华中科技大学02-17生化与分子考研真习题及答案_第1页
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文档简介

1、华中科技大学2002年硕士研究生入学考试试题一、选择题1.膜蛋白的功能不包括(D)A.作为信号受体 B.作为离子通道 C.作为酶 D.储藏能量2.蛋白聚糖中的糖包括(C)A.肽聚糖 B.几丁质 C.透明质酸 D.葡聚糖3.蛋白质中提供糖基化位点的侧链来自下列哪一种氨基酸残基(C)A.甘氨酸 B.天冬氨酸 C.丝氨酸 D.色氨酸4.鞘氨醇不是下列什么物质的组成成分(B)A.神经酰胺 B.磷脂酰乙醇胺 C.神经节苷脂5.在pH7 条件下电泳, 下列什么物质会向阴极移动(B)A.糖胺聚糖 B.磷脂酰胆碱 C.多聚谷氨酸 D.多聚腺苷酸6.动植物来源的脂肪酸多是(D)A.奇数脂肪酸 B.20C-30C

2、之间 C.反式脂肪酸 D.偶数脂肪酸7.下列哪一种试剂可以用于标记蛋白质的N端(B)A.甲醛 B.丹磺酰氯 C.二异苯基磷酸P385 D.TPCK P3688.属于同一蛋白质家族成员, 其氨基酸序列中的哪些氨基酸出现差异可能性最小(A)A.形成功能部位(活性部位)的氨基酸B.和底物专一性或配基专一性有关的氨基酸C.与种属来源有关的氨基酸9.认为肽键是平面结构的重要依据是(D)A.肽键的键长0.132nm,等于碳碳双键之长B.肽键的键长0.132nm,等于碳氮双键之长C.肽键的键长0.132nm,介于碳碳双键和碳碳单键之间D.肽键的键长0.132nm,介于碳氮双键和碳氮单键之间10.不属于还原糖

3、的糖有(A)A.蔗糖 B.麦芽糖 C.葡萄糖 D.乳糖11.提取细菌膜蛋白时使用去污剂(表面活性剂)的作用是(B)A.破坏二硫键 B.破坏疏水作用,使非极性基团暴露于水中C.破坏离子键 D.去掉细胞壁12.以下结合蛋白质多肽链与非肽链部分不以共价键相连的是(A)A.脂蛋白 B.胶原蛋白,一种糖蛋白 C.琥珀酸脱氢酶,一种含有FAD的黄素蛋白13.蛋白质不具有下述哪种功能(F)A.提供能量 B.运输 C.防御 D.加速化学反应 E.调节 F.储存遗传信息14.下列哪种肽段易于形成 -螺旋(C)A.多聚甘氨酸 B.多聚脯氨酸 C.多聚(丙氨酸-缬氨酸)15.如果胰蛋白酶不能消化某种蛋白质,说明该蛋

4、白质在组成上不含(C)A.甘氨酸 B.缬氨酸 C.精氨酸 D.苯丙氨酸16.转角中肽链主链出现(C)度回折A.80 B.60 C.180 D.15017.判断 2,3-二磷酸甘油酸是血红蛋白别构调节物的证据可能是该物质(A)A.使血红蛋白的氧合曲线更加 S 型B.使血红蛋白的氧合曲线变成双曲线型C.自身与血红蛋白结合曲线为 S 型18.NAD+/NADH+H+辅酶在反应中转移的电子应表示成(C)A.H- B.H C.2H19.阳光维生素的意思是阳光的能量使动物的某种维生素原变为维生素,这种维生素原是(B)A. -胡萝卜素 B.7-脱氢胆固醇 C.视紫红质 D.色氨酸20.TPCK 抑制胰凝乳蛋

5、白酶的根本原因是(C)A.TPCK类似酶的底物B.TPCK与酶的丝氨酸残基反应,使该丝氨酸不能作为广义酸碱催化剂C.TPCK与酶的组氨酸残基反应,使该组氨酸不能作为广义酸碱催化剂D.TPCK改变了酶的一级结构21.作为典型催化剂的酶具有下列哪一种能量效应(B)A.增加活化能 B.降低活化能 C.提高产物能量水平 D.降低反应物能量水平 22.修饰碱基主要存在于下列哪种核酸中(C)A.rRNA B.mRNA C.tRNA D.核DNA E.线粒体DNA23.在溴化乙锭-氯化铯密度梯度离心时,相同分子量的 DNA,沉降最快的是(A)A.闭环DNA B.开环DNA C.双链线形DNA24.DNA的T

6、m不与什么有关(A)A.DNA的分子量 B.DNA的GC含量 C.DNA的纯度 D.缓冲液组成25.ACTH 作用肾上腺时,导致的细胞响应包括(D)A.受体获得酪氨酸激酶活性B.受体激活引起细胞膜钾离子通道改变C.G蛋白激活,抑制腺苷酸环化酶D.cAMP与钙离子浓度升高26.生物膜中最丰富的脂类是(A)A.磷脂 B.胆固醇 C.糖脂 D.三酰甘油27.Ribozyme是(B)A.蛋白质 B.核酸 C.糖 D.脂28.胰岛素与受体结合后,受体细胞质区域(D)A.具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性 B.结合G蛋白 C.激活磷脂酶 D.具有酪氨酸激酶活性29.被丝氨酸蛋白激酶作用的蛋白质将(B)A.去掉磷酸

