果酒果醋的制作复习课件

1、一、果酒果醋实验流程示意图。一、果酒果醋实验流程示意图。挑选葡萄挑选葡萄冲洗冲洗榨汁榨汁酒精发酵酒精发酵醋酸发酵醋酸发酵果醋果醋 发酵装置发酵装置A A装置装置B B装置装置请回答制作果酒和果醋的有关问题。请回答制作果酒和果醋的有关问题。（1）果酒和果醋的制作依次利用了）果酒和果醋的制作依次利用了 和和 两种微两种微生物，两者在结构上最主要区别是生物，两者在结构上最主要区别是 ；从代谢；从代谢类型上看，两者的相同之处是类型上看，两者的相同之处是 。（2）在设计发酵装置时，排气口要通过一个长而弯曲的）在设计发酵装置时，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，其目的是胶管与瓶身相连，其目的是 。

2、（3）果酒发酵时间一般为）果酒发酵时间一般为1012d，但也可能因为，但也可能因为 等外界条件而发生改变。工作人员可通过定期取发酵液与等外界条件而发生改变。工作人员可通过定期取发酵液与 试剂反应来检测发酵情况，如发酵液中含有酒精则溶液呈试剂反应来检测发酵情况，如发酵液中含有酒精则溶液呈现现 现象。现象。（4）果酒进一步发酵能获得果醋，酒变醋的原理）果酒进一步发酵能获得果醋，酒变醋的原理是是 。氧气充足，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸氧气充足，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸 酵母菌酵母菌 醋酸菌醋酸菌有无核膜有无核膜都是异养型生物都是异养型生物防止空气中的杂菌进入防止空气中的杂菌

3、进入温度温度灰绿色灰绿色人类利用微生物发酵制作果酒、果醋。请回答下列问题人类利用微生物发酵制作果酒、果醋。请回答下列问题（1）果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌是一类）果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌是一类 （呼吸类型）微生物。在有氧条件下，酵母菌进行有氧（呼吸类型）微生物。在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，其反应式为呼吸，其反应式为 。在无氧。在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸，其反应式为条件下，酵母菌进行无氧呼吸，其反应式为_ 。（2）温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。）温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20左右最左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度

4、控制在_ 。在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用。在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。在发酵过程中，的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。在发酵过程中，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色。在使葡萄酒呈现深红色。在 的发酵液中，酵母的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物却因无法适应菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物却因无法适应这一环境而受到抑制。这一环境而受到抑制。兼性厌氧兼性厌氧1825缺氧、呈酸性缺氧、呈酸性（3）醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能）醋酸菌是

5、一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。在变酸的酒的表面观察到的进行旺盛的生理活动。在变酸的酒的表面观察到的_就是就是_。实验表明，醋酸菌对氧气的含量。实验表明，醋酸菌对氧气的含量_。菌膜菌膜醋酸菌在液面大醋酸菌在液面大量繁殖形成的量繁殖形成的特别敏感特别敏感微生物的实验室培养微生物的实验室培养练习练习1:不同的微生物对营养物质的需要各不相不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是微生物营养的描述中，不正确的是()。A氮源物质为该微生物提供必要的氮素氮源物质为该微生物提供必要的氮素B

6、碳源物质也是该微生物的能源物质碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D水是该微生物的营养要素之一水是该微生物的营养要素之一B 1微生物的实验室培养微生物的实验室培养(1)培养基培养基概念：人们按照微生物对营养物质的不同概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。微生物的培养与应用微生物的培养与应用 划分标准划分标准培养基种类培养基种类特点特点用途用途物理性质物理性质化学成分化学成分天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基用途用途鉴别培养基鉴别培养基培养基的种类培养基的种

