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文档简介

1、一、果酒制作一、果酒制作1 1、酵母菌:真菌、出芽生殖、兼性厌氧、酵母菌:真菌、出芽生殖、兼性厌氧、2020度度3 3、流程:选果、流程:选果冲洗冲洗榨汁榨汁发酵发酵酒精酒精2 2、原理:、原理:C6H12O62C2H5OH+2CO2+2ATPC6H12O62C2H5OH+2CO2+2ATP4 4、检验:酸性条件酒精遇重铬酸钾呈灰绿色、检验:酸性条件酒精遇重铬酸钾呈灰绿色例:有酿制葡萄酒的两个简易装置,请分析答复例:有酿制葡萄酒的两个简易装置,请分析答复1果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌在有氧无氧果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌在有氧无氧条件下都能生存,所以,它属于条件下都能生存,所以,它属于_微

2、生物。微生物。2在葡萄酒的自然发酵过程中,酵母菌的来源在葡萄酒的自然发酵过程中,酵母菌的来源是是 。3制作果酒,需将温度严格控制在制作果酒,需将温度严格控制在_。制。制作果酒后制果醋,应将温度控制在作果酒后制果醋,应将温度控制在_。 4葡萄汁装入发酵瓶时,要留有大约葡萄汁装入发酵瓶时,要留有大约1/3的空的空间,这是因为间,这是因为_。既为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气,又防止发酵旺盛时汁液溢出既为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气,又防止发酵旺盛时汁液溢出兼性厌氧型兼性厌氧型附着在葡萄皮上的野生型酵母菌附着在葡萄皮上的野生型酵母菌 182530355甲装置中,甲装置中,A液体是液体是_,NaHCO3

3、溶液的作用溶液的作用是是 ;葡萄汁葡萄汁假设用乙装置,在发酵过程中,必须进行的操作假设用乙装置,在发酵过程中,必须进行的操作是是 。与乙装置相。与乙装置相比,甲装置的优点是比,甲装置的优点是 。6果汁发酵后是否有酒精产生,可用果汁发酵后是否有酒精产生,可用 来检来检验。在酸性条件下,该试剂与酒精反响呈现验。在酸性条件下,该试剂与酒精反响呈现 。在果酒酿造过程中,如果果汁灭菌不严格,含有醋在果酒酿造过程中,如果果汁灭菌不严格,含有醋酸杆菌酸杆菌 ,在酒精发酵旺盛时,醋酸杆菌能否将果汁,在酒精发酵旺盛时,醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸中的糖发酵为醋酸? 。灰绿色灰绿色不能不能吸收酵母菌酒精发酵

4、产生的吸收酵母菌酒精发酵产生的CO2每隔每隔12小时左右一定的时间将瓶盖拧松一次小时左右一定的时间将瓶盖拧松一次既能及时吸收发酵产生的既能及时吸收发酵产生的CO2,又能减少被杂菌污染的时机,又能减少被杂菌污染的时机重铬酸钾重铬酸钾二、果醋制作二、果醋制作1 1、醋酸菌:原核、分裂生殖、异养需氧、醋酸菌:原核、分裂生殖、异养需氧、3030度度3 3、流程:选果榨汁、流程:选果榨汁酒精发酵酒精发酵醋酸发酵醋酸发酵2 2、原理:、原理: 2 2C6H12O62C2H5OH+2CO2C6H12O62C2H5OH+2CO21 1C6H12O6+2O22CH3COOH+2CO2+H2OC6H12O6+2O

5、22CH3COOH+2CO2+H2OC C2 2H H5 5OH+OOH+O2 2CHCH3 3COOH+HCOOH+H2 2O O三、腐乳制作三、腐乳制作1 1、毛霉:真菌、孢子生殖、异养需氧、毛霉:真菌、孢子生殖、异养需氧、1818度度3 3、流程:、流程:豆腐长毛豆腐长毛加盐腌制加盐腌制瓶装卤汤瓶装卤汤密封腌制密封腌制 2 2、原理:毛霉的、原理:毛霉的蛋白酶蛋白酶、脂肪酶脂肪酶分解豆腐分解豆腐 小分子肽、氨基酸小分子肽、氨基酸、甘油、脂肪酸甘油、脂肪酸4 4、盐与酒精:抑制微生物生长、盐与酒精:抑制微生物生长 1 1腐乳制作有多种微生物参与,其中起主要腐乳制作有多种微生物参与,其中起主

