组织化学及免疫组织化学教材

1、临床病理学特殊技术第1节 组织与细胞化学（histochemistry and cytochemistry）【概念】 运用物理和化学的技术方法显示组织细胞结构中的各种化学成分，并对这些化学物质进行定性、定位、定量，从而分析研究生物在生理或病理状态下细胞组织的代谢、机能及形态变化规律。细胞化学是研究细胞的化学成分及其在细胞活动中的变化和定位的学科。对细胞中的不同组分进行区别着色是细胞化学中最基础的工作。组织化学是指利用细胞或组织中的某些化学成分生成有色沉淀物，对细胞组织中的这些化学成分进行定性、定位和定量分析的特殊技术方法。细胞化学和组织化学的发展是分不开的，都是建立在细胞学、组织学以及生物化学

2、的基础上。【基本原理】 用于组织与细胞化学研究的染料可以是碱性的也可以是酸性的。酸性染料的生色基团是硝基和醌基；碱性染料的生色基团，包括着偶氮基吲胺基。染色的原理是基于在酸性染料中具有染色作用的阴离子和细胞内的碱性物质相结合，而碱性染料中的阳离子和细胞内的酸性物质相结合，所以酸性的细胞成分被碱性染料所染色，而碱性的细胞组分则被酸性染料染色。组织与细胞中的化学成分和其相应的底物呈一系列的化学反应，形成于显微镜下可见到的反应产物呈色。常见的细胞化学物质成分染色方法见表2-1，组织化学物质成分染色方法见表2-2。表2-1 细胞化学物质成分的鉴定显示物质染色方法染色结果用途DNA和/或RNA孚尔根反应

3、法DNA呈紫红色显示DNA及染色体倍体数分析甲绿-派郎宁法DNA呈绿色，RNA呈红色显示DNA与RNA吖啶橙荧光染色法红色荧光为DNA，绿色荧光为RNA或单链DNA用于鉴别肿瘤细胞与凋亡细胞糖元过碘酸雪夫反应（PAS）糖元和其它多糖物质呈红色，细胞核呈蓝色鉴别细胞内空泡的性质（糖原贮积病、糖尿病、骨髓瘤浆细胞胞浆内的Russell小体与核内的Dutcher小体；某些透明细胞肿瘤（横纹肌、平滑肌、软骨肉瘤、肝癌、汗腺瘤、化感器瘤）黏多糖（黏液物质）*高铁双胺（HID）染色显示硫酸化黏液物质。显示黏液物质与性质。中性黏液常见于胃粘膜、十二指肠腺、颌下和前列腺上皮；酸性黏液常见于皮肤、动脉、软骨、角

4、膜、肥大细胞、结肠与气管的杯状细胞。胃b型不完全化生的柱状细胞分泌硫酸黏液AB/PAS染色法酸性黏液呈蓝色、中性黏液呈红色、混合黏液呈紫色脂类（用新鲜组织，冰冻切片）苏丹染色脂肪呈桔红色显示脂滴和所有含脂细胞，用于鉴定脂肪变性、脂肪栓子、泡沫细胞以及肿瘤的诊断与鉴别诊断苏丹染色脂肪呈鲜红色油红O染色中性脂肪呈深橙红色锇酸染色脂肪呈黑色神经细胞尼氏小体甲苯胺蓝法细胞核淡蓝色，尼氏小体深蓝色，背景无色显示神经元尼氏小体的改变提示神经元变性与损伤酶类（用新鲜组织，冰冻切片）碱性磷酸酶 （钙钴法、-萘酯磷酸法） 该酶分布广泛，多见于有活跃转运功能的细胞膜内。钙钴法：碱性磷酸酶活性处呈黑色或棕黑色成熟中

5、性粒细胞呈阳性反应。 酶活性增高可见于：严重化脓性感染、急性淋巴细胞白血病、再生障碍性贫血、类白血病反应、多发性骨髓瘤、尤文肉瘤、恶性淋巴瘤、成骨肉瘤、滑膜肉瘤等。 酶活性减低可见于：病毒感染、急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、粒细胞缺乏症、恶性组织细胞增生症、传染性单核细胞增多症、恶性贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿症等萘酯磷酸法：酶活性处呈暗蓝色酸性磷酸酶 （硝酸铅法、Leder-Stutt改良偶氮法）多用于组织印片分布广泛，主要位于溶酶体内。以前列腺、吞噬细胞最丰富；亦存在于肝、肾、肾上腺及肠管上皮刷状缘。在单核细胞、组织细胞及中性粒细胞的胞浆中弥漫分布，而在T细胞及其前体中呈局限性点状阳

6、性反应前列腺癌、霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、表皮样癌强阳性。有助于急性单核细胞白血病、组织细胞性淋巴瘤和恶性组织细胞病的诊断；毛细胞白血病呈阳性反应，且不被酒石酸盐所破坏；高雪病细胞酸性磷酸酶染色（ACP）染色为阳性，尼曼一匹克病细胞ACP染色为阴性琥珀酸脱氢酶（硝基蓝四唑法）定位于线粒体内膜，心肌、肾小管、肝细胞含量最丰富。 利用琥珀酸脱氢酶使琥珀酸钠脱去H+而使硝基四氮唑蓝还原为蓝色的二硝基甲替沉淀于酶活性之处检查线粒体功能标志酶。 淋巴细胞、单核细胞、巨核细胞、血小板、该酶染色活性高。淋巴细胞白血病酶活性显著减低，而淋巴瘤时酶活性显著升高NADH脱氢酶位于线粒体内膜及胞浆中检查线粒

7、体功能，中心核病乙酰胆碱酯（Karnovsky-Roots亚铁氰化铜法、Lewis硫酸亚铜法）主要分布在神经元胞质和运动终板确定先天性巨结肠病的诊断与范围ATP酶ATP合成酶存在线粒体的内膜。不同pH染色可以识别型与型肌纤维 型与型肌纤维分布方式与数量的变化可帮助诊断Duchenne型与Becker型进行性肌营养不良及强直性肌营养不良氯乙酸盐酯酶可识别除嗜酸性细胞外的髓系前体细胞及肥大细胞可明确髓系及肥大细胞的反应性或瘤性增生，尤其在髓外浸润时神经内分泌颗粒亲银染色（Fontana-Masson法 ）不需外加还原剂，在黑暗中即有还原银盐的能力协助诊断类癌及黑色素细胞起源的肿瘤嗜银染色（Grim