7、类不加凝固剂不加凝固剂加凝固剂，如琼脂加凝固剂，如琼脂工业生产工业生产观察微生物的运动、观察微生物的运动、分类鉴定分类鉴定微生物分离、鉴定、微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌活菌计数、保藏菌种种含化学成分不明确的天然物含化学成分不明确的天然物质质工业生产工业生产培养基成分明确培养基成分明确分类、鉴定分类、鉴定在培养基中加入某种化学物在培养基中加入某种化学物质质, ,以抑制不需要的微生物以抑制不需要的微生物的生长的生长, ,促进所需要的微生促进所需要的微生物的生长物的生长培养、分离出特培养、分离出特定微生物定微生物在培养基中加入某种指示剂在培养基中加入某种指示剂或化学药品或化学药品, ,用以鉴别

8、不同用以鉴别不同种类的微生物种类的微生物鉴别不同种类微鉴别不同种类微生物生物选择培养基选择培养基液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基固体培养基固体培养基培养基配方及营养要素培养基配方及营养要素基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。、特殊营养物质以及氧气的需求。营养要素营养要素来源来源功能功能碳碳源源无机无机氮源氮源CO2、NaHCO3、CaCO3等等含碳无机物含碳无机物构成细胞中的物质构成细胞中的物质和一些代谢产物；和一

9、些代谢产物；有机碳源是碳源又是有机碳源是碳源又是能源能源有机有机碳源碳源糖类、脂质、蛋白质、有机糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等酸、石油、花生粉饼等氮氮源源无机无机氮源氮源无机氮：无机氮：NH3、铵盐、硝酸、铵盐、硝酸盐、盐、N2等等将无机氮合成含氮的将无机氮合成含氮的代谢产物代谢产物有机有机碳源碳源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸素、氨基酸合成蛋白质、核酸及合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物含氮的代谢产物生长因子生长因子维生素、氨基酸、碱基维生素、氨基酸、碱基酶和核酸的组成成酶和核酸的组成成分；分；参与代谢过程参与代谢过程中的酶促反应中的酶促反应 例例1

10、1：通：通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出体中分别分离出()。大肠杆菌大肠杆菌霉菌霉菌放线菌放线菌固氮细菌固氮细菌A B C DA例例3：(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，在大肠杆菌培

11、养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑还要考虑_、_和渗透压等条件。由于和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行养基和培养器皿进行_(消毒、灭菌消毒、灭菌)；操作者的；操作者的双手需进行清洗和双手需进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能外线杀灭，其原因是紫外线能

12、使蛋白质变性，还能_。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的外，还应保证待测样品稀释的_。温度酸碱度温度酸碱度易培养易培养 生活周期短生活周期短灭菌灭菌消毒消毒损伤损伤DNA的结构的结构比例合适比例合适(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的等菌落特征对细菌进行初步的_。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污培养大肠杆

13、菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染 。 对 于 固 体 培 养 基 应 采 用 的 检 测 方 法 是染 。 对 于 固 体 培 养 基 应 采 用 的 检 测 方 法 是_。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。鉴定鉴定(或分类或分类)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生观察培养基上是否有菌落产生灭菌灭菌(2)微生物培养的无菌技术微生物培养的无菌技术进行无菌操作主

14、要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是消毒和灭菌。消毒和灭菌。消毒和灭菌的区别消毒和灭菌的区别使用方法使用方法结结 果果常用的方法常用的方法消毒消毒较为温和较为温和的物理或的物理或化学方法化学方法仅杀死物体表面或内仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害部一部分对人体有害的微生物的微生物(不包括芽孢不包括芽孢和孢子和孢子)煮沸消毒法、巴氏煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消消毒法、紫外线消毒法等毒法等灭菌灭菌强烈的理强烈的理化因素化因素杀死物体内外所有的杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和微生物，包括芽孢和孢子孢子灼烧灭菌、干

15、热灭灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌菌、高压蒸汽灭菌2.微生物的纯化培养及菌种的保藏微生物的纯化培养及菌种的保藏(1)(1)原理：在培养基上将原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。化的细菌菌落。(2)(2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。方法：平板划线法、稀释涂布平板法。（3 3）菌种保藏方法：）菌种保藏方法：临时保藏法、甘油管藏法临时保藏法、甘油管藏法例例2(2011山东卷山东卷)研研究发现柚皮精油和乳酸菌素究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分小分子蛋白质子蛋白质)均有抑菌作