7、丝氨酸上的磷酸基团B.从 ATP 获得一个磷酸基团,使丝氨酸磷酸化C.从 GTP 获得一个磷酸基团,使丝氨酸磷酸化D.水解ATP而获得磷酸基团30.限制性内切酶EcoR作用对象是(D)A.蛋白质 B.RNA C.单链DNA D.双链DNA二、分析题1、某同学在提取酶的过程中发现酶已经失活,一个原因是由于操作不当引起酶的变性,请问有哪些因素会引起变性还有什么因素可能引起失活如果认为酶的失活不是由于变性引起的,请提出一种推测,并设计一个实验路线予以证明。答:引起变性的因素有:强酸、强碱、重金属盐、尿素、胍、去污剂、高温射线、超声波等。抑制剂也可能引起失活。蛋白质变性是蛋白质在某些物理或化学因素的作

8、用下其特定空间构象被改变,从而导致其理化性质和生物学活性丧失甚至完全丧失。实验方法:先除可逆抑制(透析、超滤、凝胶过滤等方法),如果酶仍失活,可用以下方法:变性的蛋白更容易受蛋白水解酶的作用,可以将正常的酶和失活的酶被同一种蛋白酶水解,将水解的片段分别经过凝胶电泳,看谁的片段多,谁就是变性。如果两者差不多,那就是酶受到抑制作用。2、根据所学的知识分析有机磷农药、溴化乙锭、麻黄碱和白喉毒素对人体有毒性的原因。答:有机磷农药是强有力的丝氨酸蛋白酶抑制剂。溴化乙锭可以插入DNA中,改变DNA的结构,是强有力的模板抑制剂。麻黄碱可使中枢神经系统兴奋,神经系统过敏。白喉素可导致生物神经脱髓鞘,具有抑制蛋

9、白质合成的作用,还可引起心肌脂肪变性。三、综合题1、通过代谢网络说明处在给定的情况下的酶的改变及其产物在细胞能量代谢中最可能的变化途径。(1)肝己糖激酶,当血糖升高时;(2)大豆谷氨酸脱氢酶,当种子吸胀发芽时。答:A:当血糖升高时。己糖激酶受6-磷酸葡萄糖的别构抑制,所以其含量减少。B:种子吸胀发芽过程中需要能量,大豆谷氨酸脱氢酶作用于氨基酸脱氨基作用,释放能量,所以谷氨酸脱氢酶含量增加。2、大肠杆菌各有什么分子机制应付氨基酸缺乏或紫外线照射答:可通过SOS反应和直接修复作用。SOS反应是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下,细胞为求生存而产生的一种应急措施,包括诱导DNA损伤修复

10、,诱变效应,细胞分裂的抑制以及融源性细菌释放噬菌体等。在氨基酸缺乏时,细菌通过严紧反应来抵御不良条件,保存自己,严紧反应导致两种被称为魔斑的特殊核苷酸:鸟苷四磷酸和五磷酸的积累,鸟苷磷酸的作用是影响RNA聚合酶与启动子结合的专一性,从而为细胞内严紧控制的关键。可在大范围内做出如抑制核糖体和其他大分子合成等应急反应,活化蛋白水解酶等,以调节或开发能源,渡过难关。紫外线照射可形成环丁烷胸腺嘧啶二体及6-4光化合物,直接修复能够将形成的这两种物质还原为单体。2003年硕士研究生入学考试试题一、名词解释1.DNA double helixDNA双螺旋结构:一种核酸的构象。在该构象中,两条反向平行的多核

11、苷酸链相互缠绕形成一个右手的双螺旋结构。2.Second messenger第二信使:受细胞外信号的作用,在胞质溶胶内形成或想胞质溶胶释放的细胞内小分子。通过作用于靶酶或胞内受体,将信号传递到级联反应下游,如环腺苷酸、环鸟甘酸、钙离子、肌醇三磷酸和肌醇磷脂等。3.Active site活性中心:一般情况下,多相催化剂只有局部位置才产生活性,称作活性中心,现多称为活性部位。活性中心可以是原子、原子团、离子、表面缺陷等,形式多种多样。4.F0-F1-ATPaseATP合酶:结合于线粒体内膜、叶绿体类囊体膜和细菌质膜上由多亚基组成的复合物。在氧化磷酸化和光合磷酸化过程可催化ATP的合成。5.Glyc

12、ogencosis糖原合成:体内由葡萄糖合成糖原的过程称为糖原合成过程。主要合成场所为肝和肌肉。包括UDPG途径和三碳途径。6.Promotor启动子:基因转录起始所必须的一段DNA序列。是基因表达调控的上游顺式作用元件之一。7.Genetic code遗传密码:核苷酸序列所携带的遗传信息。编码20种氨基酸和多肽链起始及终止的一套64个三联核苷酸密码子。二、选择题1.透明质酸的酸性源自分子中的哪一种基团(A)A.COO- B.SO3 C.PO3 D.-OH2.Fuc是哪一种糖的英文缩写符号(B)A.果糖 B.岩藻糖 C.甘露糖 D.木糖3.乳糜微粒中不含有(A)A.神经节苷脂 B.胆固醇 C.

