流式分选原理PPT学习教案

1、会计学1流式分选原理流式分选原理(yunl)第一页，共33页。流式分选仪的原理(yunl)及应用第1页/共33页第二页，共33页。流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种可以快速(kui s)、准确、客观，并且能够同时检测直线流动状态中的单个细胞的多项物理及生物学特性，加以分析定量的技术。流式细胞仪（Flow Cytometer）集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机技术、细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的一种新型高科技仪器。流式细胞术流式细胞术第2页/共33页第三页，共33页。CaliburAriaIII第3页/共33页第四页，共33页。唯一可选配唯一

2、可选配(xun pi)分选装置的小型分选装置的小型机。机。第4页/共33页第五页，共33页。电子(dinz)偏转的方式第5页/共33页第六页，共33页。流式分选仪的原理(yunl)及应用第6页/共33页第七页，共33页。纯度纯度(chnd)得率得率速度速度(sd)第7页/共33页第八页，共33页。 鞘液压力(yl)（Pressure ) PSI 振荡频率 (Drop Frequency) Hz喷嘴大小 (Nozzle) m上样速度(Sample Flow Rate ) events/sec 第8页/共33页第九页，共33页。Good Purity 分选后所得到的细胞是否是想要(xin yo)的

3、？Good Recovery 分选后得到的细胞数量是否够用?Good Viability 分选后有多少细胞是活的？第9页/共33页第十页，共33页。 Sweet spot - 液滴断点自动(zdng)监控 Accudrop - 液滴延迟自动(zdng)调节 32等分液滴分辨率，精确分选模式第10页/共33页第十一页，共33页。高得率分选,来自(li z)于液流稳定性第11页/共33页第十二页，共33页。高纯度分选,来自于精确(jngqu)地充电第12页/共33页第十三页，共33页。第13页/共33页第十四页，共33页。Aria III 液滴32等分分析(fnx)高纯度分选,来自于分析(fnx)

4、的精度Yield Mask第14页/共33页第十五页，共33页。第15页/共33页第十六页，共33页。第16页/共33页第十七页，共33页。 1. 无菌处理 Auto clean 2. 圆滑管路设计(shj) 3. NG流动池 低功率激光照射 4. 电子减速 5. 分选样本温控系统 （4、25、37、42）影响细胞活性的因素： 1. 细胞本身状态 2. 细胞受到的撞击(zhungj) 3. 激光照射 4. 细胞所处温度影响 5. 系统洁净程度第17页/共33页第十八页，共33页。第18页/共33页第十九页，共33页。流式分选仪的原理(yunl)及应用第19页/共33页第二十页，共33页。n要高

5、压灭菌鞘液（建议一直使用无菌鞘液）n一般不加NaN3n注意更换鞘液过滤器第20页/共33页第二十一页，共33页。细胞大小一般不超过喷嘴孔径1/5，绝不能超过1/3建议无菌样本，容易维持上样针部分的无菌条件减少有高浓度PI的样本，以免残留在管路内，影响(yngxing)后续样本活性浓度可在107/ml一定要使用(shyng)300-400目孔径过滤网过滤第21页/共33页第二十二页，共33页。第22页/共33页第二十三页，共33页。第23页/共33页第二十四页，共33页。第24页/共33页第二十五页，共33页。第25页/共33页第二十六页，共33页。第26页/共33页第二十七页，共33页。第27

6、页/共33页第二十八页，共33页。第28页/共33页第二十九页，共33页。第29页/共33页第三十页，共33页。1、开液流和高压预热、开液流和高压预热(y r)30分分2、定期更换鞘液滤器（一年一次）、定期更换鞘液滤器（一年一次）3、分选前检查、分选前检查Nozzle和和O-ring 4、及时清洗放置、及时清洗放置Nozzle的部位和的部位和Nozzle Locking Lever 5、检查和更换快速接头、检查和更换快速接头o-ring 6、使用、使用PBS（不要使用生理盐水），（不要使用生理盐水），PBS要过滤（要过滤（0.2um）仪器的维护仪器的维护(wih)保养保养第30页/共33页第三十一页，共33页。7、选择合适的喷嘴和压力8、液流启动完，立刻用DI清洗Closed Nozzle ，定期超声 清洗Closed Nozzle 9、更换Pinch Valve 管道 10、定期对上样架上润滑剂11、做CS&T质控 12、定期整理(zhngl)实验实验