16、用，两者的提取及应用如图所示。均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。(1)筛选乳酸菌筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或时可选用平板划线法或_接种。接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_。实验。实验前需对超净工作台进行前需对超净工作台进行_处理。处理。(2)培养基中的尿素可为乳酸菌培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供生长提供_。电。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度其分子量越大，电泳速度_。(3)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，

17、会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的_来来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。稀释涂布稀释涂布平板法平板法高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅紫外线消毒紫外线消毒碳源和氮源碳源和氮源越慢越慢大小大小(直径直径)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.1.将转基因植物的叶片接种到无菌培养基上将转基因植物的叶片接种到无菌培养基上, ,应该应该进行严格的无菌操作。进行严格的无菌操作。2.2.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离分解尿素的细菌分解尿素的细菌

18、, ,是否无菌操作影响较小。是否无菌操作影响较小。3.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。种成分。 4.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的惟筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的惟一氮源。一氮源。5.统计样品中的活菌一般使用平板划线法。统计样品中的活菌一般使用平板划线法。例例1 1：从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是: :采集菌采集菌样样富集培养富集培养纯种分离纯种分离性能测定。性能测定。(1)(1)不同微生物的生存环境不同不同微生物的生存环境不同, ,获得理想微生物的第一步获得理想微生

19、物的第一步是从适合的环境采集菌样是从适合的环境采集菌样, ,然后再按一定的方法分离、纯然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌种应从化。培养嗜盐菌的菌种应从 环境中采集。环境中采集。(2)(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件环境条件, ,使其菌落中的数量大大增加使其菌落中的数量大大增加, ,从而分离出所需微从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择选择 的培养基的培养基, ,并在并在条件下培养。条件下培养。海滩等高盐海滩等高盐以淀粉为以淀粉为惟

20、一碳源惟一碳源高温高温(3)(3)接种前要对培养基进行接种前要对培养基进行 处理。在整个微处理。在整个微生物的分离和培养中生物的分离和培养中, ,一定要注意在一定要注意在条件下进行。条件下进行。(4)(4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图养的效果图, ,请分析接种的具体方法。请分析接种的具体方法。获得图获得图A A效果的接种方法是效果的接种方法是 , ,获得图获得图B B效果效果的接种方法是的接种方法是。一同学用稀释平板法纯化土壤中。一同学用稀释平板法纯化土壤中的细菌时的细菌时, ,发现培养基上的菌落连成一片发现培养基上的菌

21、落连成一片, ,最可能的原因是最可能的原因是, ,应当怎样操作才可避免此现象应当怎样操作才可避免此现象? ?。高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌无菌无菌稀释涂布平板法稀释涂布平板法平板划线法平板划线法菌液浓菌液浓度过高度过高增大稀释倍数增大稀释倍数微生物的筛选与计数微生物的筛选与计数1.1.筛选菌株筛选菌株(1)(1)原则原则: :人为提供有利于目的菌株生长的条件人为提供有利于目的菌株生长的条件( (包括营包括营养、温度、养、温度、pHpH等等),),同时抑制或阻止其他微生物的生长。同时抑制或阻止其他微生物的生长。2.2.统计菌落数目的方法统计菌落数目的方法(1)(1)显微镜直接计数法显微镜直接计数法（

22、2 2）间接计数法（活菌计数法）间接计数法（活菌计数法） 例例2 2：下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数：下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验的实验, ,完成下列问题。完成下列问题。材料用具材料用具: :农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有培养基、盛有9 mL9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有无菌培养皿、盛有90 mL90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。无菌水的锥形瓶、恒温箱。(1)方法步骤方法步骤:倒平板倒平板:分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平分