13、三酰甘油 D.蛋白质4.欲提取红细胞膜脂类,可选用下列何种试剂(D)A.磷酸盐缓冲溶液 B.乙醇 C.乙醚 D.氯仿-甲醇5.在蛋白质酸水解物中分离到一种与茚三酮反应生成黄色产物的物质,该物质是(C)A.组氨酸 B.赖氨酸 C.脯氨酸 D.天冬氨酸6.蛋白质中与CNBr作用的基团是(B)A.-COOH B.-SH C.-CO-NH- D.-NH27.什么蛋白质富含脯氨酸(C)A.丝心蛋白 B.胰岛素 C.胶原蛋白 D.酪蛋白8.血红蛋白氧解离曲线向右移是由于(D)A.降低氧气的压力 B.增加氧气的压力 C.增加pH值 D.增加CO2的压力9.Oswald Avery. Colin MacLco

14、d, and Maclyn McCarty 做出的重大发现是(B)A.发现核酸 B.DNA引起致病性转移 C.发现DNA双螺旋结构 D.碱基配对10.D2对称属于(B)A.点群对称 B.二面体对称 C.螺旋对称11.以下关于蛋白质分子内氢键的描述何者是错误的(C)A.是一种局部电荷间的相互作用 B.稳定蛋白质的二级结构C.只发生在蛋白质与水发生相互作用时 D.形成过程具有协同性12.拉氏构像图(Ramachandran Plot)中揭示的事实不包括(D)A.使肽键稳定的和只占很少百分比 B.右手螺旋和左手螺旋都有稳定的C. -折叠是稳定的 D.胶原三股螺旋处在不稳定区13.使酶分子带上亲和标记

15、的过程是(D)A.化学反应 B.表面吸附 C.可逆过程 D.非竞争性的14.核酶(Ribozymes)是一种(D)A.蛋白质 B.tRNA C.rRNA D.核蛋白体15.细胞乙酰CoA的来源不包括(D)A.丙酮酸氧化 B.脂肪酸氧化 C.氨基酸氧化 D.葡萄糖酵解16.所有生物中能集合并清除氨基的氨基酸不包括(B)A.谷氨酸 B.甘氨酸 C.天冬氨酸 D.谷氨酰胺17.直接判断细菌DNA正在复制的根据是(B)A.看到复制原点 B.看到复制叉 C.看到多核糖体 D.看到DNA聚合酶18.大肠杆菌的DNA聚合酶的功能不包括(D)A.5´3´外切酶活性 B.3´5&#

16、180;外切酶活性C.5´3´DNA聚合酶活性 D.3´5´DNA聚合酶活性19.DNA光解酶(DNA Photolyase)作用于(B)A.甲基胞嘧啶 B.胸腺嘧啶二聚体 C.8-氧鸟嘌呤 D.一段损伤区20.下列哪个反应需要鸟苷三磷酸(GTP)(C)A.核糖体上肽键的合成 B.核糖体上肽的释放C.氨基酸被氨基酰-tRNA合成酶的激活 D.多核糖体的形成21.下列哪个位点最可能含有高度重复序列(A)A.着丝粒 B.蛋白质基因 C.启动子 D.增强子22.mRNA的帽子结构在翻译中的功能是(D)A.供tRNA识别 B.延长mRNA使用寿命C.帮助mRNA

17、在核糖体上定位 D.供起始因子识别23.细菌饥饿时培养基中积累(A)A.Guanosine3,5-tetraphosphate(ppGpp) B.cAMP C.磷酸 D.ADP24.一分子丙醋酸彻底氧化为CO2和H2O净产生的ATP分子数为(C)A.18 B.12 C.15 D.325.细胞催化苹果酸转变为草酰乙酸的酶是(C)A.苹果酸酶 B.水化酶 C.苹果酸脱氢酶26.6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化反应的产物不含有(C)A.CO2 B.FADH2 C.NADPH27.能够从外周血中摄取胆固醇并送回肝脏中因而能降低血清胆固醇的脂蛋白是(B)A.乳糜微粒 B.HDL C.LDL D.VLDL28.参

18、与血液凝固的维生素是(C)A.维生素B B.维生素C C.维生素K D.维生素A29.CRP(代谢活化剂蛋白)与cAMP结合后的效应不包括(C)A.与乳糖操纵子亲和力增加 B.自身构象改变 C.与亚基结合 D.促进转录30.下面哪种氨基酸参与了嘌呤核苷酸的从头合成(D)A.丙氨酸 B.苏氨酸 C.精氨酸 D.天冬氨酸三、判断正误(对)1.结构域(domain)是三级结构中局部折叠的比较紧密的部分。(错)2.球蛋白是指具有球型形状的蛋白质。(对)3.别构活化中酶的构象应从T-R平衡转向R态。(对)4.理论上二面角和在正负180度范围。(对)5.胰凝乳蛋白酶催化肽键断裂过程中该肽键C端部分与酶共价

19、连接形成酰化酶中间体。(错)6.能障或自由能障指底物的始态与终态之间的自由能差。(对)7.肝中的糖原磷酸化酶可以催化肝糖原产生G-1-P,进入糖酵解。(对)8.一基因与其等位基因(allete)的序列相同。(对)9.定点诱变(Site-DirectedMutagenesis)是一种生物体突变发生机制。(错)10.下游指RNA的3´方向。(对)11.环己亚胺是一种很好的翻译抑制剂。(对)12.人工染色体应含有复制原点、端粒和着丝粒三个基本结构组分。(错)13.真核RNA聚合酶和原核RNA聚合酶都可以独立启动基因转录。(对)14.无义突变是指终止密码的突变。(错)15.信号肽是N端有碱性

20、氨基酸的肽。四、问答题1、在分子生物学中有哪些可转移的遗传因子被使用,它们的应用范围如何?择一例说明其如何转移外源基因,并使其复制和转录。答:有转座子、质粒、噬菌体、COS质粒。质粒:一般只能携带10kb以下的DNA片段,构建原核生物基因库,cDNA文库。噬菌体DNA:适用于构建真核生物的基因组合cDNA文库。COS质粒:容量大,可携带45kb外源DNA片段,常用构建高等生物基因组文库。质粒DNA能够将外源基因与自身基因组连接,然后转化宿主细胞的基因组并随宿主的复制而复制。2、比较真核基因组的三类结构基因(rRNA基因、tRNA基因和蛋白质基因)的基因组织特点,并分析该特点在功能上和进化上的意