8、elius法） 需加外源性还原剂或在光线存在时才有还原能力用于诊断神经内分泌肿瘤，如嗜铬细胞瘤、副节瘤、Merkel细胞瘤、甲状腺髓样癌及小细胞肺癌* 黏多糖类是蛋白多糖分子中的糖链部分，是黏液（人体的粘膜上皮分泌出来的湿滑液体）的主要化学成分。由于含酸基的不同，而又分为中性黏多糖（中性黏液）、酸性黏多糖（酸性黏液）和混合性黏多糖（混合性黏液）。多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。表2-2 组织化学物质成分的鉴定显示物质染色方法染色结果用途胶原纤维及肌纤维Van Gieson染色 酸性品红用于染胶原纤维，而苦味酸能使肌纤维黄染胶原纤维在疏松结缔组织中排列成束

9、,彼此交织吻合，纤维束常有分支胶原纤维是结缔组织的一个主要组成成分，也是临床上许多病理变化的特征如瘢痕、肺纤维化、动脉粥样硬化、胶原病等肌纤维和纤维蛋白早期病变心肌染色（复红染色、PAS染色）碱性复红：正常心肌呈黄色或黄棕色，缺氧心肌、红细胞呈红色，胞核呈蓝色酸性复红：缺氧心肌呈红色，胞核呈紫色，其它组织呈绿色PAS法：心肌中糖原呈红色，但量少缺氧心肌对酸性或碱性复红有特别亲和力PAS可检测缺氧心肌中糖原减少横纹肌染色 磷钨酸苏木素染色PTAH显示横纹肌细胞及胶质细胞胞浆内的微丝；将纤维蛋白染成蓝色细丝用于低分化间叶性肿瘤的诊断与鉴别诊断、明确其横纹肌来源的肿瘤以及微血栓弹性纤维WEIGERT

10、S间苯二酚-碱性品红染色弹性纤维广泛分布于纤维结缔组织，尤其集中分布于椎弓间黄韧带、声带、肺泡壁、动脉壁及弹性软骨等处。弹力纤维呈暗蓝色，胶原纤维呈红色，肌纤维呈黄色。单条分布，有分支，并交织成网用于证明肺气肿弹性组织萎缩、动脉粥样硬化时的弹性纤维变薄和缺失及其他血管疾病网状纤维银染（有Comori法，Wilder及Gordon和Sweet法等）网状纤维（染成黑色）主要分布于疏松结缔组织于其它组织的交界处，如上皮组织的基膜中、脂肪组织和毛细血管周围。纤维较细，有分支，它们常聚集成粗细不等的束，彼此交织成网状鉴别上皮与非上皮肿瘤、原位癌与浸润癌、某些双向分化的间叶组织肿瘤（滑膜肉瘤、间皮瘤、透明

11、细胞肉瘤、间变性大细胞淋巴瘤）结缔组织复合染色Masson 三色染色法（丽春红、酸性复红、橘黄、亮绿、醋酸）胶原纤维蓝色，肌纤维红色、红细胞橘红色可判断器官组织纤维化程度与动脉硬化程度；肾脏临床病理活检染色；糖尿病器官病变检查；间叶组织肿瘤鉴别诊断与肿瘤浸润范围Mallory三色染色法（重铬酸钾、苯胺蓝、橘黄、酸性复红）胶原纤维、网状纤维呈蓝色；神经胶质纤维、肌纤维呈红色；髓鞘、红细胞呈橘红色；软骨、黏液、淀粉样物呈淡蓝色胶原、网状和弹性纤维的三联染色（高锰酸钾、硫酸、维多利亚蓝、丽春红、氨性银改良染色液）胶原纤维呈红色，网状纤维呈黑色，弹性纤维呈绿色，肌肉和红细胞呈淡黄色基底膜PAS法、六胺

12、银法 AFOG法（苯胺蓝、桔黄、酸性品红）基底膜是上皮基底面与深部结缔组织间的薄膜，PAS呈红色，六胺银法呈黑色，AFOG法：基底膜、胶原纤维显示不同程度的蓝色，红白血球细胞及背景呈桔黄色，管型蛋白呈鲜红色可以观察疾病尤其是肿瘤的进展和突破基底膜的程度、可显示肾炎尤其是膜性肾病基底膜的变化神经纤维镀银染色法 镀银染色可将神经纤维染成黑色可以清晰显示神经纤维的形态与交错成网的细丝与异常改变。可显示石蜡切片大脑皮质神经元神经髓鞘Weil法髓鞘呈蓝黑色协助诊断脱髓鞘疾病如：CNS白质疾病、多发性硬化、中毒（一氧化碳、汞、酒精中毒）、苯丙酮尿症、损伤和缺氧等Lxol固蓝染色法髓鞘呈蓝色变性髓鞘染色 M

13、arch法、Swank与Devenport法等正常髓鞘不着色，变性髓鞘才着色淀粉样物碱性刚果红法淀粉样物粉红到橙红色，在偏光镜下苹果绿色双折光。荧光显微镜下见桔黄到红色荧光原发性淀粉样物沉积常见于多发性骨髓瘤、B细胞肿瘤，继发性则常见于慢性炎症、类风湿、霍奇金淋巴瘤；局部沉积见于甲状腺髓样癌和型糖尿病等甲紫法类淀粉物呈紫红色，其它结构呈紫或蓝色色素分为人为色素和自生性色素。人为色素是由于固定剂与组织中某些成分相作用而产生，例如福尔马林色素等。在某些病理情况下，细胞代谢所产生的沉着的色素，如脂褐素、黑色素、含铁血黄素、嗜银颗粒及组织内的微量金属离子等，需要一些特殊染色加以证明（表2-3）。表2-

