动物性食品中大肠菌群的检验

1、会计学1动物性食品中大肠菌群的检验动物性食品中大肠菌群的检验初发酵分离培养分离培养复发酵（证实试验）复发酵（证实试验）乳糖发酵试验乳糖发酵试验分离培养分离培养证实试验证实试验样品稀释后，样品稀释后，选择三个稀释选择三个稀释度，每个稀释度，每个稀释度接种三管乳度接种三管乳糖胆盐发酵管糖胆盐发酵管。361培养培养482h，观察，观察是否产气。是否产气。 将产气发酵管将产气发酵管培养物转种于培养物转种于伊红美蓝琼脂伊红美蓝琼脂平板上，平板上，361培养培养18-24h，观察，观察菌落形态。菌落形态。挑取平板上的挑取平板上的可疑菌落，进可疑菌落，进行革兰氏染色行革兰氏染色观察。同时接观察。同时接种乳糖

2、发酵管种乳糖发酵管361培养培养242h，观察，观察产气情况。产气情况。 根据证实为根据证实为大肠杆菌阳大肠杆菌阳性的管数，性的管数，查查MPN表表，报告每，报告每100ml（g）大肠菌群的大肠菌群的MPN值。值。 3）分离培养分离培养 将产气的发酵管分别转接在伊红美蓝将产气的发酵管分别转接在伊红美蓝琼脂平板上，置（琼脂平板上，置（36士士1)恒温箱内培养恒温箱内培养1824 h。取出，观察菌落形态，并做革兰。取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实试验。氏染色和证实试验。4）证实试验证实试验 在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1一一2个进行革兰氏染色，同时接

3、种乳糖发酵个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置（管，置（36士士1)恒温箱内培养（恒温箱内培养（24士士2) h，观察产气情况。凡乳糖产酸产气、革兰，观察产气情况。凡乳糖产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽袍杆菌，即可报告为氏染色为阴性的无芽袍杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。大肠菌群阳性。取产酸产气的发取产酸产气的发酵管中培养液在酵管中培养液在伊红美兰平板上伊红美兰平板上进行划线进行划线取有核心和取有核心和带金属光泽带金属光泽的深紫色菌的深紫色菌落进行革兰落进行革兰氏染色氏染色乳糖蛋白胨培养乳糖蛋白胨培养液液镜检（镜检（革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌）37 培养培养48h证实产证实产气（阳气（阳性）结

4、性）结果与否果与否37 培养培养24h37培养培养24h 阳性管MPN阳性管MPN阳性管MPN10ml1ml0.1ml10ml1ml0.1ml10ml1ml0.1ml0013120112335300261211530023003912220301390103123243026401161301630395012913120310430131213224311750206133293121200219200931316002212201143209302316202203211500309203263222100311321015323290032162112033024003319212273

5、3146010042133433211001017220213331100+1021122128 1031522235 110722342 1111123029 1121523136 1131923244 50ml管阳性数10ml管阳性数1ml管阳性数每100ml的MPN000000110022010101120123020202130224030303150326100110131024103611031115112711391205121712210123121308l表表2-3 502-3 50毫升检样接毫升检样接种种1 1管、管、1010毫毫升、升、1 1毫升检毫升检样各接种样各接种3

6、 3管管的大肠杆菌的大肠杆菌最近似数检最近似数检索表索表第一法：大肠菌群第一法：大肠菌群MPN计数法计数法表表B.1 大肠菌群最可能数（大肠菌群最可能数（MPN）检索表）检索表用于对出口食品中大肠菌群进行检验用于对出口食品中大肠菌群进行检验 推测试验推测试验证实试验证实试验样品稀释后，样品稀释后，选择三个稀释选择三个稀释度，每个稀释度，每个稀释度接种三管度接种三管LST肉汤发酵肉汤发酵管。管。361培培养养482h，观，观察是否产气。察是否产气。 将产气发酵管将产气发酵管培养物转种于培养物转种于煌绿乳糖胆盐煌绿乳糖胆盐（BGLBBGLB）肉汤）肉汤中，中，361培培养养482h ，观观察是否产气察是否产气。以以BGLBBGLB产产气为阳性气为阳性，查，查MPN表，报告表，报告每每ml（g）样品中）样品中大肠菌群大肠菌群的的MPN值值。 50ml管阳性数10ml管阳性数1ml管阳性数每100ml的MPN0000001100220101011201230202021302240303031503261001101310241036110311151127113912051217