21、义。答:细胞的整个基因组中只有很少一部分(2%-3%)的DNA序列用以编码蛋白质。具有大量串联重复序列。2004年硕士研究生入学考试试题一、选择题1.Fuc是(D)的英文缩写符号A.果糖 B.棕榈酸 C.唾液酸 D.盐藻糖2.以下(C)不属于葡聚糖A.淀粉 B.几丁质 C.木质素 D.纤维素3.神经节苷脂中不含有(C)A.糖 B.脂肪酸 C.甘油 D.氨基醇4.以下氨基酸或氨基酸衍生物中(D)不含有S元素A.Cys B.牛磺酸 C.辅酶A D.肌酸5.下列酶中(D)对于N端具有芳香烃侧链的肽键具有最强的专一性A.胰凝乳蛋白酶 B.羧肽酶 C.胰蛋白酶 D.胃蛋白酶6.下列名词中(C)可以描述在

22、肽链或多核苷酸链中出现一种随机的弯曲。A.cycle B.turn C.loop D.fold7.下列维生素中的(A)的辅酶形式能在代谢反应中转移HA.烟酸 B.泛酸 C.抗坏血酸 D.叶酸8.共价闭环式超螺旋的构象改变需要(A)A.至少有一个磷酸二酯键断裂 B.磷酸二酯键的两侧都断开C.组蛋白结合到DNA上 D.盐物质质量浓度超过1.0mol/L9.细胞从头合成嘌呤核苷酸的原料不包括(C)A.甘氨酸 B.天冬氨酸 C.谷氨酸 D.CO210.胆固醇生物合成不经历(A)反应A.乙酰CoA丙二酸单酰CoA B.甲瓦龙酸活性异戊二烯单位C.鲨烯羊毛固醇 D.乙酰 CoA3-羟-3-甲-戊二酰 Co

23、A(HMG)11.乳糖操纵子的体内功能性诱导物是(D)A.乳糖 B.半乳糖 C.葡萄糖 D.异构乳糖12.利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到一个地方的遗传元件叫(B)A.启动子 B.转座子 C.T-DNA D.顺反子13.(B)的密码子可作为起始密码子A.酪氨酸 B.甲硫氨酸 C.色氨酸 D.苏氨酸14.下列(A)不是顺式作用元件A.SP1转录因子 B.增强子 C.GGGCGG框 D.启动子核心序列15.Western杂交用于分析(C)A.RNA B.DNA C.蛋白质 D.ABC都是16.由于DNA是由4种碱基组成的,所以任何限制性核酸内切酶的切割频率的理论值应该是(

24、C)A.104 B.n4 C.4n D.41017.以DNA为模板,RNA聚合酶作用时,不需要(B)A.NTP B.dNTP C.ATP D.Mg2+/Mn2+18.原核DNA合成酶中(C)的主要功能是合成先导链及冈崎片段。A.DNA聚合酶 B.DNA聚合酶 C.DNA聚合酶 D.引物酶19.(B)决定tRNA上所携带的氨基酸种类。A.副密码子 B.反密码子 C.密码子 D.同义密码子20.细胞蛋白激酶根据底物蛋白质被磷酸化的氨基酸残基种类可分为3类,不包括(D)。A.组氨酸型 B.酪氨酸型 C.丝氨酸/苏氨酸型 D.天冬氨酸二、判断正误(错)1.糖胺聚糖由于含有氨基而呈碱性。(对)2.短肽的

25、旋光性等于其组成氨基酸的旋光性之和。(错)3.蛋白质的序列信息对于使用X-衍射技术与NMR技术测定蛋白质构象而言是不需要的。(错)4.可以被有机汞失活的酶其活性部位含有Ser残基。(错)5.其嘧啶碱基含量较高的DNA的Tm高于嘌呤碱基含量较高的DNA。(错)6.质膜的两层的蛋白质和糖是不对称的,但是脂类是对称的。(对)7.肾上腺素的第二信使是cAMP。(错)8.2,4-二硝基酚可以引起线粒体P/O比减少。(错)9.百米赛跑的运动员的肌肉能量来自葡萄糖的完全氧化。(错)10.肉碱分子可以独立携带脂肪酸进出线粒体。(错)11.在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性,这

26、一过程可看做是一个复性(退火)反应。(错)12.B型双螺旋DNA是左手螺旋,而Z型是局部的右手螺旋。(对)13.原核生物基因表达的调控主要发生在转录水平,真核生物基因表达调控可以发生在各个水平,但主要也是在转录水平。(错)14.Ac-Ds体系是果蝇中的转座子。(错)15.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。(错)16.NO的神经毒作用主要是破坏DNA。(错)17.烟草花叶病毒是单链多组分RNA病毒。(错)18.所有高等真核生物的启动子中都有GC区。(错)19.叶绿体的rRNA核糖体是由16S、5S、23S、5.8S组成的。( )20.抗体的基本结构是两条重链与两条轻链通过3个二硫键相互