6、要作用的是。作用的是。 2 2豆腐发酵主要利用了微生物产生的,通豆腐发酵主要利用了微生物产生的,通过发酵,豆腐中营养物质的种类,且更易于消化和过发酵,豆腐中营养物质的种类,且更易于消化和吸收。吸收。 3 3在腐乳制作过程中,抑制微生物的物质有在腐乳制作过程中,抑制微生物的物质有盐、盐、 、等。、等。 4 4含水量为左右的豆腐适于制作腐乳,假含水量为左右的豆腐适于制作腐乳,假设你完成了腐乳制作,可以从等方面评价乳腐的质设你完成了腐乳制作,可以从等方面评价乳腐的质量。量。毛霉毛霉 蛋白酶等酶类蛋白酶等酶类 增多增多 酒酒 香辛料香辛料 7070 色泽、口味、块形等色泽、口味、块形等实例:就腐乳制作

7、答复以下问题:实例:就腐乳制作答复以下问题:四、泡菜制作四、泡菜制作1 1、乳酸菌:原核、分裂生殖、异养厌氧、乳酸菌:原核、分裂生殖、异养厌氧3 3、流程:菜叶、盐水、装坛、密闭、流程:菜叶、盐水、装坛、密闭2 2、原理:、原理:C C6 6H H1212O O6 62C2C3 3H H6 6O O3 3+2ATP+2ATP4 4、测定亚硝酸盐:、测定亚硝酸盐:NONO2 2- -+ +对氨基苯磺酸对氨基苯磺酸玫瑰红玫瑰红专题专题2:微生物的培养与应用:微生物的培养与应用如下图的接种方法为如下图的接种方法为 ,在此接种过程中接种环在火焰上灼烧在此接种过程中接种环在火焰上灼烧 次。次。一、培养基

8、:一、培养基:3 3、种类:液体培养基、固体培养基琼脂、种类:液体培养基、固体培养基琼脂4 4、选择培养基:、选择培养基: 青霉素培养基:杀细菌、留真菌青霉素培养基:杀细菌、留真菌1 1、概念:微生物生长的营养物质、概念:微生物生长的营养物质2 2、成分:水、无机盐、碳源、氮源、成分:水、无机盐、碳源、氮源二、无菌技术二、无菌技术1 1、消毒:温和方法杀死外表局部有害微生物、消毒:温和方法杀死外表局部有害微生物巴氏消毒、煮沸、药剂、如:巴氏消毒、煮沸、药剂、如:75%75%酒精、酒精、紫外线紫外线2 2、灭菌:强烈方法杀死一切微生物、孢子和芽孢、灭菌:强烈方法杀死一切微生物、孢子和芽孢 1 1

9、灼烧灭菌:接种环、试管口灼烧灭菌:接种环、试管口 2 2干热灭菌:玻璃器皿、金属用具干热灭菌:玻璃器皿、金属用具 3 3高压蒸气灭菌:培养基、无菌水高压蒸气灭菌:培养基、无菌水三、微生物培养技术三、微生物培养技术1 1、步骤:、步骤:1 1配制培养基配制培养基2 2灭菌:高压蒸气灭菌灭菌:高压蒸气灭菌3 3倒平板:把培养基分装培养皿倒平板:把培养基分装培养皿4 4接种:分散菌种、形成菌落接种:分散菌种、形成菌落 方法:平板划线法、稀释涂布平板法方法:平板划线法、稀释涂布平板法 2 2、应用:、应用:(1)(1)土壤中分解尿素的细菌的别离和计数土壤中分解尿素的细菌的别离和计数 1 1选择培养基:

10、氮源选择培养基:氮源-尿素尿素 2 2步骤:土壤溶液步骤:土壤溶液稀释稀释 接种接种菌落计菌落计数数 2 2土壤中分解纤维素的微生物的别离土壤中分解纤维素的微生物的别离 1 1选择培养基:碳源选择培养基:碳源-纤维素纤维素 2 2原理:纤维素原理:纤维素 纤维二糖纤维二糖 葡葡萄糖萄糖 C1 C1酶、酶、CXCX酶酶 葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶 纤维素纤维素+ +刚果红刚果红红色物红色物纤分解纤分解透明圈透明圈 4 4转为固体培养基时,常转为固体培养基时,常 的方法接种的方法接种. .5 5以下材料或用具:培养细菌用的培养基与培养皿,玻棒、试管、锥以下材料或用具:培养细菌用的培养基与培养皿,玻棒、试

