药物分析学：中药分析.docx

1、第十一章中药分析概论中药:以中医药学理论体系的术语表述其性能、功效和使用规律，并且按中医药学理论指导 其临床应用的传统药物。令 中国药典2010年版I部：药材和饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂第一节中药分析的特点 以中医药理论为指导，评价中药质量的整体性化学成分的多样性和复杂性 药效成分的非单一性原药材质量的差异性 工艺、炮制方法及辅料的特殊性杂质来源的多途经性 质量控制方法的多源性1、成分复杂且多数有效成分尚不十分清楚2、各种有效成分含量相差悬殊五倍子 鞍质（70%）槐米 芦丁（20%）长春花长春新碱（百万分之一）3、中药材质量的不稳定性原因：生长环境、采收季节及部位差异不同产地金

2、银花：绿原酸；山东平邑所产为5.66%,山西大谷为3.88%,云南大理为1.81%采收季节丹参：丹参酮11、12月份含量最高4、制剂工艺不同，有效成分含量也不同例：三黄泻心汤干浸膏成分常压 浓缩减压浓缩逆浸透 喷雾大黄酸葡萄糖普41.151.698.6%小聚碱34.537.594.5%黄连碱6.312.093.7%黄苓音77.477.698.5%5、剂型繁多，辅料干扰大蜜丸 蜂蜜锭剂糯米粉、黄米粉胶剂 豆油、黄酒、冰糖针对不同的剂型，采用相应的方法进行别离纯化后测定6、杂质来源复杂，需控制非药用部位、泥沙 重金属、残留农药包装、保管不当发生霉变、虫蛀 洗涤原料的水质二次污染令中药制剂易含有较高

3、的重金属、础盐和残留农药等杂质中药制剂的分类液体制剂：合剂、口服液、酊剂等半固体制剂：煎膏剂、流浸膏固体制剂：丸剂、散剂、片剂、胶囊剂等令 中国药典(2010年版)一部(二十六种)中药分析的一般程序取样一鉴别一检查一含量测定第二节 中药分析的样品前处理中药制剂成分的多样性和复杂性，需进行样品前处理；前处理的目的：对待测组分进行提取、别离、纯化，排除制剂中的其他组分和辅料等干扰1、供试品溶液的制备(1)超声提取法*:利用超声波的助溶作用进行提取 超声波振荡器(超声波清洗器)简便；省时；提取率高(2)连续回流提取法样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法 特点：节省溶剂，提高提取

4、效率；适宜受热稳定的药物；费时 仪器：索氏提取器(3)萃取法利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同用于皂昔类用于皂昔类用于生物碱类正丁醇氯仿1醋酸乙酯;乙醛、石油酸用于黄酮类用于黄酮类用于挥发油（4）超临界流体萃取（SFE法）超临界流体是指在临界温度和临界压力以上的流体，介于气体与液体之间的一种物相。令 超临界 CO2： Pc=7.37MPa ； Tc=31.3CO2萃取过程无味、无臭、无毒，平安性好； C02价格廉价，纯度高，可循环使用；样品易浓集；第三节鉴别与含量测定一、药味的选取原那么 单味制剂，直接进行鉴别和含测；复方制剂，应按照君、臣、佐、使选择药味； 应首选君药、臣药、贵重药、

5、毒性药。 凡有原粉入药者，应该作显微鉴别。 原那么上处方中的每一药味均应进行鉴别，选择尽量多的药味（1/3药味）。 选择明确的有效成分或类别清楚的某一类总成分进行含量测定检测成分应归属某单一药味 检测成分应与中医用药的功能主治相近无法含量测定的，可测定浸出物含量二、鉴别性状鉴别，显微鉴别，色谱法鉴别1、显微鉴别含生药粉制剂：丸剂、片剂、胶囊剂、散剂快速，简便，覆盖面大2、色谱鉴别TLC法一应用最多（Rf、颜色、荧光）GC法一含挥发性成分的药物HPLC法一常与含量测定同时进行 例如万氏牛黄清心丸TLC法：黄苓背、供试品、黄苓空白三、杂质检查检查工程意义方法水分贮藏过程中保证质量的巾药指 标，霉变

