基因工程知识点梳理

1、生物选修3知识点专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指根据人们的愿望,进行严格的设计,通过,赋予生物以,创造出.基因工程是在上进行设计和施工的,又叫做 .(一)基因工程的根本工具i .“分子手术刀 _ (1)来源：主要是从 中别离纯化出来的.(2)功能：能够识别 的核甘酸序列,并且使每一条链中 的两个核甘酸之间的 断开,因此具有 .(3)结果：经限制酶切割产生的DNM段末端通常有两种形式： 和.2 .“分子缝合针 一一(1)两种DNA1接酶()的比拟：相同点：都缝合 键.区别： 来源于大肠杆菌, 来源于T4噬菌体.只能将双链 DNA片段互补的 黏性末端 之间的磷酸二酯键连接起来: 而 能缝

2、合两种末端,但连接 的之间的效率较 低.(2)与DNA聚合酶作用的异同：DNAm合酶只能将 加到已有的核甘酸片段的末端,形成磷酸二酯键.DNA1接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键.必须需要模板3 .“分子运输车 一一 (1)载体具备的条件： 一,供外源DNA片段插入.,供重组DNA的鉴定和选择.(2)最常用的载体是 它是一种3其它载体：二基因工程的根本操作程序第一步:1 .目的基因是指：基因.2 .原核基因采取 获得,真核基因是 .人工合成目的基因的 常用方和.3 .从基因文库中获取基因文库 1概念：将含有某种生物不同基因的许多DNA段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这

3、种生物的不同的基因,称为基因文库.2 类型：基因组文库和局部基因文库如cDNAC库基因组文库局部基因文库如 cDNA文库构建方法将某种生物体内的 DNAi: 部提取出来,选用适当的限 制酶,将DNA切成一定范围 大小的DNA片段,分别与运 载体连接,导入受体菌群体 中储存,每个受体菌中都含 有一段小向的DNA片段.用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补 DNA 也叫 cDNA片段,与载体连接后储存在一 个受体菌群中.文库人小基因中启动子具有启动作用的DNA段基因中内含子位于编码 蛋白质序列内的非编码DNA片段基因多少物种间的基因交流4.PCR技术扩增目的基因1原理：2过程：第一

4、步： 加热至9095c第二步： 冷却到5560 C, 1第三步： 加热至7075 C, 第二步:核心步骤1 .目的：使目的基因在受体细胞中 ,并且可以,使目 的基因能够.2 .组成：+(1)启动子：是一段有特殊结构的 ,位于基因的 ,是 识别和结合的部位,能驱动基因 ,最终获得所需的 蛋白质.(2)终止子：也是一段有特殊结构的 ,位于基因的 .限制 (3)标记基因的作用： 是为了 受体细胞中 是否含有目的基因,从而将含有目的 基因的细胞筛选出来.常用的标记基因是 基因.第三步:1 .转化的概念：2 .常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 ,其次还有 和圉111我杆施箱比走再

5、立型存在生活在土壤中农杆菌特点能在自然条件下感染 ,对大多数单子叶植物无感染水平.原理植物伤口处细胞分泌的酚类化合物吸引农杆菌移向这些细胞,使其转移至受体细胞并整合到 上.方法将目的基因插入 上,通过转化作用进入植物细胞并插入到染色体DNAk,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达优点比拟经济有效,约 80%专基因植物通过这种方法获得.将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 .此方法的受体细胞多将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 最常用的原核细胞是 ,其转化方法是：先用处理细胞,使其成为 ,再将溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DN酚子,完成转化

6、过程.3 .重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达.第四步:分子检测1 .首先要检测 转基因生物的染色体 DNA上是否插入了目的基因,方法是采 用.具体方法：提取转基因生物的基因组DNA用 作探针；与基因组DNA杂交；假设 杂交带就说明目的基因已插入染色体DNA中.意义：目的基因能否在真核细胞中稳定遗传的关键2 .其次还要检测 目的基因是否转录出了 mRNA方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA交.方法：从转基因生物中提取mRNA同样方法标记目的基因作探针；与mRN原交；假设显示出杂交带就说明目的基因转录出mRNA意义：是检测目的基因是否发挥功能作用

7、的第一步3 .最后检测 目的基因,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的_方法.个体水平的鉴定4 .有时还需进行个体生物学水平的鉴定.如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状.三基因工程的应用1 .植物基因工程： 抗虫、抗病、抗逆转基因植物, .2 .动物基因工程：乳腺生物反响器或乳房生物反响器科学家将药用 等调控组件重组在一起,通过等方法,导入哺乳动物的 中,然后将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物.转基因动物进入 后,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的药品.作器官移植的供体科学家正试图利用基因工程方法对猪的器官由于猪的内脏构造、大小、血管分布与人极为相似,而且猪体内隐藏的、可导致人类疾病的

8、病毒要远远少于灵长类动物进行改造,采用的方法是将器官供体基因组导入 ,以抑制 的表达,或设法 除去 基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反响的转基因克隆猪器官.3 .基因治疗：基因治疗概念基因治疗是把导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而到达治疗疾病的目的.意义这是治疗的最有效的手段举例：复合型免疫缺陷症疾病旧后-种遗传疾病病因由于腺甘酸脱氨酶基因缺失,造成体内缺之腺甘酸脱氨酶腺甘酸脱氨酶是 人体免疫系统发挥正常功能作用所必需的.治疗将腺甘酸脱氨酶基因转入取自患者的淋巴细胞中,使淋巴细胞能够产生腺昔 酸脱氨酶,然后,再将这种淋巴细胞转入患者体内.方法基因治疗方法先从病人体内获得某种细胞,例如T淋巴细胞,进行培养,然后,在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内.特点大局部基因治疗的临床试验方法；方法操作复杂,但效果较为可靠.治疗方法直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法举例1994年美国科学家利用经过修饰的腺病毒作载体,成功地将治疗遗传 性囊性纤维化病的正常基因转入患者肺组织中.特点简便四蛋白质工程的概念1 .蛋白质工程是指以 作为根底,通过,对现有蛋白质进行 政遣,或制造一种