14、3 色素的鉴定显示物质染色方法染色结果用途黑色素Masson-Fontana氨银法硫酸亚铁法多巴（Dopa）反应黑色素具有还原硝酸银的能力全身性见于Addison病、大量雌激素治疗、慢性肝病病人、孕妇和口服含雌激素避孕药的妇女、尿黑酸尿症。局限性黑色素增多常见于色素痣及恶性黑色素瘤等胆色素Halls胆红素染色法胆红素显翠绿色胆色素是铁卟啉化合物各种分解代谢产物的总称，主要为胆红素，还有胆绿素、胆素原和胆素。胆色素主要随胆汁排出体外。局部胆色素淤积和全身黄疸常见于肝炎、肝内胆汁淤积综合征、血色病、肝胆管的肿瘤和结石等含铁血黄素普鲁士蓝反应盐酸使结合于铁的蛋白质分离，以便铁氰化钾特异地与三价铁结合

15、形成亚铁氰化物局限性或全身性出血性疾病、成高铁红细胞贫血及其它慢性病所致贫血和全身性铁超载如慢性溶血、多次输血及血色病与损伤脂褐素Schmord法PAS法早期能被苏丹染料染色，晚期因具有还原能力，可用Schmord法或者PAS显示，Schmorl法呈蓝绿色。PAS法呈大小不一的粉红至红色颗粒，细胞核呈蓝色细胞器的残留小体，也可以说脂褐素是类脂的氧化产物钙化McGee-Russell核固红染色Von Kossa法组织中钙盐沉积处呈红色，硝酸银与钙盐的复分解反应形成可还原的银盐。在强光或紫外光的照射下生成金属银营养不良性钙化常发生于损伤或坏死组织，如动脉粥样硬化、结核、寄生虫病、心瓣膜病及肿瘤等，

16、转移性钙化后者常发生于高血钙患者的正常组织 在组织切片上，显示细菌最常用的染色法是革兰染色法。而分枝杆菌有脂性被膜 ，革兰染色不易着色，石碳酸复红是最常用的经典染色方法。大部分霉菌虽可在HE染色切片中显示出来，但有些则需要特殊染色法，如PAS显示假丝酵母（旧称白色念珠）菌等，常见病原微生物染色方法见表2-4。表2-4 病原微生物的鉴定病原染色方法染色结果用途真菌染色Grocott六胺银染色法真菌均被着色，菌丝和孢子呈黑褐色，细胞核呈红色，背景呈淡绿色新型隐球菌菌壁深黑色，中间为空白区； 曲霉的孢子和菌丝均被染为深黑色、菌丝呈多结节分布，呈45度角分枝高碘酸复红染色法真菌呈紫红色，红细胞呈浅黄色

17、PAS染色可显示真菌、阿米巴及毛滴虫属卡氏肺孢子菌（旧称卡氏肺囊虫）乌洛托品硝酸银染色（染原虫）甲苯胺蓝染色及环六亚甲胺银染色（染囊虫）HE染色组织切片肺泡内泡沫状嗜伊红物质的团块富含原虫；乌洛托品硝酸银染可查见直径68m的黑褐色圆形或椭圆形的囊体常见于免疫缺陷病、艾滋病、恶性肿瘤、接受免疫抑制剂治疗的患儿、早产儿和新生儿。卡氏肺孢子菌肺炎支气管肺泡灌洗术和支气管肺活检标本染色卡氏肺孢子菌发现率很高细菌染色革兰染色（草酸铵结晶紫，碘液，酒精，石炭酸复红）保留紫色者为革兰阳性菌（G+）。被酒精脱色复染成红色者为革兰阴性菌（G）G+菌：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽

18、胞杆菌等G菌：百日咳鲍特菌（旧称百日咳杆菌）、大肠埃希菌（旧称大肠杆菌）、伤寒沙门菌（旧称伤寒杆菌）、痢疾志贺杆菌、霍乱弧菌、脑膜炎奈瑟菌（旧称脑膜炎双球菌）、淋病奈瑟菌（旧称淋病双球菌）等Gram 碱性复红结晶紫染色法革兰阳性细菌呈蓝色，阴性细菌呈红色，细胞核呈红色抗酸杆菌染色法（石炭酸复红，盐酸酒精脱色，美蓝复染）抗酸杆菌呈红色结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌阳性幽门螺杆菌（Hp）甲苯胺蓝染色法、Warthin-Starry银染色法、Giemsa 染色法Hp呈弯曲状，S状，短弧状及杆状，位于胃小凹或胃小凹分泌物中，亦可见于上皮胞浆中螺旋体染色Giemsa 染色法螺旋体及细菌呈蓝到淡紫色，细胞浆呈

19、蓝色，红细胞呈橘黄色梅毒螺旋体折光性低与透明液体相似，在高倍显微镜下才能查见Ryu 碳酸钠碱性复红法螺旋体呈红色病毒包涵体染色Giemsa法pH5.0时SARS病毒包涵体（胞浆内）成鲜红色pH9.5时合胞病毒、巨细胞病毒包涵体（核内）呈深紫色至蓝色Macchiavello改良法SARS病毒包涵体于肺组织细胞浆内，呈鲜红色，细胞核呈蓝色伊红和甲基蓝改良法合胞病毒和巨细胞病毒包涵体着染深蓝色或绿色乙型肝炎表面抗原染色地衣红染色法HBsAg阳性呈棕色，以此可判定肝细胞内HBV感染维多利亚蓝一核固红染色法HBsAg阳性呈蓝绿色，细胞核呈红色效果优于地衣红染色法第2节 免疫组织化学（immunohist

20、ochemistry）一、 概念与原理【概念】 应用免疫学抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织或细胞内抗原，对其进行定位、定性及定量的研究方法。【原理】 通过抗原抗体反应，用化学反应使标记抗体的显色剂如荧光素、酶、金属离子、同位素等显色来确定组织细胞内抗原物质如多肽、蛋白质与酶。二、 临床常用诊断抗体免疫组化和免疫细胞化学在病理学外检工作中可用于对不同来源，常规HE以及组织细胞化学方法难以诊断的疾病特别是肿瘤进行确诊和鉴别诊断。以下主要介绍淋巴造血系统疾病、软组织肿瘤和骨肿瘤、乳腺疾病、上皮来源肿瘤、器官特异性或器官相关临床常用诊断抗体标记（转移性肿瘤起源判

