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文档简介

1、会计学1淋巴细胞标志检测淋巴细胞标志检测人外周血人外周血(peripheral blood )(peripheral blood )白细胞分离白细胞分离人外周血单个核细胞人外周血单个核细胞（peripheral blood peripheral blood mononuclear cellsmononuclear cells，PBMCPBMC）的分离的分离加入对倍稀释的血液样本加入对倍稀释的血液样本 水平式离心水平式离心20min时结果时结果(1.0770.001g/L)l 分离人外周血淋巴细胞以密度为分离人外周血淋巴细胞以密度为1.0770.001/g/LPercollPercoll混悬液混

2、悬液( (处理过的硅胶颗粒处理过的硅胶颗粒) )原液密度原液密度(density)(density)为为1.135g/L+1.135g/L+等量等量PBS, PBS, 高速离心高速离心 (centrifugation)(centrifugation)由下而上的逐减的连续密度梯度由下而上的逐减的连续密度梯度(density gradient)(density gradient)淋巴细胞纯度淋巴细胞纯度98%, 98%, 单核细胞纯度单核细胞纯度78%78%流程长流程长, , 步骤繁步骤繁, , 成本高成本高人外周血淋巴细胞人外周血淋巴细胞(亚群亚群)的分纯的分纯(purificcation)(p

3、urificcation)磁性微珠磁性微珠磁性微珠是以金属离子为核心，外层均匀包磁性微珠是以金属离子为核心，外层均匀包裹高分子聚合体的固相颗粒。裹高分子聚合体的固相颗粒。磁性微珠上既可标记针对某种细胞表面抗原磁性微珠上既可标记针对某种细胞表面抗原的特异性抗体（直接法）的特异性抗体（直接法）; 也可标记羊抗也可标记羊抗鼠鼠IgG抗体抗体(间接法），使分离细胞的范围间接法），使分离细胞的范围大大扩大大大扩大荧光激活细胞分离仪原理荧光激活细胞分离仪原理(principle)(principle)（fluorescence activated cell sorterfluorescence activ

4、ated cell sorter，FACSFACS）Intradermal injectionIntradermal injectionImmediate Immediate (within 20 (within 20 min)min)Late Late (at 4-12 (at 4-12 hours)hours)Delayed Delayed (24-48 (24-48 hours)hours)Chemotactic index Chemotactic index (CI) = (CI) = 趋化移动距离趋化移动距离(A)/(A)/自发移动距离自发移动距离(B)(B)趋化指数与细胞的定趋化指数与细胞的定向移动能力呈正相关向移动能力呈正相关 (琼脂糖凝胶平板法琼

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