27、连接成的Y型结构。三、名词解释1.别构效应 & 别构效应剂某种不直接涉及蛋白质活性的物质,结合于蛋白质活性部位的其他部位(别构部位),引起蛋白质分子构象的变化,而导致蛋白质活性改变的现象。可分为同促效应和异促效应两类。能影响蛋白质活性的物质称为别构效应剂。2.丝氨酸蛋白酶类一个蛋白酶家族,它们的作用是断裂大分子蛋白质中的肽键,使之成为小分子蛋白质。其激活是通过活性中心一组氨基酸残基变化实现的,它们之中一定有一个是丝氨酸。3.亲和层析将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中,这种分离纯

28、化蛋白质的方法称为亲和层析。4.修饰碱基tRNA中的一些不常见的碱基,如腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶的修饰形式。5.必需氨基酸指存在食物中,动物无法合成只能从食物中摄取的氨基酸,这些氨基酸被称为必须氨基酸。动物需摄取必须氨基酸以制造蛋白质。由于不同物种的化合能力不同,对于某一物种是必须氨基酸的,对另一物种则不一定是必须氨基酸。6.启动子一段能使基因进行转录的DNA序列。启动子可以被RNA聚合酶辨认,并开始转录。在RNA合成中,启动子可以和决定转录开始的转录因子产成相互作用,继而控制细胞开始生产哪一种蛋白质。7.冈崎片段DNA复制过程中,一段属于不连续合成的延长链,且长度相对较短的DNA片段。

29、冈崎片段之所以存在,是因为DNA聚合酶无法以3´往5´的方向合成DNA,因此产生了许多以5´到3´方向合成的冈崎片段,再由DNA连接酶将其粘合。8.分子伴侣一类协助细胞内分子组装和协助蛋白质折叠的蛋白质。如HSP。9.无义突变编码某一氨基酸的三联体密码经碱基替换后,变成不编码任何氨基酸的终止密码子UAA、UAG或UGA。虽然无义突变并不引起氨基酸编码的错误,但由于终止密码出现在一条mRNA的中间部位,使翻译的多肽链就此终止,形成一条不完整的多肽链。10.增强子指增加与其连锁的基因转录频率的DNA序列。增强子是通过启动子来增加转录的。有效的增强子可以位于基

30、因的5´端,也可以位于基因的3´端,有的还可位于基因的内含子中。增强子的效应很明显,增强子的作用同增强子的取向无关,甚至远离靶基因达几千kb也仍然有增强作用。四、计算题1、已知天冬氨酸的-COOH、-NH3+和R基团的pKa分别为2.09,3.86和9.82。如何用pH为5.0,0.1mol/L的天冬氨酸溶液和NaOH配置pH6.8,0.1mol/L的天冬氨酸-NaOH缓冲液?2、假设浓度为2×10-4mol/L的某抑制剂抑制了一个酶催化反应的75%,计算这个非竞争性抑制剂的Ki。把数据代入非竞争性抑制剂的速度计算公式进行计算,看是否正确即可。3、大肠杆菌染色体的

31、分子量大约是3.3×109Da,核苷酸的平均分子量是330Da。邻近核苷酸对之间的距离是0.34nm,双螺旋每一转的高度(即螺距)是3.4nm,(1)该分子有多长;(2)该DNA有多少转。答:碱基对数=3.3×109Da/(330Da×2),分子长度=碱基对数×0.34nm转数=分子长度/3.4nm4、现分离了一DNA片段,可能含有编码多肽的基因的前几个密码子。该片段的序列组成如下:5´CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG3´3´GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC5´(1)哪一条链作为转录

32、的模板链(2)写出mRNA序列。答:模板链:3´5´链五、问答题1、运用所学的生物化学知识简要解释下列生物学现象。(1)阴雨连绵不但延迟果实成熟且结的果实不甜;(2)植物细胞浸入蔗糖溶液中一段时间后,发现蔗糖溶液pH升高(胞外碱化)。答:(1)果实的甜与否主要与其积累的糖分有关,连着阴天时,由于光照不足,导致光合作用减弱,合成的糖类减少,积累也减少,故味不甜;此外,糖积累少了,糖代谢不顺畅,色素转变存在问题,乙烯合成受阻,促成熟减慢。(2)从葡萄糖的运输和质子泵的关系入手,转运等2、解释弱相互作用(次级键)并举例论述其在稳定大分子构象中的作用。3、PCR和细胞内DNA复制两

33、者有哪些主要的相同点和不同点?各举出3个。答:同:两者都符合半保留复制模型,即两条链都可作为模板,子代链中一条链来自于亲代链,另一条链是新合成的;两者都需要引物;两者都依赖DNA的DNA聚合酶;两者的底物都是dNTP;DNA合成时都是在DNA聚合酶作用下按碱基配对原则往3´-OH上加dNTP,形成3´,5´磷酸二酯键;两者新合成链延伸方向都是5´3´;两者DNA合成的保真度(精确性)都较高。异:复制为半不连续复制,而PCR两条链的合成都是连续的;复制时引物是由引发酶或引发体合成的,而PCR引物是在反应前加到反应体系中;复制需要在特定的复制原点开

34、始,并且有终止点,而PCR在有特异引物存在时在任何序列都可起始,并且没有终止点;复制时两条模板链是在解旋酶的作用下局部打开双链,而PCR两条模板链通过变性完全打开双链;复制时两条链的合成时同步进行的,而PCR两条链的合成可能不同步;PCR的DNA聚合酶是耐热的DNA聚合酶,而复制的聚合酶一般不耐热;复制一般为双向复制,而PCR反应中DNA合成时单向的;复制时由多种蛋白因子参与,而PCR只有DNA聚合酶参与。4、简述原核生物与真核生物在基因结构及其基因表达调控上的异同点。2005年硕士研究生入学考试试题一、名词解释1.多顺反子mRNA一个mRNA包含多个蛋白质的编码信息,即包含多个开放可读框(O

