酶联免疫法检测粮论文：浅谈酶联免疫法检测粮食中的呕吐毒素

1、论文发表专家95餌中国学术论颊.59168,net酶联免疫法检测粮论文：浅谈酶联免疫法检测粮食中的呕吐毒糸摘要：粮食中的呕吐毒素don属于剧毒或中等毒物，研究表明，don在体内可能有一定的蓄积，但无特殊的靶器官，具有很强的细胞毒性。因此，对于粮食中呕吐毒素含量的检测是相当重要的。检测方法主要包括气相色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法、红外光谱分析、金标试纸法、荧光极荧光极性免疫分析性免疫分析以及酶联免疫法等。基于此，本文对酶联免疫法检测粮食中的呕吐毒素进行了较为系统的分析。关键字：呕吐毒素；粮食；酶联免疫法1.前言呕吐毒素（vomitoxin）是近年来逐步引起人们重视的一种真菌毒素，其分布广，

2、危害普遍，特别是伴随着谷物的生长过程而产生，不易预防。呕吐毒素化学名称为脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deox）nivalenol，don），属于单端孢霉烯族化合物，主要由某些镰刀菌产生（女口fgraminearum，fculmorum等），因其能引起动物呕吐，故又称呕吐毒素（vomitoxin）1。don广泛存在于全球，主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物，也污染粮食制品，人和动物在误食被该毒素污染的粮谷类后可以产生广泛的毒性效应。另外，它还常与其它的论文发表专家一中国学木论文网霉卤毒素如黄曲霉毒素共同污染农作物，进入人体后可以相互影响。don属于剧毒或中等毒物，研究表明，don在体内可能有一定的蓄积，

3、但无特殊的靶器官，具有很强的细胞毒性。人畜摄入了被don污染的食物/饲料后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状，严重时损害造血系统造成死亡。研究表明，don可能对免疫系统有影响，有明显胚胎毒性和一定致畸作用，可能有遗传毒性，但无致癌、致突变作用。由于don的危害严重，引起了各国的普遍重视。谷物及饲料中don的含量有严格的限量标准。我国谷物中don的限量标准为1.0mg/kg2。所以对食品当中呕吐毒素含量的检测是相当重要的。目前用于检测呕吐毒素的方法有很多，主要是要根据实验室的实际情况来选择测定方法。包括：气相色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法、红外光谱分析、金标试纸

4、法、荧光极荧光极性免疫分析性免疫分析以及酶联免疫法等。2.实验酶联免疫法（elisa法）即酶联免疫吸附剂测定法的简称。其原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶联结成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度3。论文发表专素一中国学木论文网vww.59168,netelisa测定法一般有三种竞争分析模式：包被特异性抗体直接竞争法、包被抗原直接竞争以及间接竞争法（也称为抑制性测定法）。间接竞争elisa法的基本步骤是：包被完全抗原同时加入已知抗体和待测抗原加入酶标二抗加入底物显色液2.1试剂与设备呕吐毒素elesa快速检测试剂盒来自南昌博恒生物制品有限公司。实验设备包括mk3酶标仪、粉碎机、分析天平、振荡器以及恒温培养箱。2.2测定过程4221样品处理假设测定的是玉米中的呕吐毒素，则应该首先准确称取5克粉碎均匀的玉米样至三角瓶中，加入25ml10%甲醇水（配比度为1+9）提取液，然后震荡10min，以定性滤纸快速过滤，收集滤液，最后取适当的滤液进行检测。2.2.2抗原抗体反应选择数孔don-bsa板条，加入501卩l的don系列标准溶液和处理好