多肽合成仪手册

1、SYMPHONY1. 系统简介与说明11 简介Symphony主窗口如下所示，其中包含了系统中所有菜单栏和图标工具栏，其相应的功能包括：编写肽序列、编辑程序、合成操作、执行一个单步操作、计算氨基酸的重量和溶剂的体积等。窗口的底部是系统状态栏，显示当前N2、真空及空气的状态和计算机时间，同时，当一个废液桶充满后，会显示警告信息。操作者正在进行的很多相关操作状态都会在状态栏中显示。 使用Symphony窗口可使编程、编写肽序列、给反应器加压、选择某个肽序列等操作变得相当简单，只需鼠标点击，就可以执行。在此过程中，操作将按照默认参数进行。溶剂和试剂的名称分别显示在RV操作窗口和瓶准备操作窗口及报告中

2、。默认条件下，系统使用的是肽化学中标准的溶剂名称和氨基酸名称，这些名称均来自于瓶准备操作窗口中显示的Good Laboratory Practice（GLP）文件，操作者可以创建和使用自定义的GLP文件。除此之外，本窗口中还有许多功能可供操作者使用，如：操作者可以在计算窗口中计算合成所需溶剂和试剂的量，可以创建一个新的自定义GLP文件，并且可以指定其为所有溶剂和试剂的GLP文件。计算窗口所用到的溶剂和试剂（AA）数据文件既可以由操作者自定义，也可以使用系统默认值。不同窗口中有许多相同的功能部分，在共性帮助文档中有对应的解释。12 系统概述121 共性在不同的窗口中有许多相同的功能部分，其中之一

3、就是文件对话框，另外一个就是文件File Open（文件打开）按钮。操作者可以点击窗口右上方的“X”图标来关闭窗口，同样的功能也可以点击Close（关闭）按钮来实现。操作者可以通过点击窗口右上方的最小化和最大化图标来实现窗口的最小化和最大化。所有窗口中都有cursor和input focus。编辑控制框或编辑框可供操作者输入信息，当某个编辑控制框或编辑框被选中时，操作者可以在其中选择或输入信息，光标闪动的地方就是操作者可以输入信息的位置。通常情况下，光标是一条闪烁的线条，当然，操作者也可以自定义光标形状。如果操作者希望改变输入，只需简单的按动Tab键，如果希望反向移动，同时按shift和Tab

4、键即可。操作者可以在编辑框中输入信息，可以在下拉式选择列表框中输入或选择某一信息，一般情况下，下拉式选择列表框的背景是白色的，如果其背景是灰色的则说明此框只是用于显示信息，而不能输入信息。122 文件对话框 本系统中有两种文件对话框，一种是如下所示的Open（打开）文件对话框，另一个是Save（保存）或Save as（另存为）文件对话框。两种文件对话框功能相似，都允许操作者在文件目录中操作文件。当操作者初次打开文件对话框时，显示的文件位置是操作者目前希望打开或希望保存的某种类型文件的默认位置，对话框中显示的文件是按Files of Type框中的文件类型过滤的，Files of Type框决定

5、了操作者可以打开或保存的文件类型。操作者可以通过在文件目录中选择一个文件名或输入一个文件名来作为保存当前数据的文件。123 文件打开按钮 如果操作者点击File Open（文件打开）按钮，则打开一个对话框供操作者选择相应的文件，File Open（文件打开）按钮位于显示所选择文件名字的编辑框的右侧，如下图中鼠标所点的位置。124 保存窗口当操作者打开一个新文件，或关闭一个已经改动过的文件时，就会弹出一个保存窗口以提示操作者，有3种操作可供操作者选择，Yes、NO或Cancel。选择Yes则保存文件，并且关闭窗口；选择NO则不保存文件，并且关闭窗口；选择Cancel则取消当前的操作，不关闭窗口，

6、回到之前的编辑状态。125 工具提示（Tool Tips）工具提示功能是和编辑框相关联的，尤其是和显示文件名字的编辑框相关联的，因为文件名有可能很长，在编辑框中并不能全部显示，在这种情况中下，全部的文件名就可以在工具提示中显示出来。要显示如下图所示的工具提示，只需简单的移动鼠标到对应的编辑框上，并且停留几秒，就会在编辑框下方出现一个显示文件全名的小窗口。126 全局数据访问如下图所示的全局数据访问编辑框提示操作者输入数据，操作者输入数据后，点击OK按钮确认数据修改，或者点击Cancel按钮放弃对数据的修改，然后返回到上级窗口。127 主菜单栏如下所示的主菜单栏包括：Peptide Editor

7、（肽编辑）、Program Editor（程序编辑）、RV Operation（RV操作）、SetUp（设置）、Tools（工具）、Calculation（计算）、File（文件）、Window（窗口）和Help（帮助）。当点击选择了某一个菜单栏后，就会扩展出更多的子菜单供操作者选择。如果点击某一个菜单后并没有扩展子菜单出现，那么就会出现一个命令按钮或动作按钮。对很多菜单而言，可以执行的操作是相似的，例如：很多动作按钮都通过New按钮或Open按钮来创建一个新的文件或打开一个已存在的文件，供操作者编辑。当选择了Open，都会显示打开文件对话框。当一个文件处于打开状态，可以选择Save或者Sav