11、管、锥形瓶和吸管,实验操作者的双手。其中需形瓶和吸管,实验操作者的双手。其中需要灭菌的是:要灭菌的是: ;需要消毒的是:;需要消毒的是: 。填序号。填序号6 6在进行别离分解尿素的细菌实验时,在进行别离分解尿素的细菌实验时,A A同学从培养基上筛选出大约同学从培养基上筛选出大约150150个个菌落,而其他同学只选择出大约菌落,而其他同学只选择出大约5050个菌落。个菌落。A A同学的实验结果产生的原因可能同学的实验结果产生的原因可能有有 填序号填序号由于土样不同由于土样不同 由于培养基污染由于培养基污染 由于操作失误由于操作失误 没有设置对照没有设置对照7 7实验结束后,使用过的培养基应该进行

12、实验结束后,使用过的培养基应该进行 处理后,才能倒掉。处理后,才能倒掉。1右表所示的培养基不能用于植物组织培养的右表所示的培养基不能用于植物组织培养的理由是理由是 。2培养基中参加尿素的目的是筛选培养基中参加尿素的目的是筛选 。 3“目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的培养基中的 和和 ,实验需要振荡培,实验需要振荡培养,原因是养,原因是 。缺少植物激素缺少植物激素 目的菌目的菌尿素尿素葡萄糖葡萄糖为目的菌提供氧气为目的菌提供氧气 稀释涂布平板法或平板划线法稀释涂布平板法或平板划线法和和 灭菌灭菌 实例:分解尿素的细菌的别离与计数实例:分解尿素的细菌的

13、别离与计数一、菊花组织的培养一、菊花组织的培养1 1、原理:植物细胞的全能性、原理:植物细胞的全能性2 2、步骤:、步骤:1 1制备制备MSMS固体培养基灭菌固体培养基灭菌 无机盐、维生素、蔗糖、激无机盐、维生素、蔗糖、激素素 2 2外植体消毒未开花新生侧外植体消毒未开花新生侧枝枝 3 3接种、培养、移栽接种、培养、移栽 脱分化脱分化-愈伤组织愈伤组织-再分化再分化-从芽从芽-诱导诱导生根生根 PH5.8 PH5.8、温度、温度18-2218-22、每日光照、每日光照12h12h专题专题3 植物的组织培养技术植物的组织培养技术二、月季花药培养二、月季花药培养1 1、花药选取:初花期、未开放花蕾

14、、单核期、花药选取:初花期、未开放花蕾、单核期2 2、培养过程:、培养过程: 花粉脱分化花粉脱分化愈伤组织愈伤组织 脱分化脱分化 再分化再分化 胚状体分化胚状体分化 丛芽丛芽诱导生根诱导生根3 3、花粉发育检查:、花粉发育检查:1 1醋酸洋红法细胞核红色醋酸洋红法细胞核红色2 2焙花青焙花青- -铬矾法细胞核蓝黑色铬矾法细胞核蓝黑色接种和培养接种和培养植物体植物体选取水稻花药选取水稻花药对花蕾消毒对花蕾消毒实例:就水稻花药培养的步骤,请答复以下问题:实例:就水稻花药培养的步骤,请答复以下问题: 1. 1.选取的水稻花药应为选取的水稻花药应为期期,此时细胞核由中央移向细,此时细胞核由中央移向细胞

15、一侧,花药培养成功率最高胞一侧,花药培养成功率最高 2.2.通过花药培养产生单倍体植株一般有两种途径:一种通过花药培养产生单倍体植株一般有两种途径:一种是花粉通过是花粉通过阶段阶段发育为植株,另一种是在诱导培养基上先发育为植株,另一种是在诱导培养基上先形成形成再将其诱导分化成植株再将其诱导分化成植株 3.3.试管苗形成过程中,必须从培养基中获得无机盐或矿试管苗形成过程中,必须从培养基中获得无机盐或矿质元素和小分子有机物质等营养物质要促进花粉细胞分裂质元素和小分子有机物质等营养物质要促进花粉细胞分裂和生长,培养基中应有和生长,培养基中应有和和两类激素两类激素单核胚状体愈伤组织细胞分裂素生长素单核