35、RF),这种mRNA称为多顺反子mRNA。这些蛋白质通常具有同一种相关的功能,并且成组的被一个操纵子所调控,原核生物mRNA通常是这种情况。2. attenuator弱化子:是在研究大肠杆菌的色氨酸操纵子表达弱化现象中发现的。在Trp mRNA 5´端trp正基因的起始密码前与一个长162bp的DNA序列称为前导区,其中第123150位核苷酸如果缺失,trp基因的表达可提高6倍。或者,在色氨酸操纵子中的一个区域,此区域以形成不同二级结构的方式,利用原核生物转录与翻译的偶联对转录进行调节。此区域只存在于原核生物合成代谢的操纵子中。3.cDNA文库以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外

36、反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。4. wobble hypothesis摆动假说:解释遗传密码简并性的假说,克里克于1966年提出。对氨基酸专一的密码子的头两个碱基与相应tRNA上反密码子的第二个和第三个碱基互补配对,而密码子的第三个碱基(3´端)与反密码子5´端碱基的配对专一性相对较差,被称为摆动配对。(wobble pairing)5. semiconservative replication半保留复制:一种双链

37、脱氧核糖核酸的复制模型,其中亲代双链分离后,每条单链均作为新链合成的模板。因此,复制完成时将有两个子代DNA分子,每个分子的核苷酸序列均与亲代分子相同,这是1953年沃森和克里克在DNA双螺旋结构基础上提出的假说,1958年得到证实。二、填空题1.糖蛋白的糖基大多结合在蛋白质的Asn残基、Thr残基与Ser残基上。2.甾醇类化合物的核心结构是环戊烷多氢菲,鞘脂类的核心结构是神经酰胺。3.蛋白质的超二级结构或motifs的基本组合形式为、和等。4.温度对酶活力影响分别为温度升高,反应速率加快和温度过高,酶蛋白变性失活。5.tRNA分子结合氨基酸和识别mRNA的两个结构区分别称为3´端受

38、体臂和反密码子环。6.膜酯PIP2被磷脂酶C水解产生的两种起第二信使作用的有机小分子分别是IP3和DAG。7.DNA的回文序列的特征是反向重复。8.“基因”的分子生物学定义是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。9.DNA后随链合成的起始要一段短的RNA引物,它是由DNA引物酶以核糖核苷酸为底物合成的。10.大肠杆菌中DNA聚合酶的生理功能主要是起修复DNA的作用。11.写出两种合成后不被切割或拼接的RNA:真核生物5SrRNA和原核中的mRNA。12.许多氨基酸都有多个密码子,除了Met、Ser只有一个密码子外。13.PCR反应主要有变性、退火、延伸三个步骤。14.癌基因可分为两类

39、:原癌基因和病毒癌基因。三、判断正误(错)1.碱性的组蛋白和碱都能降低双链DNA的Tm值。(对)2.如果DNA样品A的Tm低于DNA样品B的Tm,那么样品A含有的A-T碱基对高于样品B。(错)3.血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。(错)4.酶活性中心一般由在以及结构中相邻的若干氨基酸残基组成。(对)5.胰岛素的作用不需要G蛋白。(对)6.Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶浓度无关。(对)7.B族维生素都可以作为辅酶的组分参与代谢。(错)8.维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。(对)9.某细菌生长的最适温度是25,若把此细菌从25移到37的环境中,细菌细胞膜的流动性将增加。(错)1

40、0.自然界DNA超螺旋都是负超螺旋。(错)11.B型双螺旋是DNA的普遍构型,而Z型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。(错)12.在先导链上DNA沿5´3´方向合成,在后随链上则沿3´5´方向合成。(对)13.HIV基因组是由两条单链正链RNA组成。(错)14.我们把与mRNA序列互补的那条DNA链称为编码链或称有义链。(对)15.DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。(错)16.所有高等真核生物的启动子中都有TATA盒结构。(错)17.核酸分子在电场中向正极移动,蛋白质向负极移动。(错)18.原核生物转录负调控时,调节基因的蛋白质产物是基因活

41、性的一种激活物,而在正调控时,调节基因的产物是一种阻遏物。(对)19.所有免疫球蛋白中,C区的氨基酸序列差别较小,V区的氨基酸序列差别较大。(对)20.操纵子和启动子的调控是反式隐性、顺式显性的,而编码阻遏蛋白基因的调控既是反式显性又是顺式显性。四、选择题1.一未知三糖,可被-半乳糖苷酶水解,产物中检测到有麦芽糖和半乳糖,推测其分子结构中含有(D)A.1分子-D-半乳糖和2分子-D-葡萄糖B.1分子-D-葡萄糖和2分子-D-半乳糖C.1分子-D-半乳糖、1分子-D-葡萄糖和1分子-D-葡萄糖C.1分子-D-半乳糖、1分子-D-葡萄糖和1分子D-葡萄糖2.缩醛磷脂与其他磷酸甘油脂结构上显著不同的

42、是(B)A.所有缩醛磷脂都有相同的头基团 B.其甘油的C-1被长链脂肪醇醚化C.与其甘油的C-1相连的脂肪酸是不饱和脂肪酸 D.烃链中出现环状结构3.欲构成双分子层组成,其内外均为水相的封闭囊泡,最好选择(A)A.卵磷脂 B.硬脂酸钠 C.胆固醇 D.脑苷脂4.常用的化学修饰剂DFP可以修饰蛋白质的(C)残基A.Lys B.Asn C.Ser D.His5.将抗体固定在层析柱的载体,使抗原从流经此柱的蛋白质样品中分离出来,这技术属于(D)A.吸附层析 B.离子交换层析 C.分配层析 D.亲和层析6.下列有关-折叠的叙述错误的是(A)A.-折叠是纤维状蛋白质的特有结构B.-折叠靠肽链的C=O与N