8、e as操作，用当前的文件名保存修改内容或另外输入一个新的文件名保存修改内容，可以选择Print来打印文件内容。文件通常保存在默认目录下，当然，操作者可以把文件保存到任何文件目录下，也可以打开任何一个文件目录下的文件。菜单栏中的一些功能同样可以在图标工具栏中实现。128 图标工具栏主菜单栏下的第二行就是图标工具栏，设立图标工具栏的目的就是为了方便操作者执行某些菜单功能。如下所示的工具栏从左到右分别是：创建一个新的肽文件、打开一个已有的肽文件、创建一个新的合成/裂解（Cleavage）程序、打开一个已有的合成/裂解（Cleavage）程序、打开反应器操作（Open the Reaction Ve

9、ssel Operations）窗口、打开合成进程（Synthesis Progress）窗口、打开溶剂/试剂瓶灌注和加压（Open the Solvent/Reagent bottles prime and pressure）窗口、保存当前窗口文件、另存当前窗口文件、打印当前窗口文件、打开数据计算窗口、启动系统计算器、正常退出和紧急停止。如果需要了解某个工具的具体功能，只需移动鼠标到相应的图标工具上，并且停留几秒即可。当操作者编辑某个文件时，特推荐以下便利的操作：首先点击Save图标，保存所有的改动信息，然后，如果关闭窗口，就不会出现一系列对话框提示操作者是否要保存文件、如何保存文件等。2合

10、成仪计算机操作软件21 肽序列编辑（Peptide Sequence Editor）窗口操作者可以通过几种方式进入到肽序列编辑窗口，既可以通过点击主菜单栏中的Peptide Editor菜单进入，又可以通过点击图标工具栏中创建一个新的肽/序列文件工具或者打开一个已有的肽文件/序列工具进入。肽序列编辑允许操作者定义序列，定义序列中某一残基对应的合成程序，也就是肽文件。肽文件和序列文件的扩展名分别为“.pep”和“.seq”。操作者能够保存的文件个数取决于计算机上硬盘的存储量。肽文件和序列文件中保存的氨基酸残基个数不能超过200个。本窗口中各种工具和按钮如下图所示。211 序列（Sequence）

11、在序列编辑窗口中可输入和显示肽序列。从N端到C端用窗口右半部分单个字母代表氨基酸残基，输入一个残基时，同时会对应一个默认程序，该程序显示在Synthesis Program Selection下默认框（Default Label）中，操作者也可以改变某个残基或一组残基的程序，将一个或几个残基加亮选中，然后点击Set按钮即可。212 当前程序（Current Program）与某一指定残基相对应的程序显示在当前程序框位于的右侧，。213 当前位置（Current Postion）当前位置右侧显示的是光标在序列编辑框中从左边开始的位置。214 长度（Length）肽长度位于Length右侧，显示在

12、序列编辑框中序列的长度。215 分子量（Molecular Weight）分子量位于Molecular Weight右侧，用于显示C端为羧基或氨基化合物的分子量，这取决于Termination框中的选择。程序使用试剂（AA）数据文件中的数据来计算分子量。216 设置（Set）Set（设置）按钮位于序列编辑框的下方，操作者直接用鼠标点击此按钮就可以进行设置操作，或者点击鼠标右健，在弹出菜单中选择Set项也可以进行设置操作。在设置操作中，操作者可以改变所选择氨基酸残基（处于加亮显示状态）的相应合成程序，对应的合成程序显示在Synthesis Program Selection（合成程序选择）框中。

13、217 剪切（Cut）、拷贝（Copy）和粘贴（Paste）Cut（剪切）按钮、Copy（拷贝）按钮和Paste（粘贴）按钮位于序列编辑框的下方，可以对序列编辑框中的文本进行标准的Windows操作，也就是说操作者可以在同一个序列编辑框，或者从其他的序列编辑框，乃至任何支持剪切、拷贝和粘贴操作的应用程序中对文本进行相应的剪切、拷贝和粘贴操作。218 合成程序选择（Synthesis Program Selection）合成程序选择框位于Synthesis Program Selection标签下方，操作者可以在其中定义一个默认的合成程序，也可以通过点击位于Default Program标签右侧

14、的文件打开按钮，改变与某个残基相对应的默认合成程序，这个改变后的新合成程序就成为在其后输入的任何残基的默认合成程序，在改变之前输入的残基仍然保持与他们相对应的旧的合成程序。操作者可以通过Set（设置）程序来达到同样的目的。219 试剂（AA）数据（Reagent(AA) Data）当前所使的试剂（AA）试剂显示在Reagent(AA) Date标签下方，该试剂（AA）文件给定了其下方按钮的名称，以及相应的用于创建序列的快捷键，操作者可以直接键入字母来创建序列，但每一次键入时，都会提示操作者是否希望通过直接敲字母键来创建序列。操作者还可以用鼠标点击文件打开按钮选择、加载自定义的试剂（AA）数据文