21、断以及其他临床常用诊断抗体（见表2-5表2-10）。 表2-5 淋巴造血系统疾病常用抗体抗体名称来源与阳性产物定位正常表达及分布病理应用CD2绵羊红细胞受体。定位于细胞膜/细胞高尔基器成熟T细胞及胸腺细胞膜表面主要应用于T淋巴细胞淋巴瘤的诊断CD3T细胞抗原受体（TCR）定位于细胞浆正常T淋巴细胞阳性，部分活化的NK细胞阳性T淋巴细胞瘤、NK细胞瘤阳性，是比较可靠的特异的标记物CD4辅助T淋巴细胞抗原定位于细胞膜辅助/诱导T淋巴细胞、髓细胞及组织细胞染色阳性绝大部分蕈样霉菌病、成人T淋巴细胞白血病/淋巴瘤阳性；大部分外周T细胞淋巴瘤阳性用于真性组织细胞性淋巴瘤的辅助诊断，但不能作为肿瘤性和反应

22、性T细胞的鉴别指标CD5T细胞上的一种表面标志定位于细胞膜正常及胸腺T淋巴细胞以及未成熟阶段的B淋巴细胞阳性T淋巴细胞性淋巴瘤/白血病的辅助诊断标记物。在慢性B淋巴细胞白血病和套细胞淋巴瘤中其染色结果为特征阳性，约10%的弥漫大B细胞性淋巴瘤也可阳性CD7T淋巴细胞抗原定位于细胞膜主要表达于绝大多数T细胞、胸腺细胞和NK细胞用于T淋巴细胞淋巴瘤的诊断，尤其对T淋巴细胞系中前T淋巴母细胞性淋巴瘤的诊断有特定的诊断价值CD8细胞毒性T淋巴细胞抗原定位于细胞膜在细胞毒性T淋巴细胞、脾脏窦组织及部分NK细胞染色阳性用于外周T淋巴细胞淋巴瘤和脾脏的各种血管性疾病CD10共同急性淋巴母细胞白血病抗原定位于

23、细胞膜在粒细胞、未成熟的淋巴细胞生发中心细胞阳性滤泡性淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、一些弥漫大B细胞性淋巴瘤、前驱B淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、滤泡性T细胞淋巴瘤呈阳性CD15X-半抗原定位于细胞膜/细胞高尔基器粒细胞染色、巨细胞病毒感染的细胞染色阳性几乎所有的慢性髓性白血病阳性；经典型霍奇金淋巴瘤的R-S细胞、少部分T/B淋巴细胞淋巴瘤中的大细胞、部分组织细胞及组织细胞肿瘤阳性CD20B淋巴细胞分化抗原 定位于细胞膜正常B淋巴细胞阳性，包括B淋巴细胞的不同分化阶段；原始前B淋巴细胞阴性B淋巴细胞淋巴瘤、结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤阳性。少数T淋巴细胞性淋巴瘤阳性CD

24、23细胞膜表面糖蛋白定位于细胞膜表达于外周血细胞的某些亚群、B淋巴细胞和EBV转染的B淋巴瘤细胞系绝大多数低分化B细胞淋巴瘤，包括慢性淋巴细胞白血病CD23染色阳性。标记单核细胞和树突状细胞CD30活化淋巴细胞抗原定位于细胞膜/细胞高尔基器表达于活化的T/B细胞、R-S细胞、部分淋巴滤泡周围的细胞淋巴滤泡周围大的淋巴细胞、活化的淋巴细胞（免疫母细胞），霍奇金淋巴瘤的R-S细胞，间变性大细胞淋巴瘤阳性，如感染的吞噬细胞、弓形虫淋巴结炎、Kikuchi淋巴结炎。浆细胞也会出现阳性CD43T细胞膜表面的跨膜糖蛋白 定位于细胞膜（有时细胞高尔基器阳性）正常T淋巴细胞、髓细胞、组织细胞、EBV感染的B淋

25、巴细胞阳性T淋巴细胞及其肿瘤的标记物。阳性表达于T淋巴细胞淋巴瘤、低分化的B细胞淋巴瘤、急性B淋巴细胞性白血病、急性T淋巴细胞性白血病、间变性大细胞淋巴瘤和部分骨髓瘤/粒细胞肉瘤CD45ROCD45的一种异构体定位于细胞膜/浆48%外周血T细胞淋巴细胞，34%CD4+细胞可作为反应性与肿瘤性T细胞标记；一些T细胞淋巴瘤可以是CD3阴性，但CD45RO阳性CD56神经细胞粘附分子定位于细胞膜在NK细胞、NK样T淋巴细胞以及神经外胚层起源的细胞NK细胞淋巴瘤比较好的标记物CD57（Leu7）NK细胞标记物定位于细胞膜/细胞浆NK细胞、NK样T淋巴细胞以及生发中心T淋巴细胞滤泡中心细胞性淋巴瘤常有N

26、K细胞表达，亦可用于神经内分泌细胞和肿瘤的诊断CD79aBCR-CD79复合物，介导BCR途径的信号转导定位于细胞浆不同分化阶段的B淋巴细胞和浆细胞染色阳性。生发中心B细胞弱阳性B淋巴细胞淋巴瘤、结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤、白血病、浆细胞瘤阳性CD99MIC基因的产物定位于细胞膜未成熟的T淋巴细胞、胰岛细胞、睾丸支持细胞以及卵巢颗粒细胞T淋巴细胞性淋巴瘤、急性淋巴母细胞性白血病尤文肉瘤和原始神经外胚层肿瘤呈阳性表达CD138跨膜肝素硫酸脂蛋白聚糖定位于细胞膜前B淋巴细胞、浆细胞、正常的上皮细胞、血管平滑肌细胞以及内皮细胞在B淋巴母细胞性淋巴瘤、浆细胞淋巴细胞性淋巴瘤、

27、浆细胞瘤以及浆母细胞淋巴瘤，尤其间变性浆细胞瘤的诊断有较大的帮助GranzymeBCD8+细胞毒性T细胞分泌物质，促进细胞凋亡 定位于细胞浆在NK细胞、CD8+的T淋巴细胞中阳性用于NK与NK细胞样淋巴瘤辅助诊断。间变性大细胞性淋巴瘤常阳性，在肠病型、脂膜炎样、肝脾型T淋巴细胞性淋巴瘤中阳性表达。而霍奇金淋巴瘤常阴性MPO髓过氧化物酶定位于细胞浆在正常组织中和各种髓样细胞增生症中，均匀较强表达鉴别髓样细胞肿瘤和淋巴瘤；急性早幼粒细胞白血病（FAB型M3）通常与该染色体易位相关Pax-5PAX基因家族中核转录因子，B淋巴细胞系中特异性活化蛋白定位于细胞核在前体B淋巴细胞、成熟B淋巴细胞中阳性表达

