酸乳中酵母菌的测定_第1页
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文档简介

1、2022-5-312022-5-32一、仪器、材料、培养基、试剂一、仪器、材料、培养基、试剂冰箱:25 恒温培养箱: 281均质器 恒温振荡器显微镜:10100 电子天平:感量0.1g无菌锥形瓶:容量500mL、250mL无菌广口瓶:500mL 无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)和10mL(具0.1mL刻度)无菌平皿:直径90 mm无菌试管: 10 mm75 mm无菌牛皮纸袋塑料袋马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基孟加拉红培养基。2022-5-33二、操作步骤二、操作步骤1. 样品的稀释 以无菌吸管吸取25mL样品至盛有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶(可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,

2、制成1:10的样品匀液。取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中, 另换一支1mL无菌吸管反复吹吸,此液为1:100稀释液。制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1mL无菌吸管。2022-5-34二、操作步骤二、操作步骤根据对样品污染状况的估计,选择2个3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释的同时,每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1mL样品稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。及时将15mL20mL冷却至46的马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基(可放置于461恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。2022-5-35二、操作步骤二、操作步骤2培养待琼脂凝固后,将平板倒置,281培养5d,观察并记录。3菌落计数肉眼观察,必要时可用放大镜,记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落形成单位(CFU)表示。选取菌落数在10 CFU150 CFU的平板,根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。2022-5-36二、操作步骤二、操作步骤4.结果与

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