15、件。2110 C端选择（Termination）C末端标签下是一个选择框，用于指定C末端是酸还是酰胺，要注意该选择框的显示，选择酸（Acid）就表明合成是从C端的第二个氨基酸开始的，而第一个氨基酸残基已事先连接在树脂上。选择Amide（氨基）表明合成是从C端的第一个氨基酸合成开始的。2111 文件说明（File Descritption）操作者可以在文件说明编辑框中对文件进行注释和描述。2112 命令按钮21121 编辑程序（Edit Prog）操作者点击Edit Prog（编辑程序）按钮可以打开如下所示的合成和裂解程序编辑窗口，用于编辑与光标所指残基相对应的程序。操作者如果希望改变程序，则可

16、以使用此功能。21122 浏览程序（View Prog）操作者点击View Prog（浏览程序）按钮可以打开如下所示的浏览合成和裂解程序窗口，其中显示与光标所在位置残基相对应的合成程序内容。本窗口只能浏览程序内容，而不能对其进行修改。操作者可通过点击窗口右上方的“X”图标来关闭窗口。21123 关闭（Close）操作者点击Close按钮则关闭当前窗口，回到主菜单窗口。如果对肽/序列的内容进行了修改，在关闭窗口前，会弹出一个窗口提示操作者是否要保存修改内容,如果选择“Yes”,则会弹出另一个窗口继续提问操作者，是保存为肽文件？还是保存为序列文件？如果选择“Cancel”,则回到编辑窗口；如果点击

17、OK按钮则出现保存文件对话框，引导操作者保存文件。在本软件中，肽文件和序列文件是不同的，肽文件中包含氨基酸序列以及想相应的合成程序两种信息，而序列文件只包含氨基酸序列信息，只有肽文件可以指定反应器进行合成。21124 保存（Save）和另存为（Save As）从菜单栏和图标工具栏中都可以执行保存（Save）和另存为（Save As）操作，用原文件名或新输入的文件名保存文件。21125 打印（Print）从菜单栏和图标工具栏中都可以执行打印（Print）操作，打印文件内容。22 合成和裂解程序编辑（Synthesis and Cleavage Program Editor）窗口操作者可以通过几种

18、方法进入到合成和裂解程序编辑窗口，既可以通过主菜单栏中的Program Editor进入，也可以通过图标工具栏中创建或打开来创建一个新的合成程序或打开一个已有的合成程序。操作者可以在合成和裂解程序编辑中创建和保存自定义的合成和裂解程序。裂解程序和合成程序的保存和加载操作是分别进行的，目的是防止在合成过程中使用一个裂解程序，或者在裂解过程中使用一个合成程序。合成程序和裂解程序的文件扩展名分别为“.prg”和“.clv”。操作者保存的合成程序和裂解程序个数取决于计算机上硬盘的存储容量。合成/裂解程序中最多可以包含39个操作步骤（不包括同一操作的多次重复）。在合成和裂解程序编辑窗口中，每一操作步骤有

19、6个可编辑的区域。221 溶剂/操作（Solvent/Operation）如下图所示的Solvent/Operation可以指定在程序某一步骤中要用到的溶液或要执行的操作。可用的选择如下：Solv1 主要溶剂，如：DMF。Solv2 脱保护试剂，在DMF加入20%哌啶（v:v）Solv3 活化剂，例如：0.4NMM/DMF。强调的是在编程时，只有在反应试剂（氨基酸）步骤后才执行活化步骤。Solv4 N端封闭试剂，例如：醋酸酐。Solv5 第二种主要溶剂，如：二氯甲烷。Solv6 裂解剂，使用TFA裂解混合液。Reagent（AA）- 一种氨基酸（在肽文件中指定的氨基酸）。Dry 这个操作用于在

20、cleavage之前从树脂中去除溶剂。这个选择按照Mix Time中指定的时间周期，间歇性地开启通过反应器顶部的氮气通道（nitrogen path）。None 这个操作并不向反应器输送任何溶剂，但是可以按照Mix Time中指定的时间（如果有数值的话）长短，混合当前反应器中的溶液，然后从反应器向废液桶排放废液（如果Drain处于ON状态）。222 体积（Volume）Volume代表在操作步骤中用到指定溶液的体积，为1.25ml的倍数。223 混合时间（Mix Time）Mix Time代表混合溶液的持续时间或执行操作的时间。224 排放（Drain）Drain可以转换两种不同的状态，ON和

21、OFF，分别代表在本操作步骤完成后，下一个操作步骤开始前，反应器中的溶液是排放，还是不排放。225 重复（Rep）Rep代表重复操作步骤的次数（最大值为9）。226 注释（Comment）Comment用于对操作步骤进行注释，例如：本步骤的目的等。227 溶剂数据文件（Solvent Data File）Solvent Data File用于显示当前正在使用的溶剂/活化剂数据文件，其名称就是在前述Solvent/Operation中所列出的溶剂/活化剂的名称。文件打开按钮允许操作者改变正在使用的溶剂/活化剂数据文件，以及在Solvent/Operation中列出的其他相应信息。228 文件说明

