细菌cfu统计方法

1、细菌cfu统计方法  中国分类号：S816.17  文献标识码：B 文章编号：10040084（2002）10-28-02       CFU即为菌落形成单位，是平板计数法的常用单位。微生物平板计数的通常方法为每个样品用3个稀释度，每个稀释度常做3个重复，但如何对平板菌落进行正确计数、3个稀释度以哪一个稀释度进行计数以及微生物检测允许误差等问题，在饲料标准中并未有所规定，而这些问题与CFU统计值的准确性是密切相关的。       cfu代表“colony

2、forming units”。cfu/mL指的是每毫升样品中含有的细菌群落总数。1  菌落统计方法11  平板选择细菌常选取菌落数在30300之间的平板作为菌落计数标准。每一稀释度采用两个平板菌落的平均数，如两个平板其中一个有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长平板作为该稀释度的菌落数，如片状菌落不到平板的一半，而另一半菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全板菌落数。12  计数方法    作平板菌落计数时，一般无用肉眼观察，用钢笔或蜡笔在平板上进行点数，必要时可借助于放大镜检查有无遗漏的微小菌落。在计数出各

3、平板菌落数后，求出同一稀释度菌落的平均数。表1  平板上菌落数对应的标准差平板上菌落数(个/皿)30x5051             x99100x300标准差(±)10.020.050.0    如三个重复分别为43、32、46，则平均值为403，（x-x）2分别为72.9、6889、32.49，± 737，写成±74（一）。将检验所得的标准差作修约处理，与标准规定的允许误差作比较，只要越出规定的极限数

4、值都判定为不符合标准要求，示例见表2。表2  菌数的测定误差与判定示例稀释平板菌落数(个/皿)检测中允许的误差(n-1)平板菌落数测定值(个/皿)是否符合要求重复1重复2重复3平均值标准差(n-1)30 x50 ±10.042614750.0±0.0(-)符合40605050.0±10.0符合40605150.3±0.0(+)不符37635050.0±13.0不符51x99  ±20.061868276.3±3.4(+)符合57554953.7±4.2(-)符合906310285.0±

5、0.0(-)符合915910585.0±3.6(-)不符100x300 ±50.010895123108.7±4.0(+)符合298206286263.3±0.0(+)不符297206287263.3±0.0(-)符合300174286253.3±9.1(-)不符3   菌落计数    应选择平均菌落数在30300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告；如有两个稀释度，其生长的菌落数均在30300之间，视两稀释液测定值之比来决定，如其比值小于2，应报告其平均数；如大于2，则报告其中较小的数字；

6、如所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告；如所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告；如所有稀释度均无菌落生长，则以小于乘以最低稀释倍数报告；如所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告。4  结果报告    菌落在100以内时，按其实有数报告；大于100时，采用两位有效数字，在两位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。如表3。表3  不同稀释倍数下计算菌落总数的方法示例10-110-210-3两稀释液细菌总数(个/g报告方式(个/g或个m/L)测值之比或个m/L)11365164201640016000或1.6×1022760295461.63775038000或3.8×10432890271602.22710027000或2.7×1044不可计46505135130005