28、，但浆细胞是阴性细胞诊断及鉴别诊断B淋巴细胞性白血病和B淋巴细胞性淋巴瘤。T淋巴细胞性淋巴瘤及白血病阴性表达。淋巴浆细胞样淋巴瘤中阳性表达，而浆细胞瘤和骨髓瘤中阴性表达Perforin称穿孔素或溶细胞素，可插入靶细胞内构成大量的小孔，导致靶细胞裂解/凋亡定位于细胞浆（颗粒状）是一种分子量为67kD，存在于细胞毒性T淋巴细胞（CTL）和NK细胞胞质的细胞毒颗粒中的糖蛋白应用在NK细胞淋巴瘤、NK细胞样T淋巴细胞性淋巴瘤的辅助诊断在肠病型、脂膜炎样、肝脾 型T淋巴细胞性淋巴瘤、间变性大细胞性淋巴瘤阳性表达TdTDNA聚合酶定位于细胞核表达于未成熟的淋巴细胞，包括T和B淋巴细胞系，骨髓中原始血细胞也

29、阳性表达在淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病呈特异性阳性。在富含未成熟的T细胞的胸腺瘤中诊断和研究有帮助。在其他小圆细胞肿瘤如胚胎性横纹肌肉瘤中TdT染色阴性EBV、LMP-1 EBV潜伏膜蛋白 定位于细胞膜/浆用于多种组织病变、肿瘤中的EB病毒感染的检测。在霍奇金淋巴瘤中阳性表达，在T淋巴细胞性淋巴瘤中为阴性表 2-6 软组织肿瘤和骨肿瘤抗体标记抗体名称来源与阳性产物定位分布病理应用中间丝标记结蛋白（desmin）相对分子质量为53 KD的中间丝（骨骼蛋白） 定位于细胞浆在平滑肌和横纹肌可检测到结蛋白特征性的表达于肌细胞及肌细胞相关的肿瘤，并可见于原始神经外胚叶瘤、促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤、上皮

30、样肉瘤、恶性外周神经鞘膜瘤波形蛋白（vimentin）波形蛋白是中间丝的其中一种蛋白质。维持细胞的形状、细胞质的完整性及稳定细胞骨架内的作用。定位于细胞浆主要存在于成纤维细胞和来自胚胎间充质的细胞是间叶来源肿瘤的良好标记物，波形蛋白不具备细胞种类的特异性非中间丝蛋白的肌性标记物肌动蛋白（actin）广谱肌动蛋白，除结蛋白外第二个最有用的区分肌源分化的蛋白成分定位于细胞浆可识别骨骼肌、心肌和平滑肌；也能在外皮细胞、肌上皮细胞和肌纤维母细胞中表达Actin （HHF35）主要用于检测平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、肌上皮瘤等。还能识别肉芽组织、瘢痕组织、结节性筋膜炎和纤维瘤病中的肌纤维母细胞肌红

31、蛋白（myoglobin）存在于骨骼肌和心肌肌浆中的可溶性蛋白。 定位于细胞浆存在于正常骨骼肌和心肌、横纹肌在横纹肌肉瘤以及含有横纹肌成分的肿瘤（蝾螈瘤、Wilms瘤、恶性中胚层混合瘤和畸胎瘤）中表达；肌红蛋白不存在于平滑肌和平滑肌肿瘤中，可区别肿瘤的横纹肌源性还是平滑肌源性肌 原 调 节 蛋 白 （myoD1）myf基因（一种控制骨骼生长的分化基因）产物，定位于细胞核只在胚胎横纹 肌细胞中表达是非常敏感与可靠的横纹肌肿瘤标记，MyoD1主要标记小细胞和原始横纹肌肿瘤细胞横纹肌肉瘤标志物 （Myf-3）Myf-3和MyoD1为同基因产物 定位于细胞核 生肌因子，可以介导成纤维细胞向肌细胞分化是

32、横纹肌肉瘤的有意义的标记物，而神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、Wilm瘤等肿瘤阴性表达（用于其鉴别诊断）肌浆蛋白（myogenin）属于生肌调节家族成员 定位于细胞核肌细胞发生所需的转录因子之一Myogenin主要标记去分化的肿瘤细胞，横纹肌肉瘤、Wilm瘤阳性，而尤文氏肉瘤与神经母细胞瘤阴性肌球蛋白（myosin）骨骼肌球蛋白重链定位于细胞浆 骨骼肌标记骨骼肌来源的肿瘤，特异性高，但敏感性低 钙调素结合蛋白（caldesmon）与肌动蛋白和原肌球蛋白结合的蛋白 定位于细胞浆对平滑肌细胞，肌纤维细胞及肌上皮分化的细胞有特异性可以用于从真性平滑肌瘤中鉴别肌纤维母细胞瘤，在结肠直肠肿瘤中此抗体是区分

33、纤维细胞和肌纤维细胞的一个有意义的标记物血管内皮标记物第因子相关抗原由内皮细胞和巨核细胞合成的一个糖蛋白，定位于细胞浆广泛存在于血管上皮、肝脏、脾窦上皮、及淋巴内皮细胞 是血管内皮细胞源性良恶性肿瘤的特异性标记。少数副睾、子宫和输卵管的腺瘤样瘤也有表达转换凝血酶thrombomodulin（TMN）胞膜糖蛋白 定位于细胞浆内皮细胞、间皮细胞、骨母细胞、单核巨噬细胞内皮性分化的一个敏感指标，尤其是在低分化血管恶性肿瘤中；可在某些转移癌和多数间质肿瘤中表达骨母细胞分化的标记骨钙蛋白骨内低分子量的非胶原基质蛋白， 定位于细胞核存在于骨母细胞和幼稚细胞中对骨肉瘤具有较好的特异性，免疫反应阳性骨连接蛋白