22、（File Description）File Description用于对文件进行简单说明。229 命令按钮2291 插入（Insert）操作者可以点击Insert按钮在光标所在行之上插入一空行，或者在编辑框中插入一空行。也可将光标移到某一步骤号所在行上，然后点击鼠标右健，弹出一个子菜单，其中有Insert、Delete等选项，选择Insert项执行插入操作。2292 删除（Delete）操作者可以点击Delete按钮删除光标所在行的内容，或者删除编辑框中的信息。也可以将光标移到某一步骤号所在行上，然后点击鼠标右健，弹出一个子菜单，在其中有Insert、Delete等选项，选择Delete项执

23、行删除操作。2293 浏览（View）点击View按钮则打开如下所示的合成/裂解程序浏览窗口，显示程序对应的各个步骤，在本窗口中不能修改任何内容。2294 清除（Clear）点击Clear按钮则清除窗口中的内容，恢复为创建一个新程序操作的第一步时的初始状态。2295 关闭（Close）操作者点击Close按钮则关闭当前窗口，回到主菜单窗口。如果操作者对程序进行了修改，在关闭窗口前，会弹出一个窗口提示操作者是否要保存修改内容,如果选择“Yes”,则会弹出另一个窗口继续提问操作者，是保存为合成程序文件？还是保存为裂解程序文件？如果选择“Cancel”,则回到编辑窗口；如果点击OK按钮则出现保存文件

24、对话框，引导操作者保存文件。2296 保存和另存为（Save and Save As）从菜单栏和图标工具栏中都可以执行保存（Save）和另存为（Save As）操作，用原文件名或新输入的文件名分别保存文件。具体窗口显示如下图所示。2297 打印（Print）操作者从菜单栏和图标工具栏中都可以执行打印文件操作。23 反应器操作（Reaction vessel operation）如下所示的窗口中有两个选项自动操作和手动操作，当合成程序开始后，显示此窗口。操作者可以通过主菜单栏中的RV操作菜单，或者点击图标工具栏中的“打开反应器操作”工具来显示反应器操作窗口，或者使其在多个窗口的最前面显示。231

25、 自动操作（Automated Operation）在如下所示的选项中，可以将Peptide/Sequence Editor（肽/序列编辑）窗口中创建的肽文件指定给反应器（RVs）进行合成操作。因为12个RVs完全独立运行，所以可以随时将一个肽文件指定给任何一个未使用的反应器。在RV Operation（反应器操作）窗口中，还可以将裂解程序依次指定给多肽反应器。在本窗口中，操作者可以使用Set Start按钮、Stop按钮和Pause按钮，对合成操作在任意进度进行停止和暂停。所有合成过程中的当前状态在窗口中连续显示，合成操作的进展情况均记录在合成报告文件中。为了让系统能够正确的将使用的试剂瓶和

26、用单个字母表示的试剂对应起来，在肽文件中键入的单个缩写字母必须在当前有效的GLP（Good Laboratory Practice）文件中进行定义。如果在当前有效的GLP文件找不到某一个字母，在加载肽文件时，系统将警示操作者。在此情况下，肽合成操作仍然可以开始进行，当合成进行到含有那个找不到字母的残基时，系统会自动暂停合成过程，弹出一个提示，指出操作暂停的原因。232 加载和运行肽（Loading and Running a Peptide）为了启动一个肽合成操作，操作者必须首先加载一个肽文件。为此，可以用鼠标点击某个希望的RV所在行的文件按钮，文件打开按钮位于Peptide所在列相对应编辑框

27、的右侧。当操作者选择了一个肽文件，则所选的文件名在编辑框中显示，并且在编辑框中显示的只是文件名本身，包括文件路径信息的全部文件名在工具提示中显示。要启动合成操作，只需点击位于本窗口同一行最左侧的Start按钮。与合成操作相关的各种信息分别在与RV同处一行的其他编辑控制框中显示。注意：当加载一个新的肽文件时，与以前旧的肽文件相关的诸如Start、Stop和Pause等所有信息都会丢失，特别指出的是即使一个裂解程序仍然显示，也不能执行。所有相关信息必须重新设置、重新指定。233 开始（Start）按钮每一个RV都有一个对应的Start按钮，操作者点击此按钮就会启动对应RV中的合成过程。当合成开始后

28、，此按钮变为Pause按钮，因为在合成过程中，系统允许操作者暂停合成处理。当合成暂停后，此按钮显示为Resume，操作者点击此按钮可以继续进行合成。裂解程序启动后，此按钮显示为Rinse，操作者点击此按钮就可执行对应的冲洗（Rinse）操作。注意：如果操作者想更改或者取消暂停，在运行一个新的操作之前，必须使用Clear按钮将其清除。234 显示区（Display Fields）本窗口的显示区从左到右的顺序，第一个是RVs（1-12），第二个是Peptide，显示的是指定给每一个RV的肽文件名，其余显示的是合成状态信息。Length表示肽中氨基酸残基的个数，AA#表示正在偶联（being cou

