临床微生物室标本处理及操作流程

1、InfectionControlTeam临床标本临床标本留取留取环节一环节一运送运送实验室实验室环节二环节二分析前分析前分析中分析中标本合格？标本合格？环节三环节三接种接种培养培养检测检测门诊门诊病房病房诊所诊所合格合格环节四环节四 环节五环节五分析后分析后报告报告环节六环节六 IQ培养基、冰箱培养基、冰箱温箱、气体温箱、气体直接检测直接检测仪器设备、试剂仪器设备、试剂EQA标本标本标本合格标本合格判定判定SOP对每个环节进行控制，构成质量保证体系对每个环节进行控制，构成质量保证体系+药敏试验药敏试验如何看待如何看待CSFCSF的培养结果？的培养结果？（1 1）如如果同期送检的血培养大于果同期

2、送检的血培养大于3天报警，通常不是很紧急天报警，通常不是很紧急（2）假如仍不确定，）假如仍不确定， 联系微生物室值日主管，了解革兰联系微生物室值日主管，了解革兰氏染色涂片的相关情况。氏染色涂片的相关情况。（3）必须综合生化和血液学结果必须综合生化和血液学结果（4）如果如果CSF常规检查报告中没有中性粒细胞或脑脊液的其他常规检查报告中没有中性粒细胞或脑脊液的其他指标正常，对报告的致病菌应保持怀疑，可能送检污染。指标正常，对报告的致病菌应保持怀疑，可能送检污染。自然咳痰自然咳痰诱导痰诱导痰 气管内吸取物气管内吸取物支气管肺泡灌洗液支气管肺泡灌洗液保护性毛刷保护性毛刷支气管灌洗液支气管灌洗液 肺部组

3、织肺部组织带血痰带血痰唾液唾液oror诱导痰诱导痰 (?)(?)脓痰脓痰粘液样痰粘液样痰用革兰氏染色来评估用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格呼吸道标本是否合格粘液丝粘液丝细胞内细菌细胞内细菌胞内细菌胞内细菌 提示感染提示感染柱状纤毛上皮细胞柱状纤毛上皮细胞肺泡巨噬细胞肺泡巨噬细胞滑石颗粒滑石颗粒淀粉样小体淀粉样小体见于迁延长时间的呼吸道疾病见于迁延长时间的呼吸道疾病弹性纤维弹性纤维库什曼螺旋体库什曼螺旋体呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上皮细胞提示混合厌氧菌感染皮细胞提示混合厌氧菌感染你看见多少种形态？你看见多少种形态？呼吸

4、道标本中未被染色的，有折射的杆菌呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌= =抗酸杆菌抗酸杆菌呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？肺中的结节吸出物，不规则肺中的结节吸出物，不规则“球菌球菌”，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织的标本）的标本）呼吸道标本的涂片评估模呼吸道标本的涂片评估模式式每年每年850万例尿路感染万例尿路感染, 90%为女为女性性1/2.5个妇女在一生中会得个

5、妇女在一生中会得UTI下行性感染：血流下行性感染：血流肾脏肾脏膀胱膀胱（金黄色葡萄球菌，酵母菌，结（金黄色葡萄球菌，酵母菌，结核分枝杆菌）核分枝杆菌）上行性感染：尿道上行性感染：尿道膀胱膀胱肾盂肾盂 血流血流用于尿液培养的标本用于尿液培养的标本 肾活检或肾抽吸物（外科）肾活检或肾抽吸物（外科） 耻骨上膀胱抽吸物耻骨上膀胱抽吸物（孕妇，婴儿，全膀胱）（孕妇，婴儿，全膀胱） 微导管尿（内部导管和外部导管）微导管尿（内部导管和外部导管）- -老年人老年人 中段尿，清洁留取中段尿，清洁留取急诊成年人急诊成年人 留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污染）留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污

6、染）尿液运输方法尿液运输方法如不能及时送检，需冷藏。如不能及时送检，需冷藏。4 4小时延迟送检，须废弃标本小时延迟送检，须废弃标本。 过夜培养过夜培养否否自然排尿自然排尿是是继续培养；继续培养；随后观察；发送初步的培养阴性报告随后观察；发送初步的培养阴性报告24小时后仍不生长则发出小时后仍不生长则发出最终的生长阴性报告最终的生长阴性报告 105 CFU/ml1 organism一种以上细菌生长一种以上细菌生长多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清洁标本多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清洁标本纯培养的机会致病菌纯培养的机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注

7、释）ID & Suscept.鉴定鉴定&药敏药敏 105 CFU/ml)1-2种机会致病菌种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）进行鉴定和药敏，若数量进行鉴定和药敏，若数量 104 CFU/ml一种以上细菌生长一种以上细菌生长多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清洁标本洁标本 纯培养的机会致病菌纯培养的机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）鉴定鉴定& &药敏药敏 104 CFU/ml1-21-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌

8、的以上相同注释进行鉴定和药敏，若数量进行鉴定和药敏，若数量 10 104 4CFU/mlCFU/ml，仍然对可能的致病菌进行操作仍然对可能的致病菌进行操作检出检出三种或以上的机会致病菌包括酵母菌三种或以上的机会致病菌包括酵母菌（病人的首份尿标本显示如此的培养结果（病人的首份尿标本显示如此的培养结果，若重复的尿标本仍然培养出相同的细菌，若重复的尿标本仍然培养出相同的细菌，则需要对菌株进行操作），则需要对菌株进行操作）多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清洁标本重新采集清洁标本. .若为腐生葡萄球菌，若为腐生葡萄球菌，则处理与其他致病菌相同；则处理与其他致病菌相同；

9、其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污染染评价尿培养的标准评价尿培养的标准宫颈或宫颈内部：淋病奈瑟菌，沙眼衣宫颈或宫颈内部：淋病奈瑟菌，沙眼衣原体，人乳头瘤病毒原体，人乳头瘤病毒阴道高位拭子：酵母菌，阴道毛滴阴道高位拭子：酵母菌，阴道毛滴虫，细菌性阴道感染虫，细菌性阴道感染肛门或直肠拭子：淋病奈瑟菌，肛门或直肠拭子：淋病奈瑟菌，B B群链球群链球菌（菌（+ +阴道拭子）阴道拭子）Adriaanse et al. Neonatal early onset group B streptococcal infection: a nine-year retrospective

10、 study in a tertiary care hospital. J Perinat Med. 1996;24:531538在孕期在孕期3537周时的普查培养周时的普查培养阴道和直肠拭子阴道和直肠拭子肉汤过夜增菌肉汤过夜增菌接种于血平板上接种于血平板上再孵育过夜和鉴定可疑菌落再孵育过夜和鉴定可疑菌落任何有任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预菌尿的患者需要在分娩期做好预防防分娩时快速检测敏感性不够分娩时快速检测敏感性不够禁止冷藏禁止冷藏组织和抽吸物涂片检查组织和抽吸物涂片检查使用透射光观察使用透射光观察 ： Staphylococcus spp. 葡萄球菌属葡萄球菌属 linezolid利奈唑烷利奈唑烷 oxacillin苯