34、特异性非胶原基质蛋白定位于细胞核存在于骨母细胞和幼稚细胞中在骨母细胞性肿瘤诊断中其敏感性为90%，特异性为54%表 2-7 乳腺疾病常用抗体标记抗体来源与阳性产物定位分布病理应用肌上皮标记actin见表2-6见表2-6平滑肌肌动蛋白（SMA、-SMA）和肌特异性肌动蛋白（MSA，HHF-35）均是识别乳腺肌上皮的常用标记物。但和血管平滑肌及间质中的纤维母细胞有交叉反应平滑肌肌球蛋白重链（SM-MHC）平滑肌球蛋白重链定位于细胞浆平滑肌、正常乳腺小叶与导管的肌上皮细胞识别乳腺肌上皮细胞平滑肌收缩调节蛋白 calponin平滑肌收缩调节蛋白。定位于细胞浆平滑肌以及肌上皮细胞对肌上皮细胞有较高的敏感

35、性，也可以显示小血管，与间质中的肌纤维母细胞有交叉反应。但阳性率比SMA低P63P53基因家族的一个成员定位于细胞核表达于前列腺、皮肤、子宫颈等的基底细胞在乳腺组织中是敏感和相对特异性的肌上皮标记物。它在肌纤维母细胞和血管中不表达，是非常实用的标记物乳腺上皮细胞标记物大囊肿性疾病液体蛋白-10（GCDFP-15）乳腺囊肿液中的一种组成蛋白任何具有大汗腺特征的细胞以及乳腺、涎腺、汗腺和前列腺除了皮肤附属器、涎腺、前列腺癌、外阴Paget病外，其他癌很少表达。该抗体对诊断乳腺癌有98%99%的特异性，是乳腺癌与其他类型癌鉴别诊断的抗体34E12高分子量细胞角蛋白（5068KD） 定位于细胞浆在乳腺

36、导管的定向干细胞、中间腺细胞、中间肌细胞中表达，在正常乳腺肌上皮细胞和腺上皮细胞亦阳性表达激素受体雌激素受体（oestrogen receptor，ER） （临床使用检测ER抗体大多是识别亚型的）人ER有两个亚单位，ER和ER。ER是一个DNA结合激素依赖性蛋白，定位于细胞核正常乳腺上皮表达ER，少量表达ER ER转录物的表达是随着肿瘤的炎症和分级而改变的，乳腺增生的病变和浸润前的肿瘤ER表达减少，而ER表达增加。ER可以在ER阴性的肿瘤中检测出来。阳性者具有内分泌治疗反应的能力孕激素受体（progesterone receptor，PR）一种雌激素调节蛋白，定位于细胞核在正常乳腺组织中有95

37、%激素受体阳性的细胞合成ER和PR在老年女性中可见到PR阳性的细胞互相连接，有时累及整个小叶；口服避孕药的妇女PR表达在整个周期中稳定增加。阳性表达乳腺癌病人内分泌治疗有效，预后好表 2-8上皮细胞以及角蛋白相关标记物抗体名称来源与阳性产物定位分布病理应用细胞角蛋白（CK） AE1/AE3广谱细胞角蛋白（CK Pan）定位于细胞浆可以识别绝大部分酸性细胞角蛋白和碱性细胞角蛋白包括CK10、CK15、CK16、CK19和CK1、CK2、CK3、CK4、CK5、CK6、CK8用于标记上皮及上皮来源的肿瘤，特别有助鉴别转移性上皮肿瘤细胞角蛋白7 （CK7）54KD的碱性细胞角蛋白， 定位于细胞浆标记

38、大多腺上皮和移行上皮；卵巢、肺和乳腺上皮阳性，但结肠、前列腺和胃肠道上皮阴性可用于肺癌（CK7+）与结肠癌（CK7-）的鉴别34E12见表2-7主要表达于鳞状上皮、导管上皮、和其他复层上皮。呼吸道上皮中含有分子量为40KD、50KD、56KD及58KD等角质抗原可以标记呼吸道鳞状上皮发生的肿瘤；是前列腺基底细胞癌的特异性标记物，还可用鉴别乳腺导管及小叶上皮来源的肿瘤CK8/CK18（低分子量CK）识别的分子量为45KD和52KD的细胞角蛋白 定位于细胞浆存在与许多导管上皮和腺上皮；正常淋巴结的树突状细胞主要用于腺癌的诊断，鳞状细胞及其来源肿瘤一般不表达。间皮肿瘤、滑膜肉瘤、上皮样肉瘤、恶性周围

39、神经鞘的腺体部分、间变性浆细胞瘤及间变性大细胞淋巴瘤也可表达细胞角蛋白19（CK19）分子量为40 000，定位于细胞浆存在于正常上皮和各种上皮来源的肿瘤除了肝细胞癌和肾上腺皮髓质肿瘤外，其他癌均阳性；主要用于转移性腺癌和肝癌的鉴别CK20相对分子量为46KD定位于细胞浆存在于正常的胃肠道上皮、移行上皮、Merkel细胞主要用于标识胃肠道上皮、移行上皮、Merkel细胞来源的肿瘤CK5/6CK5是相对分子量为58KDCK6是相对分子量为56KD定位于细胞浆CK5在鳞状上皮的基底细胞、腺上皮、肌上皮和间皮表达；CK6表达于鳞状上皮可作为普通导管/小叶增生与导管原位癌和小叶原位癌鉴别的有用标记物。

40、高度增生的鳞状上皮强表达，导管原位癌和小叶原位癌阴性CAM5.2和35H11针对CK8的2种不同克隆的抗体，前者又称极低分子量CK定位于细胞浆腺上皮的基底细胞、肌上皮主要表达于单层上皮来源的癌，在一些CK（pan）不表达的低分化上皮源性肿瘤有表达上皮膜抗原（EMA）广泛分布在各种上皮细胞膜上的糖蛋白 定位于细胞膜广泛分布在各种正常上皮细胞膜上，对内脏腺上皮的表达优于细胞角蛋白在滑膜肉瘤、间皮肉瘤、上皮样肉瘤、某些恶性周围神经鞘膜瘤（有神经束膜细胞分化）、脊索瘤、副脊索瘤和脑膜瘤中表达上皮相关抗原MOC31存在大多数正常和肿瘤性上皮细胞表面的糖蛋白。定位于细胞膜存在于大多数正常上皮和上皮性肿瘤细