29、pled）的氨基酸，Program表示指定给正在偶联的氨基酸合成程序，Step表示正在进行中的程序步骤，Reagent表示正在使用的溶剂/试剂名称。多数程序步骤都包含fill（填充）、mix（混合）以及drain（排放）等子步骤。Action表示正在进行中的子步骤，以及出现任何错误提示，Mix Time表示在混合子步骤中剩余的时间，Rep表示正在进行之中编程步骤的重复次数。Action表示合成操作的状态，如；fill（填充）、mix（混合）、drain（排放）、Complete（完成）或者错误信息等。 235 裂解（Cleavage）操作者点击选项最右侧的按钮，则弹出如下所示的Set Clea

30、ve Time/Date（设置裂解时间/日期）对话框。在指定了裂解程序之后，裂解程序名就出现在位于Cleavage字段下方的编辑框中。需要注意的是，当裂解程序执行之后，在Cleavage字段右侧的圆圈图标颜色变为红色，提醒操作者通往收集管（collection tube）的管路目前不可用。如果在合成过程结束后需要进行裂解操作，那么就应该在设置完合成程序之后，继续设置裂解程序。 Run和CLV下方的圆圈图标是一个用颜色来表示合成状态的指示器，灰色代表非激活状态，绿色代表运行状态，黄色代表处理过程暂停状态，红色代表停止状态。在Run字段下方的红色圆圈也代表RV目前没有使用，处于空闲状态。 236

31、命令按钮 2361 设置（Set）操作者点击Set（设置）按钮可以打开如下所示的自动操作编辑框窗口，用于设置多个RVs。 2362 全部启动（Start All）操作者点击Start All（全部启动）按钮就可以启动所有的RVs，而不用依次点击每一个Run（运行）按钮。当所有RVs处于运行状态时，其对应的按钮名称变为Pause All（全部暂停），如果点击Pause All按钮，则暂停所有正在运行的RVs。 2363 启动/停止（Start/Stop）点击Start/Stop（启动/停止）按钮则显示如下所示的Set Start、Stop和Pause窗口。操作者可以在此窗口中对肽合成操作中任意操

32、作步骤执行启动、停止和暂停操作。 2364 清除（Clear）点击Clear（清除）按钮则显示如下所示的Clear Reaction Vessels Setting（清除反应器设置）窗口，操作者可以在此窗口中选择并清除任意一个RVs，或者全部RVs的合成数据。为了防止误操作而意外清除正在运行的RVs的数据，在清除RVs数据操作之前，必须首先暂停这个RVs。 2365 浏览报告（View Report）点击View Report（浏览报告）按钮则显示如下所示的打开报告文件对话框，初始目录是Pro，窗口中显示存有合成报告文件的每一个RVs的子目录。在RVs文件目录中查找文件，选择希望打开的文件，点

33、击Open按钮，则会在文字处理程序中打开这份文件的一份拷贝。操作者所浏览的内容只是进展报告的一份拷贝，当关闭文字处理程序后，这份拷贝就会被删除。 2366 关闭（Close）操作者点击Close按钮则关闭当前窗口，回到主菜单窗口。24 手动操作（Manual Operation）在手动操作选项中，无论反应器是处于没有使用状态，还是处于暂停操作状态，操作者都可以对任何一个反应器中的合成进行单步编程控制。如果一个指定RV的合成操作被暂停，那么操作者可以对这个RV进行手动操作，这些操作都记录在这个RV合成报告中。本窗口中出现的各种工具和按钮详见如下窗口。 241 加载和运行操作程序（Loading

34、and Running an Operation）加载和运行操作程序涉及到从下拉式列表框Operation/Solven中和Reagent（AA）中选择需要的参数，输入混合时间、选择是否排放、输入重复操作次数、输入体积数值、点击Start按钮。所有这些都做完之后，操作将会进行，直至完成。操作者可以重复进行操作，或者定义新的参数，开始新的操作。 242 开始（Start）按钮每一个RV都有一个对应的Start按钮，操作者点击此按钮就会启动对应RV中的手动操作步骤。当操作开始后，此按钮变为Pause按钮，操作者可以暂停操作。当操作暂停后，此按钮显示为Resume，操作者点击此按钮就可以继续执行。此

35、按钮上会显示各种操作，操作者点击此按钮就可执行对应的操作。注意：如果操作者为了更改或者启动一个新操作而暂停了合成，那么在指定一个新的操作之前，必须使用Clear按钮消除相关信息。 243 显示区（Display Fields）本窗口的显示按从左到右的顺序，第一个是RVs（1-12），第二个是Operation/Solvent，表示在程序的指定步骤中用到的溶液或者操作。这个列表框中实际显示的内容取决于当前使用的GLP文件（Active Good Laboratory Practive File）。可选择如下：Solv1 主要溶剂，如：DMF。Solv2 脱保护溶液，在DMF加入20%哌啶。Sol