43、-H间形成的两条链之间的氢键而稳定C.-螺旋可以通过加热处理而转变成-折叠D.-折叠有平行的-折叠和反平行的-折叠7.下列聚合物在中性pH下可能形成螺旋的是(C)A.多聚甘氨酸 B.多聚谷氨酸 C.多聚亮氨酸 D.多聚脯氨酸8.多食糖类需补充(A)A.维生素B1 B.维生素B2 C.维生素B5 D.维生素69.代表了随机顺序机制的双底物双产物反应是(B)A.B.C.10.四肽Ser-Val-Trp-His与FDNB反应后,用6mol/LHCL水解得到(C)A.DNP-Ser,Val-Trp-His B.DNP-Ser,Val,Trp,HisC.DNP-Ser,Val,His D.DNP-His

44、,Ser,Val,Trp11.一种茶碱的类似物Aminophyline经常被用来与肾上腺素一起治疗急性哮喘,它的作用可能是(D)A.促肾上腺素与受体结合 B.帮助G蛋白结合激活腺苷酸环化酶C.有cAMP样作用 D.抑制磷酸二酯酶,防止cAMP水解12.某双链DNA样品,含20摩尔百分比的腺嘌呤,其鸟嘌呤的摩尔百分比应为(A)A.30 B.20 C.50 D.1013.对于一个遵循米氏动力学的酶而言,当S=Km时,若v=35mol/min。Vmax是(B)A.35mol/min B.70mol/min C.17.5mol/min D.105mol/min14.DNA共价闭环式超螺旋的构象改变只能

45、发生在(A)A.至少有一个磷酸二酯键断裂 B.磷酸二酯键的两侧都断开C.组蛋白结合到DNA上 D.盐物质质量浓度超过1.0mol/L15.寡聚dT-纤维素柱层析用于从真核生物总RNA中纯化mRNA,原理是(D)A.真核mRNA含有dA B.真核mRNA内部含有多聚AC.真核mRNA的5有一多聚A D.真核mRNA的3有一多聚A16.乳糖操纵子的安慰诱导物是(D)A.乳糖 B.半乳糖 C.异构乳糖 D.异丙基巯基半乳糖苷17.复制子(C)A.细胞分裂期同复制产物被分离之后的DNA片段B.复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白C.任何自发复制的DNA序列(它与复制起始点相连)D.复制起点和复制

46、叉之间的DNA片段18.基因组是(D)A.一个生物体内所有基因的分子总量 B.一个二倍体细胞中的染色体数目C.遗传单体 D.生物体的一个特定细胞内所有基因的分子的总量19.DNA在10nm纤丝中长度比缩了(A)倍A.6倍 B.10倍 C.40倍 D.240倍20.原核生物中起始氨基酰-tRNA是(A)A.fMet-tRNA B.Met-tRNA C.Arg-tRNA D.Leu-tRNA21.蛋白质生物合成的终止信号由(B)识别A.tRNA B.RF C.EF D.IF(或elF)22.核糖体E位点是(B)A.真核mRNA加工位点 B.tRNA离开原核生物核糖体的位点C.核糖体中受EcoR I

47、限制的位点 D.真核mRNA起始结合位点五、问答题1、不同pH时测定两种多聚氨基酸的旋光度,结果如图(图为生化书209页的图5-15)所示。解释旋光度急剧变化的原因。旋光度和二级结构有什么关系? 答:(1)多聚赖氨酸在pH小于pI时,R基具有正电荷,静电排斥,不能形成链内氢键,呈无规则卷曲,而在pH大于pI时,自发的形成氢键,同样对多聚谷氨酸有变化。(2)-螺旋的比旋不等于构成自身氨基酸的简单加和,而是无规则卷曲的比旋才和自身氨基酸的比旋加和相等,-螺旋的旋光度实际上是碳原子不同构型的不对称和-螺旋的构象不对称的总反应。2、欲配置100mLpH2.4,0.3mol/L甘氨酸-HCl缓冲液,需多

48、少质量的甘氨酸和多少体积的1mol/L HCl(甘氨酸的相对分子质量75.07,pKa1=2.4,pKa2=9.6)答:因为Gly+Gly0Gly-。pR=pKa+lg(Gly0/Gly+),又因为HCl提供H+,所以2Gly+=H+,Gly+Gly0=0.3mol/L,H+=0.5×0.3=0.15mol/L。VHCl=0.15mol/L×0.1L/1mol/L=0.015L。MGly=0.03×75.07=2.2521g3、某DNA重组体的插入片段为线状双链,长度为10.0kbp,被限制性核酸内切酶A和B降解的产物经凝胶电泳分级分离后结果如下:酶A单独消化时,

49、得到1.5kbp和8.5kbp的2个片段酶B单独消化时,得到0.5kb、3.0kbp和6.5kbp的三个片段酶A和酶B一起消化时,得到0.5kbp、1.0kbp、2.0kbp和6.5kbp的4个片段根据上述信息画出该插入片段的限制性内切酶图谱。答:画一条线段,在线段上按顺序画上B,A,B三个点。4、DNA连接酶对于DNA的复制是很重要的,但RNA的合成一般却不需要连接酶。试解释该现象。答:DNA聚合酶只能延长已有的DNA链,而不能从头合成DNA链,但RNA聚合酶能从头合成RNA链。这是与DNA合成区别之一。在DNA复制时,首先由RNA聚合酶合成一小段RNA引物,然后在DNA聚合酶催化下使链得到