41、胞表面大多数腺癌为阳性，间皮瘤常为阴性。是区别腺癌（100%）和间皮瘤（4.3%）胆管细胞癌的有效标志物MNF-116许多CK共同的抗原决定簇 定位于细胞浆正常表达于复层扁平上皮、腺上皮、平滑肌、淋巴结树突状细胞和浆细胞等上皮肿瘤的一线标记物。标记鳞癌、小细胞癌、肉瘤样癌/梭形细胞癌、腺癌、间皮瘤（纤维状细胞）等Vs38c浆细胞标记物，定位于细胞浆黑色素细胞病变，神经内分泌肿瘤以及许多上皮性肿瘤阳性检测胞浆内网状结构，可以标记浆细胞、黑色素细胞、黑色素瘤和部分上皮细胞。用于判断骨髓或其他组织的骨髓瘤和浆细胞瘤，其敏感性优于CD138表2-9 器官特异性或器官相关标记物抗体名称来源与阳性产物定位

42、分布病理应用卵巢癌特异性标记CA125一种与卵巢癌相关的膜表面糖蛋白定位于细胞浆/膜是卵巢浆液性腺癌的主要标记，部分胃肠癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌亦可有阳性表达肺肿瘤的特异性标记a1抗胰蛋白酶（a1-AT）定位于细胞浆血清与组织中组织细胞、细支气管肺泡癌Clara细胞呈阳性表达肺泡表面活性物质（sp）肺泡型细胞分泌的一种脂蛋白 定位于细胞浆分布于肺泡液体分子层的表面，即在液-气界面之间用于鉴定型肺上皮及其肿瘤，特异性强。而肺鳞状细胞癌及其他非肺来源的癌不表达乳腺癌特异性标记巨囊液蛋白-15（GCDFP-15）15KD的单链蛋白，常见于囊泡病的囊泡液中定位于细胞浆是高度特异和敏感的乳腺癌标志。但它

43、还可在1/3的唾腺和汗腺肿瘤中表达乳腺球蛋白（Mammaglobin）上皮分泌的一种糖蛋白 定位于细胞浆乳腺导管和小叶上皮；正常子宫内膜腺体原发性乳腺癌高表达，是检测乳腺癌微小转移癌的理想标记。但子宫内膜癌、皮肤附件肿瘤、唾液腺肿瘤、卵巢癌也可有不同程度的表达甲状腺特异性标记甲状腺转录因子（TTF-1）NKX2转录因子家族成员之一定位于细胞核表达于甲状腺腺上皮和肺的上皮细胞中甲状腺滤泡性癌、乳头状癌和髓样癌均阳性表达，但间变性癌不表达。大多数肺小细胞癌、原发性和转移性肺腺癌、少部分大细胞未分化肺癌、大多数非典型性类癌也阳性表达甲状腺球蛋白（TG）甲状腺滤泡细胞合成的670KD的糖蛋白定位于细胞

44、浆正常甲状腺滤泡上皮、滤泡胶质所有类型的甲状腺瘤和甲状腺癌均阳性表达；而髓样癌不表达降钙素（calcitonin）甲状腺C细胞分泌的一种多肽定位于细胞浆甲状腺C细胞标记80%的甲状腺髓样癌，2/3的喉类癌前列腺特异性标记前列腺特异性抗原（PSA）由前列腺上皮细胞合成的33KD的糖蛋白定位于细胞浆正常、增生和肿瘤性前列腺上皮细胞95%的前列腺癌阳性表达；还有1/3乳腺癌与汗腺肿瘤呈阳性表达前列原酸性磷酸酶（PsAP）由前列腺上皮细胞合成的一种酶定位于细胞浆正常和增生的前列腺上皮、导管上皮及腔内分泌物在前列腺癌中表达较特异且敏感，但直肠类癌、膀胱腺癌、女性的近尿道腺体、汗腺、乳腺癌、极少的胰岛细胞

45、瘤、一些唾液腺肿瘤和极少的肾细胞癌也可表达前列腺特异性膜抗原（PSMA）是110KD的型穿膜蛋白定位于细胞膜/浆前列腺分泌性腺泡上皮，亦可表达于某些上皮细胞良性病变中良性前列腺上皮上少量表达，但在前列腺癌上有更多表达，表达程度与肿瘤的分化程度成反比。在脑、唾液腺、近侧肾小管、十二指肠粘膜中神经内分泌细胞亦可表达NKX3.1雄激素调节的前列腺特异性的同源框基因产物定位于细胞核前列腺、唾液腺、支气管粘膜下层腺体及睾丸支持细胞前列腺癌中的表达增强，低分化前列腺癌的表达强于高、中分化前列腺癌胃肠道特异性标记CDX-2肠上皮细胞特异性转录因子定位于细胞核是肠上皮细胞重要的标记物95%的浸润性结肠癌强表达

46、CDX-2，卵巢黏液腺癌和一些神经内分泌肿瘤也可强表达该种抗原结肠癌相关抗原（CA19-9）是一种细胞表面糖蛋白定位于细胞膜/浆正常胎儿胰腺、胆囊、肝、肠和正常人胰、胆管上皮在大多数消化道肿瘤中阳性表达，尤其胰腺癌高水平表达，可作为胰腺癌诊断的重要参考指标，同时也是结肠癌预后的指标CD117（c-kit）是一种细胞表面的酪氨酸激酶受体蛋白，定位于细胞膜参与造血干细胞、肝细胞、黑素瘤细胞和胃肠道间质细胞的发育95%的胃肠道间质肿瘤细胞阳性，是诊断该肿瘤必不可少的条件之一。小细胞肺癌、间皮瘤、肺母细胞瘤、精原细胞瘤、恶性黑色素瘤均可表达绒毛蛋白（villin）是与胃肠道细胞刷状缘微丝相关联的细胞骨