36、v3 活化剂溶液，例如：0.4 NMM/DMF。Solv4 N端封闭溶液，例如：醋酸酐。Solv5 第二主要溶剂，如：二氯甲烷。Solv6 裂解液，使用TFA裂解混合液。Reagent（AA） 一种氨基酸（在肽文件中指定的氨基酸）。Dry 在cleavage之前从树脂中去除溶剂。这个选择按照Mix Time中指定的时间周期，间歇性地开启通过反应器顶部的氮气通道（nitrogen path）。None 按照Mix Time中指定的时间（如果有数值的话），混合反应器中的溶液，但是并不增加溶剂，然后从反应器向废液桶排放废液（如果Drain处于ON状态）。Collect 将反应器中的溶液排向相应的裂解

37、液（cleavage compartment）收集管（collection tube）。收集管必须安放到位，软件才能接受这个命令。Collect Clean 为了防止污染，在进行完裂解收集（cleavage collection）操作后，可以使用此命令，用Solv 5对管路和收集管进行冲洗操作。本操作要求收集管必须安放到位，并且每一次裂解收集（cleavage collection）操作后，都要执行。在执行本操作之前，将出现一个警告窗口，防止由于误操作而将Solv 5中的溶剂排向已完成了收集操作的收集管。Rv Clean 当反应器中的裂解操作完成后，需使用Rv Clean操作。首先，重新安放一

38、个特殊带冲洗管（rinse tube）的适当反应器，在位于窗口下半部分的RV #12列表框中选择Rv Clean操作，并按回车键确认，仪器就会自动对Rv底部到Rv管路顶部，溶液所涉及到的所有地方用3种溶液进行冲洗操作。不用指定混合时间、循环次数或体积等参数。本次操作包括：两次用脱保护溶液冲洗和两次用Solv 5冲洗，将会彻底清洁整个RV管路。 244 Reagent（AA）（试剂）在Operation/Solvent框中选择了Reagent后，就激活了位于Reagent（AA）下方的下拉式编辑框。在这个下拉式编辑框中有20种选择项供操作者选择，20种选择对应着20个AA瓶。在当前的GLP文件中

39、对与这个选择相对应的字母和缩写进行了定义。 245 混合时间（Mix Time）Mix Time代表溶液混合持续时间或执行操作的时间。 246 排放（Drain）Drain可有两种不同的状态，ON和OFF，分别代表在本操作步骤完成后，下一个操作步骤开始之前，反应器中的溶液是排放掉，还是保留。 247 重复（Rep）Rep表示操作步骤的重复次数（最大值为9）。 248 体积（Volume）Volume表示在操作步骤中用到的指定溶液的体积，为1.25ml的倍数，最大倍数为9。这个倍数必须选择适当，它与合成规模（scale）和溶液浓度（concentration）是相关的。 249 命令按钮2491

40、 设置（Set）操作者点击Set按钮则打开如下所示的手工操作编辑窗口（Manual Operations Global Edit），可以对Rvs1到全部Rvs指定组合设置参数。 2492 全部暂停（Pause All）操作者点击Pause All按钮则会暂停加亮的反应器操作，此按钮在点击之后变为Resume按钮，同时，在Run下方圆圈图标变为黄颜色。在Action中显示在暂停之前正在执行的步骤号。注意：如果操作者想更改或者启动一个新操作而暂停了合成，那么在指定一个新操作前，必须使用Clear按钮消除相关信息。 2493 清除（Clear）操作者点击Clear按钮则打开清除反应器设置（Clear

41、 Reaction Vessels Settings）窗口，以清除所选择的RVs。 2494 关闭（Close）操作者点击Close按钮则关闭当前窗口，回到主窗口。 25 清除反应器设置（Clear Reaction Vessels Settings）本功能位于反应器操作窗口，无论是在自动操作窗口选项中，还是手动操作窗口选项中，都有此功能。点击Clear按钮将把所选择的非激活状态下的RV所在行的所有参数信息清除掉。为了防止由于误操作而清除激活状态下RV的信息，在清除之前，必须将该RV变为暂停状态。点击Clear按钮后，将打开一个如下所示的清除反应器设置的窗口，可以选择清除某一指定的反应器设置，

42、或者选择清除所有反应器设置。本窗口的底部是Select All按钮、Clear按钮和Close按钮。 251 命令按钮2511 全选（Select All）全选功能，选择所有暂停状态下的反应器后，可全部清除其设置。 2512 清除（Clear）清除所选择反应器所在行的所有设置。 2513 关闭（Close）操作者点击Close按钮则关闭当前窗口，回到反应器操作（Reaction Vessel Operation）窗口。 26 设置裂解时间和日期（Set Cleave Time and Date）点击自动操作窗口中Cleave旁边的命令按钮，则打开本窗口。在如下所示的设置裂解时间和日期窗口中，操

43、作者可以在合成操作完成之后直接裂解，也可以在指定的日期和时间内裂解，也可以立即进行裂解。相对应的反应器号码在本窗口的标题栏中显示。 261 选择裂解程序（Select Cleavage Program）选择一个要执行的裂解程序，只需用鼠标点击文件打开图标，选择希望打开的程序文件。选择后，将激活运行裂解程序的三个选择按钮，分别是：Cleage at end of synthesis（合成结束后进行裂解）、Cleave by Time and Date（在指定日期和时间进行裂解）和Cleave Now（立即进行裂解），从中选择一个，点击OK按钮确认。 262 合成结束后进行裂解（Cleage at

