高中生物选修一课件：分解纤维素的微生物的分离

1、1教学目标:1、知道纤维素酶的种类及作用2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维 素的微生物的实验方法3一、纤维素与纤维素酶4纤维素：棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物；纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植物每年产生的纤维素超过70亿吨；分布植物的根、茎、叶中；5纤维素酶6纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素一、基础知识7在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；思考1实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？滤纸崩溃法8二、纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法_。该方法可以通过_反应直接筛选。刚果红染色法颜色2、其原理是：刚果红可以与纤维素形成_，当纤维素被_分解

2、后，红色复合物无法形成，出现以_为中心的_，可以通过_ 来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌 透明圈是否产生透明圈9可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌10(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落什么样的环境取样? 培养的目的? 选择培养基的特点?挑选什么样的菌落?鉴别培养基的特点?如何鉴别?根据：微生物对生存环境的要求，到相应环境中去找；目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物；刚果红染色法11挑选产生透明圈的菌落 挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C 3

3、70C培养，可获得纯培养。121、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，原因是_【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”，回答以下几问题：液体没有添加琼脂2、该培养基对微生物_（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是_ 具有 以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖；13若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将_改为_。3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？葡萄糖纤维素粉提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。1415思考：本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异

4、同？ 课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。 16培养基组成提供的主要营养物质CMC-Na 510g碳源酵母膏 1g碳源、氮源、生长因子KH2PO4 0.25g无机盐土豆汁 100mL碳源、生长因子琼脂 15g凝固剂上述物质溶解后，加蒸馏水定容至1000mL氢元素、氧元素鉴别纤维素分解菌的培养基(水溶性羧甲基纤维素钠)17【资料三】刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红18染色法优点缺点方法一 方法二 颜

5、色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便，不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。思考：这两种方法各有哪些优点与不足19 1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落 对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。 如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。 20 为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有_ 发酵和_ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_ 含量进行定量测定。发酵产纤维素酶 液体 固体 五、

6、课题延伸21分解纤维素的微生物的分离纤维素酶种类、作用、催化刚果红染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含纤维素土壤增大分解菌含量染色鉴别分离出分解菌课堂总结22练一练：练一练：1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖232.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. 若培养基上产生了透

7、明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌243. 微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是()A.C1酶和Cx酶 B.C1酶和葡萄糖苷酶C.Cx酶和葡萄糖苷酶 D.C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶4.纤维素酶可以将下列哪种物质分解()A.牛肉片 B.鱼片 C.滤纸条 D.塑料条25(2014全国：生物技术实践（15分）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 _分解成 _。（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。 纤维二糖葡萄糖红透明圈26（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）： 注：“+”表示有，“-”表示无。据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”