16、胚状体愈伤组织细胞分裂素生长素一、果胶酶在果汁生产中的应用一、果胶酶在果汁生产中的应用1 1、作用:分解细胞壁、胞间层的果胶,形成半乳糖醛酸、作用:分解细胞壁、胞间层的果胶,形成半乳糖醛酸2 2、种类:、种类:多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶3 3、水果泥、水果泥+ +果胶酶果胶酶保温混合保温混合过滤记录果汁量过滤记录果汁量二、加酶洗衣粉的洗涤效果二、加酶洗衣粉的洗涤效果1 1、种类:碱性蛋白酶、碱性脂肪酶、淀粉酶、纤维、种类:碱性蛋白酶、碱性脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶素酶2 2、作用:分解污渍蛋白质、脂肪、淀粉、纤维素、作用:分解污渍蛋白质、脂肪、淀

17、粉、纤维素3 3、酶制剂:用特殊化学物质包裹酶,使之耐酸碱、酶制剂:用特殊化学物质包裹酶,使之耐酸碱、耐高耐高 温、忍受外表活性剂温、忍受外表活性剂专题专题4:酶的应用:酶的应用三、固定化酶三、固定化酶1 1、原理:把酶固定在不溶水的载体上,、原理:把酶固定在不溶水的载体上,易于催化回收、重复使用易于催化回收、重复使用2 2、高果糖浆生产:、高果糖浆生产:1 1原理:葡萄糖原理:葡萄糖果糖葡萄糖异构果糖葡萄糖异构酶酶2 2固定化酶:酶固定在载体上、装入固定化酶:酶固定在载体上、装入反响柱反响柱3 3生产过程:上端注入葡萄糖,柱内生产过程:上端注入葡萄糖,柱内酶催化,下端生产果糖浆酶催化,下端生

18、产果糖浆固定化酶和固定化细胞固定化酶和固定化细胞是利用理化方是利用理化方法,把酶或细胞固定在一定空间内发法,把酶或细胞固定在一定空间内发挥作用的技术。挥作用的技术。四、固定化细胞四、固定化细胞2 2、方法:、方法:1 1包埋法:包埋在多孔载体里包埋法:包埋在多孔载体里2 2化学结合法:结合到载体上化学结合法:结合到载体上3 3物理吸附法:吸附到载体外表物理吸附法:吸附到载体外表1、概念:、概念: 3 3、固定化酵母细胞、固定化酵母细胞1 1酵母细胞活化:酵母细胞活化:1g1g干酵母干酵母10ml10ml水水2 2配制配制CaCl2CaCl2溶液:溶液:0.05M0.05M3 3配海藻酸钠溶液:

19、配海藻酸钠溶液:0.7g0.7g海藻酸钠海藻酸钠10ml10ml水水4 4海液与酵母细胞混合成海液与酵母细胞混合成A A液吸入注射器液吸入注射器5 5固定化酵母细胞:把固定化酵母细胞:把A A液滴入液滴入CaCl2CaCl2形成形成凝胶珠凝胶珠6 6冲洗凝胶珠蒸馏水冲洗凝胶珠蒸馏水7 7酒精发酵:凝胶珠酒精发酵:凝胶珠+ +葡萄糖液葡萄糖液酒精酒精2525度度专题专题5 DNA和蛋白质技术和蛋白质技术 DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定一、实验原理一、实验原理 1.1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得

20、到含有胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。的溶液。2.2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。的变化而改变的。DNA在在物质的量浓度为物质的量浓度为0.14 molL的氯化钠溶液中的溶解度最低,的氯化钠溶液中的溶解度最低,利用这一原理,可以使利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的溶解在氯化钠溶液中的DNA析出析出。 3.DNA3.DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质那么可以溶不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质那么可以溶于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂

21、质较少的的DNADNA。 4.DNA4.DNA遇二苯胺沸水浴会变成蓝色,因此,二苯胺可遇二苯胺沸水浴会变成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定以作为鉴定DNADNA的试剂。的试剂。 二、二、PCRPCR技术技术1 1、反响体系:、反响体系:1 1模板、原料、酶、模板、原料、酶、ATPATP、缓冲液、缓冲液 2 2耐高温的耐高温的DNADNA聚合酶聚合酶TaqTaq酶酶3 3引物:一小段引物:一小段DNADNA或或RNARNA2 2、过程:、过程:1 1变性:变性:95DNA95DNA解旋解旋2 2复性:复性:5555引物与模板配对引物与模板配对3 3延伸:延伸:7272合成子链合成子链例:例:PCR

22、PCR技术技术( (多聚酶链式反响多聚酶链式反响) ) 在在DNADNA半保存复制的前提下,半保存复制的前提下,利用热变性原理,在试管中进行利用热变性原理,在试管中进行DNADNA的人工复制。很短的时的人工复制。很短的时间内,将间内,将DNADNA大量扩增,使实验室所需要的遗传物质不再受大量扩增,使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。限于活的生物体。(1)PCR(1)PCR每次循环可分为每次循环可分为 、 、 三个步骤。三个步骤。(2)(2)当温度降低时,引物与模板当温度降低时,引物与模板 端结合,在端结合,在DNADNA聚合酶聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两的作用下,引物沿

23、模板延伸,最终合成两DNADNA分子,此过程分子,此过程中原料是中原料是 ,遵循的原那么是,遵循的原那么是 。(3)PCR(3)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、技术的必要条件,除了模板、原料、ATPATP、酶外以至、酶外以至少还需要三个条件,即:液体环境、适宜的少还需要三个条件,即:液体环境、适宜的 、 ,前者由前者由PCRPCR仪自动调控,后者那么靠仪自动调控,后者那么靠 维持。维持。(4)DNA(4)DNA的复制需要引物,其主要原因的复制需要引物,其主要原因是是 。变性复性延伸3碱基互补配对原那么碱基互补配对原那么 四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸温度温度酸碱度酸碱度缓冲液缓冲液DNA聚

24、合酶只能从聚合酶只能从3端延伸端延伸DNA链链三、血红蛋白的提取和别离三、血红蛋白的提取和别离1 1、提取:、提取: 1 1红细胞的洗涤:生理盐水红细胞的洗涤:生理盐水-除杂蛋除杂蛋白白 2 2血红蛋白的释放:蒸馏水血红蛋白的释放:蒸馏水-40%-40%甲苯甲苯 3 3别离血红蛋白溶液:离心分层别离血红蛋白溶液:离心分层 第第3 3层红色透明层红色透明液体液体 4 4透析:磷酸缓冲液除杂离子小分透析:磷酸缓冲液除杂离子小分子子 维持血红蛋白正常特性维持血红蛋白正常特性2 2、别离:、别离:1 1凝胶色谱法凝胶色谱法原理:根据分子量大小别离蛋白质原理:根据分子量大小别离蛋白质 不同蛋白质通过多孔

25、凝胶通道时:不同蛋白质通过多孔凝胶通道时: 大分子路程短、流动快大分子路程短、流动快先收集先收集 小分子路程长、流动慢小分子路程长、流动慢后收集后收集 2 2电泳法电泳法 原理:根据带电性质、分子大小形状不同,电原理:根据带电性质、分子大小形状不同,电 场下迁移速度不同,别离蛋白质场下迁移速度不同,别离蛋白质 电荷性质电荷性质- -移动方向、电荷量移动方向、电荷量- -移动速度移动速度 分子大小分子大小- -阻力大小阻力大小(4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体 填填“相相同或同或“不同不同)洗脱时洗脱时对洗脱液的流速要求是对洗脱液的流速要求是(3)装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因是是 。(2)自己制作凝胶色谱柱时。在色谱柱底部自己制作凝胶色谱柱时。在色谱柱底部d位位置相当于多孔板的结构可由置相当于多孔板的结构可由 替代。替代。a相对分子质量较大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快尼龙网和尼龙纱气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低别离效果相同保持稳定实例:凝胶色谱技术,据图答复以下问题:实例:凝胶色谱技术,据图答复以下问题:(1)a、b均为蛋白质分子,其中先

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