44、 end of synthesis）选择Cleage at end of synthesis意味着在裂解操作之前，必须先运行合成操作，或者完成合成操作。裂解操作的步骤写入与现在的合成操作中RV所对应的报告文件中。263 在指定日期和时间进行裂解（Cleave by Time and Date）选择了Cleave by Time and Date后，Time编辑框和Date编辑框变为可编辑状态。输入的日期和时间格式分别为：MM-DD-YY和HH:MM:SS，时间采用24小时制。裂解操作将在指定的日期和时间进行。合成程序和裂解程序可不必对应。 264 立即进行裂解（Cleave Now）选择Cle

45、ave Now，点击OK按钮确认后，本窗口关闭，回到自动操作窗口，开始裂解操作。此选择并不要求合成程序和裂解程序相对应。用这种方法执行裂解操作将产生一个新的、单独的报告文件。 265 命令按钮 2651 确认（OK）点击OK按钮，接受选择。 2652 取消（Cancel）点击Cancel按钮，取消所作的修改，关闭本窗口，回到RV操作窗口。27 设置开始、停止和暂停（Set Start,Stop and Pause）如下所示的窗口允许操作者改变正常程序的开始、停止，或者在合成程序中设置暂停，以便进行手工处理。开始、停止和暂停分别在Start选项、Stop选项和Pause选项中设置。其中显示的残基

46、名称、溶剂、试剂均取自当前的GLP文件。Start选项、Stop选项和Pause选项中显示的开始、停止和暂停位置都是按照从左到右的次序确定的。在Start选项和Stop选项中，对应每一个操作步骤，只允许设置一个开始和一个停止，允许在设置的开始和停止之间重复进行操作。而在Pause选项中可以根据需要设置多个暂停。 设置开始和停止的功能一般用于多个片段长肽的合成。对于由一个文件表示的整个肽，操作者可以选择某一片段的C端第一个氨基酸（c-term）和片段最后一个氨基酸进行偶联 。注意：如果对停止进行了编程，那么系统会认为合成过程将要完成，在RV操作窗口中的操作指示（Action Indicator）

47、栏将显示“Complete”，也就是说，合成操作不能继续进行。为了要继续进行合成过程，唯一的办法是在自动操作窗口中加载一个新的合成文件，对新的合成程序的开始进行编程，使其位于原来的肽合成操作中下一步骤或者下一次循环的开始上。设置开始的功能在突然断电的情况下也非常有用。合成报告文件记录最后一个步骤或者最后一次循环的执行过程，根据报告文件中的信息，操作者就能够对新的合成程序的开始进行编程，使其位于原来的肽合成操作中下一步步骤或者下一次循环的开始上，从而达到完成整个合成操作的目的。 271 选择反应器（Select RV）在选择RV的下拉式列表框中选择了某一个RV后，合成过程和序列也就显示出来。操作

48、者选择想要设置开始、停止和暂停的残基，再选择程序步骤和重复次数，然后点击Apply按钮。选择过程中，只允许设置一个开始和一个停止，但可以设置多个暂停。272 序列显示（Sequence Display）序列显示一次可以显示16个残基，如果序列长度超过16个残基，可以通过滚动条将其他部分显示出来。要选择一个开始、停止和暂停，只需用鼠标选择，并点击就可以了，所点击残基的名称就会在Amino Acid旁边的编辑框中显示，在程序下方的下拉式列表框填写的是程序步骤或某一步骤中循环次数，允许操作者从中选择，并设置开始、停止和暂停。273 氨基酸（Amino Acid）Amino Acid旁边的编辑框中显示

49、的是当前操作者所选择的氨基酸。274 合成程序（Synthesis Program）这个编辑框显示的是与当前操作者所选择进度相对应的程序。275 针对某一步骤设置开始、停止和暂停（Set Start,Stop and Pause Before Step）允许操作者选择与当前进度相对应的程序步骤，结果在合成程序编辑框显示，并选择某一执行步骤中的开始、停止和暂停。276 针对循环操作设置开始、停止和暂停（Set Start,Stop and Pause Before Rep）允许操作者选择某一步骤中的循环操作，并选择循环操作的开始、停止和暂停。277 暂停选项（Pause Tab）因为允许操作者选

50、择多个暂停点，在如下所示的暂停选项中参数比开始选项和停止选项要多一些。在每一个操作步骤和每一次循环操作中的每一个残基都可以编程控制暂停。在指定的操作步骤或指定的循环操作完成之后，暂停处理。在残基中的暂停在位于程序步骤和循环次数编辑框右侧的列表框中显示。如果希望在残基中增加一个暂停点，只需简单的选择一个程序步骤和循环次数，然后点击位于这个列表框上方的Add按钮即可。如果想删除一个暂停点，只需简单的选择一个程序步骤和循环次数，加亮，然后点击位于这个列表框上方的Delete按钮即可。需要注意的是：虽然暂停点已经增加到列表框中的某一步骤，但并没有指定给合成程序，直到点击Apply按钮。对于暂停点的删除