23、别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板板,应在应在操作。操作。制备土壤稀释液制备土壤稀释液:取土样取土样10 g加入盛有加入盛有90 mL无菌水的无菌水的锥形瓶中锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL,转至盛转至盛有有9 mL的无菌水的试管中的无菌水的试管中,依次稀释到依次稀释到_稀释度。稀释度。酒精灯火焰旁酒精灯火焰旁107涂布涂布: :按照由按照由10107 710103 3稀释度的顺序分别吸取稀释度的顺序分别吸取0.1 mL0.1 mL进进行平板涂布行平板涂布, ,每个稀释度下每个稀释度下, ,无氮培养基应至少涂布无氮培养基应至少涂布个个平板平板

24、, ,牛肉膏蛋白胨培养基涂布牛肉膏蛋白胨培养基涂布个。个。培养培养:放入恒温箱内放入恒温箱内,在在2830下培养下培养3 d4 d。细菌的计数细菌的计数:当菌落数目稳定当菌落数目稳定,选取菌落数在选取菌落数在 的的平板进行计数。如果测定的平均值为平板进行计数。如果测定的平均值为50,则每克样品中的则每克样品中的菌落数是菌落数是。(稀释度是稀释度是105)(2)预期结果预期结果:相同稀释度下相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数落数(选填选填“多于多于”或或“少于少于”)无氮培养基上的数无氮培养基上的数目。原因是目。原因是_ _。31303005107多于多于无氮培养

25、基上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖无氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖,而而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存3.3.设置对照设置对照(1)(1)目的目的: :排除实验组中非测试因素对实验结果的影响排除实验组中非测试因素对实验结果的影响, ,提高实验结果的可信度。提高实验结果的可信度。(2)(2)方法方法: :证明培养基未被污染证明培养基未被污染, ,用空白培养基作对照用空白培养基作对照。证明选择培养基的选择作用证明选择培养基的选择作用, ,用牛肉膏蛋白胨培养基用牛肉膏蛋白胨培养基接种等量同种菌液作对照。接种等量同种菌液作对照

26、。例例3.3.下表是一种培养基的配方下表是一种培养基的配方, ,请回答请回答: :牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨NaClNaCl琼脂琼脂水水0.5 g0.5 g1 g1 g0.5 g0.5 g2 g2 g200 mL200 mL(1)(1)该培养基从物理性质来说该培养基从物理性质来说, ,属于属于培养基。培养基。(2)(2)无菌操作是微生物培养最基本的要求。无菌操作是微生物培养最基本的要求。对于培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、对于培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是。化学消毒化学消毒 灼烧灭菌灼烧灭菌 干热灭

27、菌干热灭菌紫外线灭菌紫外线灭菌 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法巴氏消毒法固体固体(3)(3)在平板划线法中在平板划线法中, ,每次灼烧接种环后每次灼烧接种环后, ,为什么要等其为什么要等其冷却后再进行划线冷却后再进行划线? ?。(5)以尿素为惟一氮源的培养基中加入以尿素为惟一氮源的培养基中加入指示剂指示剂,培培养某种细菌后养某种细菌后,如果如果pH升高升高,指示剂将指示剂将,利用这一利用这一特点特点,可准确地鉴定该种细菌能够分解尿素。可准确地鉴定该种细菌能够分解尿素。以免接种环温度太高以免接种环温度太高,杀死菌种杀死菌种酚红酚红变红变红1为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加为培

28、养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（）入（）A.较多的氮源物质较多的氮源物质 B.较多的碳源物质较多的碳源物质 C.青霉素类药物青霉素类药物 D.高浓度食盐高浓度食盐2下列操作不属于微生物的分离步骤的是下列操作不属于微生物的分离步骤的是A稀释稀释 B划线或涂布划线或涂布 C接斜面接斜面 D培养培养3影响微生物生长的主要环境因素是影响微生物生长的主要环境因素是A阳光、温度、水分阳光、温度、水分 B温度、水分、温度、水分、PH C水分、水分、PH、氧、氧 D温度、温度、PH、氧、氧4使用选择培养基的目的是（使用选择培养基的目的是（ ）A.培养细菌培养细菌 B.培养真菌培养真菌 C.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别5能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( )A.CO2和和N2 B.葡萄糖