能,单 位为kj/mol。非酶催化反应非酶催化反应过渡态过渡态酶催化反应酶催化反应底物底物产物产物转换数(TN)或催化常数(Kcat)表示酶的最大最大催化效率Kcat是一定条件下(SKm)每秒钟每个酶分子转换底物的分子数(数值上Kcat =K3) 4231KKEPKESKSEP 322 表8-2 一些酶的最大转换数(4)、)、 活性可调节活性可调节别构调节、酶的共价修饰、酶的合成、活化与降解等。 ribozyme核酶核酶(具有催化功能的(具有催化功能的RNA)(1)80年代初,Tho
2、mas Cech和Sidney Altman四膜虫L19RNA具有生物催化功能,催化rRNA前体的剪接 (2)1983年 Atman和Pace E.Coli RNase P中的RNA具有加工tRNA前体的催化功能P324 表8-4 金属离子作为一些酶的辅助因子P325 表8-5 基团转移反应中的辅酶和辅基。乙醇脱氢酶EC1.1.1.1 ,乳酸脱氢酶EC1.1.1.27 , 苹果酸脱氢酶EC1.1.1.37 第一个数字表示大类: 氧化还原第二个数字表示反应基团:醇基第三个数字表示电子受体:NAD+或NADP+第四个数字表示此酶底物:乙醇,乳酸,苹果酸。 P327 表8-9 酶的国际系统分类氧、转
3、、水、裂、异、合氧化还原酶类氧化还原酶类转移酶类转移酶类水解酶类水解酶类裂合酶类裂合酶类异构酶类异构酶类连接酶类(也叫:合成酶)连接酶类(也叫:合成酶)(四)六大酶类的特征和举例L-酪氨酸:tRNA连接酶(酪氨酰tRNA合成酶)T4DNA 连接酶sucroseV零级反应enzymeV一级反应(二)酶的分离和纯化 大多数酶是蛋白质,因此酶的分离提纯方法,也就是常用来分离提纯蛋白质的方法。酶的提纯把酶制剂从很大体积浓缩到比较小的体积把酶制剂中大量的杂质蛋白和其他大分子物质分离出去判断分离提纯方法的优劣,两个指标来衡量总活力的回收表示提纯过程中酶的损失情况比活力提高的倍数表示提纯方法的有效程度酶分离和纯化中应注意的几点:(1)选材酶含量丰富的新鲜生物材料 获得材料后立即开始,否则应低温保存(2)破碎(3)抽提低温下,以水或低盐缓冲液,抽提(4)分离及纯化操作条件要温和,05下进行第一步总活力每一步比活力第一
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