51、操作也一样，必须点击Apply按钮才能生效。 编程控制合成程序中某一特定进度的暂停将会使合成进程在这个进度时临时暂停。暂停一般都是由于工作需要而设置的，例如：为了测试树脂上的产物是否反应完全，或者为了将树脂分成较小的部分以备合成肽库之用等。当执行暂停操作后，在自动操作窗口中的操作指示显示为Pause，同时旁边的圆圈图标变为黄颜色。当操作者准备好继续进行合成时，只需点击Resume按钮，合成进程将在原程序中的下一个步骤，或下一次循环开始。RV字段显示指定的操作正在进行，旁边的圆圈图标变为绿颜色。如果在暂停操作时，希望再次偶联氨基酸，或脱保护等，可以点击手动操作选项，在手动操作选项中进行相应的手动

52、操作。当手动操作完成后，点击自动操作选项，回到自动操作状态，选择RV，使之加亮，点击Resume按钮，继续进行原来的合成进程。 278 命令按钮2781 应用（Apply）点击Apply按钮，保存操作者所做的修改，并立即将所做的修改应用到操作中。也可以采用另外一种方法，当关闭Set Start、Stop and Pause窗口时，会提示操作者是否保存修改，选择Yes则保存修改内容。2782 关闭（Close）点击Close按钮，关闭本窗口，回到RV操作窗口。 28 自动操作编辑（Automated Operation Global Edit）如下所示的Automated Operation G

53、lobal Edit窗口的目的是简化在自动操作选项中肽文件和裂解程序的参数输入，允许操作者选择并打开一个肽文件和裂解程序文件，将打开文件内容作为一个RV或全部RV的设置参数。操作者使用文件打开按钮来加载肽文件，使用位于Cleavage标签旁边的图标按钮来加载裂解程序。 281 命令按钮2811 清除（Clear）点击Clear按钮，将清除所指定行上打开文件的内容。2812 全选/全不选（Select All/ Deselect All）点击Select All按钮，将一次性的选择全部12个RVs，点击Deselect All按钮，将一次性的取消对全部12个RVs的选择。2813 应用（Appl

54、y）点击Apply按钮，将肽文件或者裂解程序文件的内容应用到在自动操作选项中所指定的RVs。2814 关闭（Close）点击Close按钮，关闭本窗口，回到RV操作窗口。 29 手动操作编辑（Manual Operation Global Edit）如下所示的Manual Operation Global Edit窗口的目的是简化在手动操作选项中操作名称、试剂、混合时间、排放、循环次数以及体积等参数的输入，允许操作者选择某些参数，或者选择所有参数作为一个RV或全部RV的设置参数。 291 命令按钮2911 清除（Clear）点击Clear按钮，将清除任何修改内容，恢复原来的名称以及在Opera

55、tion/Solvent、Drain、Rep和Volume的原内容。2912 全选/全不选（Select All/ Deselect All）点击Select All按钮，将一次性的选择全部12个RVs，点击Deselect All按钮，将一次性的取消对全部12个RVs的选择。2913 应用（Apply）点击Apply按钮，将与所指定RVs对应的操作、试剂以及其他参数值应用到在手动操作选项中。2914 关闭（Close）点击Close按钮，关闭本窗口，回到RV操作窗口。 210 合成进程（Synthesis Progress）可以通过两种方式进入到如下所示的Synthesis Progress

56、窗口，它是RV Operation窗口之下的一个可选窗口，既可以通过点击主菜单栏中的Show Progrss菜单进入，又可以通过点击图标工具栏中的打开合成进程（Synthesis Progress）工具进入。如下所示的本窗口显示每一个反应器以及与之对应的当前肽文件。由于肽正在合成，所以序列背景颜色从紫罗兰色到黄色，按从右往左的顺序，右边的代表已经完成的氨基酸合成程序。正在进行合成的氨基酸，其背景颜色是绿色的。 2101 命令按钮点击Close按钮，关闭本窗口，回到RV操作窗口。 211 清除冲洗状态（Clear Rinse State）如下所示的Clear Rinse State窗口，是通过点

57、击主菜单栏中的RV Operation菜单中的Clear Rinse（清除冲洗）命令进入的。冲洗状态表明在裂解操作执行之后，对收集管路是否进行清洗操作。如果需要进行冲洗操作，则系统会在自动操作选项中的Start按钮上，将Start变为Rinse。如果与某一个RVs对应的按钮上显示了Rinse，则说明这个RVs需要冲洗。操作者也可以设置Start按钮，那么在此按钮上就显示Start，允许操作者执行其他的操作，而不必是冲洗操作。为此，操作者需要进入本窗口，指定某一个RVs，点击Clear按钮，清除冲洗设置，则所指定的RVs对应Start按钮上显示的Rinse将重新变为Start。2111 命令按钮