50、延伸,在DNA复制完成后,需要把原先的RNA引物切除,因此合成的DNA片段之间通过DNA连接酶进行连接。5、大肠杆菌DNA中,邻近核苷酸对之间的距离是0.34nm,双螺旋每一转的高度(即螺距)是3.4nm,若复制叉以每秒500个碱基对的速度向前移动,复制叉前的DNA以多大的速度旋转? 答:3.4/0.34=10,500/10=50r/s6、为何rRNA和tRNA分子比mRNA稳定,怎样区分某段mRNA是真核mRNA还是原核mRNA? 答:mRNA直接负责蛋白质的产生,翻译后即可降解,由于功能的差异,稳定性也不同,在不同的组织中半衰期也会有差别。rRNA参与核糖体的组装,而核糖体是一个相对稳定的

51、结构,因此,rRNA比较稳定,tRNA参与翻译过程,主要功能是携带氨基酸到达核糖体,在完成一次携带功能后不可能降解而需要继续下一轮的氨基酸转运工作。mRNA游离存在于细胞之中,并且被特异的单链RNA核酸酶所降解。tRNA和rRNA是部分双链的所以能够免遭核酸酶的攻击。另外,rRNA不是游离存在的,通常同蛋白质结合形成核糖体5端帽子结构和3端PloyA尾。7、结合乳糖操纵子和色氨酸操纵子的调控机制说明原核生物基因调控原理。答:因子决定RNA聚合酶识别特异性原核生物中操纵子模型普遍性阻遏蛋白和阻遏机制的普遍性。大肠杆菌乳糖操纵子包括3个结构基因,Z,Y,A和启动子,控制子,阻遏子等。转录时,RNA

52、聚合酶首先与启动区结合,通过操纵区向右转录,从O区中间开始,按ZYA方向进行,每次转录出来的一条mRNA链上都带有着3个基因,转录的调控在启动区和操纵区进行。色氨酸操纵子是一种阻遏型操纵子,当无色氨酸时,辅阻遏蛋白不能结合O序列,操纵基因开放,开始转录。当细胞内有大量的色氨酸时,辅阻遏蛋白与色氨酸结合后,可结合O序列阻遏基因转录。Trp操纵子的另一个调控方式是衰减调控机制,在色氨酸操纵子第一个结构基因和启动基因之间存在有一弱化区域,当细胞内色氨酸浓度很高时,通过与转录想偶联的翻译过程,形成一个弱化子结构,使RNA聚合酶从DNA上脱离,转录终止。原核生物的基因调控还有其他形式,但是操纵子是它的基

53、本模式。调控方式有正控制和负控制,且往往正负控制同时作用于一个操纵子。这种多重控制比单一控制更有效、精确。在大肠杆菌中已知的操纵子已超过100.但是相对于真核生物的基因调控方式来看,真核生物的基因调控比原核生物复杂得多,这是因为这两类生物在三个不同水平上存在着重大的差别。8、在生物大分子的结构研究中使用了多种天然的或人工的化学物质。请举出三种作用类型不同的人工合成的化学物质。按作用类型,说明它们是如何被用于研究大分子结构的。答:人工合成蛋白质:结晶牛胰岛素,通过X射线晶体衍射技术进行胰岛素结构的研究,如果是溶液,则用NMR技术研究。人工合成核酸:酵母丙氨酸转移核糖核酸,用二维核磁共振,X射线晶

54、体学。质谱法也可以用于研究蛋白质和核酸结构,用气相色谱法研究脂肪酸,人工反式脂肪酸(人造奶油)。2006年硕士研究生入学考试试题一、名词解释1. Shuttle plasmid vector穿梭质粒载体:指能在两种不同的生物中复制的载体。例如既能在原核生物中复制,又能在真核生物中复制的载体。这类载体不仅具有细菌质粒的复制原点及选择标记基因,还有真核生物的自主复制序列(ARS)以及选择性标记性状,具有多克隆位点。通常穿梭载体在细菌中用于克隆,扩增目的基因,在酵母菌中用于基因表达分析。2. oncogene,proto-oncogene,anti-onco-gene癌基因是一类会引起细胞癌变的基因

55、。癌基因有其正常的生物学功能,主要是刺激细胞的正常生长,以满足细胞更新的需求。只是当癌基因发生突变后,才会在没有接收到生长信号的情况下仍然不断地促使细胞生长或使细胞免于死亡,最后导致细胞癌变;癌基因可分为两类:一类是病毒癌基因,指反转录病毒的基因组里带有可使受病毒感染的宿主细胞发生癌变的基因,简写成V-Onc;另一类是细胞癌基因,简写成c-onc,又称原癌基因(proto-onco gene),这是指正常细胞基因组中,一旦发生突变或被异常激活后可使细胞发生恶性转化的记忆,抑癌基因或肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene)又称抗癌基因(anti-onco-gene),是指能够抑制细胞癌基因活性的一类基因,其功能是抑制细胞周期,组织细胞数目增多以及促使细胞死亡。3.SD序列在原核生物mRNA起始密码AUG上游7-12碱基处,有一段富含嘌呤的序列,以AG-GA为核心。这段序列可与核糖体30S亚基中16SrRNA3端富含嘧啶序列相结合,与翻译的起始阶段作用过程相关。4.SBHsequencing by hybridization即DNA

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