47、架蛋白定位于细胞浆/膜正常分布于肠上皮和肾近曲小管上皮绝大多数胃肠道肿瘤（包括胰腺和胆管）、大部分肺腺癌、50%肝细胞癌与卵巢黏液性腺癌呈阳性表达；可用于肠上皮来源肿瘤与非肠上皮肿瘤的鉴别诊断，亦可作为胃肠道神经内分泌肿瘤诊断的参考指标肝细胞癌相关标记Hep-Per-1存在于正常人肝细胞和大多数的肝细胞癌中定位于细胞浆主要位于肝细胞胞质内，呈均匀颗粒状分布，有时呈环状分布，胆管或非肝实质细胞通常不染色其特异性和敏感性列各种肝细胞性标记物之首。对肝细胞性肿瘤，包括HCC、肝细胞腺瘤和肝母细胞瘤的敏感性为75%90%, 约50%的胃腺癌可局灶散在表达肝细胞抗原 Hepatocyte肝细胞抗原 定位

48、于细胞质 位于肝细胞胞质内识别正常人肝细胞与大多数肝细胞性肿瘤甲胎蛋白（AFP）肝癌细胞返祖性合成的一种高分子量胚胎蛋白定位于细胞浆在胎肝中高表达，而在正常成人组织中不表达特异性强，但敏感性较低的肝癌标志物。胃肠道和胆囊的肝样腺癌以及生殖细胞也可出现阳性表达乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是血清中乙型肝炎病毒表面抗原定位于细胞浆HBsAg染色阳性细胞主要分布于癌旁肝细胞内，而HCC细胞本身的阳性率并不高用于标记乙肝病毒表面抗原感染的组织；也可以用于肝硬化、肝癌和乙肝病毒感染的相关研究肾细胞癌特异性标记RCC（clone PN-15）肾近曲小管上皮刷状缘抗原 定位于细胞浆近曲小管上皮；也存在于正常

49、乳腺、甲状腺、附睾和甲状旁腺传统类型肾细胞癌和乳头状肾细胞癌阳性，一些乳腺癌、甲状腺癌、卵黄囊瘤、基底细胞癌和甲状旁腺腺瘤也可有表达Pax-2一种参与肾上皮发育的胞核转录因子定位于细胞核中肾导管、输尿管芽以及后肾原基60%88%的传统肾细胞癌，在低级别肿瘤中有更强阳性的趋势。还可存在于卵巢浆液癌、Wilms肿瘤和肾源性腺瘤中膀胱癌特异性标记尿路上皮分化特异糖蛋白Uroplakin尿路上皮分化特异糖蛋白定位于细胞膜/浆移行上皮分化较好的伞状细胞层推荐用于识别移行细胞瘤；其敏感性中等，但其具有较高特异性CD141血栓调节蛋白（TM）thrombomodulin内皮细胞上的一种膜受体定位于细胞膜内皮

50、细胞 （也是内皮细胞挫伤的重要标志）在尿道移行细胞癌（91%）及鳞癌（87%）有很高的表达率间皮瘤相对特异标记间皮素Mesothelin（clone 5B2）间皮素定位于细胞膜/浆间皮55%的间皮瘤，许多女性生殖道来源的浆液性腺癌和少部分胰腺癌也可阳性间皮细胞 （MC） HMBE-1是抗间皮瘤细胞株的抗体 定位于细胞膜主要分布于间皮细胞膜，其它腺上皮一般不表达主要用于恶性间皮瘤的诊断，而其它腺癌多为胞浆阳性，几乎所有的脊索瘤阳性表达，可用于与软骨肉瘤（阴性）的鉴别诊断Wilms tumor gene（WT1）肾母细胞瘤相关肿瘤抑制基因产物 定位于细胞核主要表达于散发性和家族性肾母细胞瘤可识别部

51、分间皮瘤，还可表达于卵巢浆液性癌与部分子宫浆液性癌（胞浆阳性，没有诊断意义） calretinin分子量为29KD的一种钙结合蛋白 定位于细胞浆主要存在于间皮细胞绝大多数的间皮瘤阳性表达，是诊断间皮瘤的一个有用的标志。98%的腺癌局部阳性生殖细胞瘤特异性标记OCT3/4表达于早期胚细胞、生殖细胞和干细胞的胞核转录因子定位于细胞核早期胚细胞、生殖细胞和干细胞精原细胞瘤、无性细胞瘤和胚胎癌的高敏感性和高特异性的标记，但卵黄囊肿瘤为阴性神经内分泌细胞标记物嗜铬素A Chromogranin A（CGA）人类肾上腺髓质中含量最高的一种可溶性酸性蛋白 定位于细胞浆神经内分泌细胞的分泌颗粒中标识神经内分泌

52、细胞来源的肿瘤细胞（常只表达某种抗原），常需联合应用。阳性细胞数必50%方可诊断突触素（SYN）synaptophysin38KD的糖蛋白 定位于细胞浆存在于神经元突触前囊泡膜神经性和上皮性神经内分泌肿瘤的特异性标志之一CD56（NCAM）神经细胞粘附分子相关的细胞表面糖蛋白 定位于细胞膜 神经元、星形细胞、雪旺氏细胞、NK细胞和小部分活化的T淋巴细胞对神经内分泌分化有更高的敏感性，在小细胞癌的神经内分泌分化上特别明显，但特异性略差calcitonin降钙素 定位于细胞浆甲状腺C细胞神经内分泌肿瘤、甲状腺髓样癌VIP（vasoactive intestinal peptide）血管活性肠肽定位

53、于细胞浆消化道神经内分泌细胞标识消化道神经内分泌细胞来源肿瘤ACTH垂体前叶细胞分泌的一种激素定位于细胞浆 有助于垂体腺瘤的功能性分类区分原发性和转移性垂体肿瘤。嗜铬细胞瘤等神经内分泌肿瘤也可出现阳性神经细胞及神经胶质细胞标记物巢蛋白（Nestin）是中间丝中相对分子质量最大，神经干细胞标记物。定位于细胞浆表达于胚胎发生中的神经上皮干细胞、发育的骨髂肌细胞、血管内皮细胞及胰腺细胞原始神经外胚叶来源肿瘤；在绝大多数胃肠道间质肿瘤中弥漫表达。在痣和恶性黑色素瘤中有表达胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）是星形胶质细胞、室管膜细胞和视网膜细胞中的主要成分定位于细胞浆星形胶质细胞主要用于星形胶质瘤和非星形细胞瘤、多数室管膜瘤等中枢神经系统肿瘤的诊断和鉴别诊断。在软组织肿瘤诊断中较少用到神经微丝蛋白（neurof