6、、粘结、成分分解烘干法、甲苯法、 减压干燥法总灰分和酸 不溶性灰分控制药材申泥土、砂土的量炽灼残渣法重金属对人体有严重危害，药材由于 环境污染等原因易引入重金属 杂质，严重影响巾药出口干法、湿法破坏疏代 乙酰胺法神盐药材由于受除草剂、杀虫剂、 化学肥料等影响易引入神盐古蔡法、二乙基二硫 代氨基甲酸银法等农药残留药材栽培为了减少虫害，喷洒 农药，土壤巾残存的农药，含 磷、含氯，严重影响中药出口氧瓶燃烧法（不明农药 测定总氯硝量）、GC （农药）、比色等1、中药制剂特有的剂型及检查工程 丸剂一水分、溶散时限散剂一粒度（外用）、外观均匀度 煎膏剂（膏滋）相对密度、不溶物 流浸膏剂与浸膏剂一乙醇量茶剂

7、一水分、溶化性胶剂一总灰分、重金属、碎盐 酒剂-乙醇量、总固体、甲醇量露剂一pH值2、水分的测定烘干法（不含或少含挥发性成分） 甲苯法（含挥发性成分）减压干燥法（含挥发性成分贵重药）GC法3、总灰分的测定供试品鲁担塑f炭化500-600C ）A恒重灰化4、酸不溶性灰分的测定总灰分 d HCI 过滤上畸也处 灰化炭化四、含量测定1、限度规定 中药及其制剂中待测成分的含量限度，一般规定下限，如马鞭草按干燥品计算，含熊果 酸不得少于0.36%。 毒性中药应规定上下限。例如马钱子按干燥品计算，含土的宁应为1.20-2.20%o多植物来源的药材，如药材能区分开的，其含量差异较大的，可制订两个指标。2、常

8、用定量方法化学分析法，挥发油测定法，分光分度法，HPLC, GC,薄层色谱扫描法3、相对校正因子法同时测定中药多指标成分的含量原理：又称为一测多评法，是基于中药中常含有具有相似母核结构的同一类成分，通 过实验计算出各成分吸收系数间稳定的相关数值，仅测定1个有对照品的目标成分，进 而计算出其他同类成分的含量。 所选择的质控指标应是药材中的有效成分或指标性成分，待测成分应有相对较高的含量; 样品收集应选择有代表性的药材，样本数具有统计学意义；并进行各项分析方法学指标 验证。 中国药典采用此法对黄连中的表小粱碱、黄连碱、巴马汀、小豪碱进行含量测定第四节 中药平安性相关的质量控制工程 重金属与碑盐检查

9、农药残留量分析 黄曲霉素测定：桃仁、杏仁及相应制剂中药注射剂：重金属和有害元素限度 中药掺伪掺假和非法添加的检查毒性成分的控制：附子：含双酯型生物碱，毒性强，采用TLC对乌头碱限量检查；1、重金属与碑盐检查ChP附录收载有四种重金属检查法，参见总论第5章 碑盐检查法：古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法双硫踪比色法：选择性地测定制剂中的铅 原子吸收分光光度法：铅使用铅空心阴极灯测定；碑用碑空心阴极灯高效液相色谱电感耦合等离子体质谱：测定中药中不同价态重金属离子的含量2、农药残留量分析有机氯类：六六六、DDT、五氯硝基苯、艾氏剂有机磷类：磷酸酯类(敌敌畏、敌百虫)、硫代磷酸酯类(对硫磷)、磷酰胺及硫

10、代磷酰胺(甲胺磷)拟除虫菊酯类：氯鼠菊酯、溟鼠菊酯氨基甲酸酯类：西维因、吠喃丹ChP2010 一部附录IX Q农药残留量测定法有机氯类农药残留量测定 色谱条件与系统适用性试验: SE-54 (30m, 0.32mm, 0.25um)或 DB-1701, 63Ni-ECD 电子捕获检测器。进样口温 度：230；检测器温度：300；不分流进样；程序升温：初始100,每分钟10升 至220,每分钟8c升至250C,保持10分钟。 理论塔板数按a -BHC峰计算，不低于106,别离度应大于1.5o混合对照品溶液:BHC (a、B、丫、6-BHC) , DDT (PP-DDE、PP-DDD、OP -DD

11、T、PP -DDT),五氯硝基苯(PCNB),溶剂为石油酸(60-90)； 供试品溶液制备:药材、中药制剂进样量:lul 按外标法计算9种农药残留量3、中药掺伪造假 掺杂掺伪造假用白芍的根茎局部染色加工成川乌、草乌 用红薯染色加工成制首乌；用淀粉压模制成冬虫夏草； 西洋参掺入生晒参短枝用薄纸切细丝染色掺杂于西红花中； 滥用硫磺熏蒸药材使美观和防虫蛀第五节 中药指纹图谱和特征图谱定义：运用现代分析技术表征和评价具有代表性中药化学成分群信息。“现代分析技术”：光谱、色谱、波谱、联用技术，以及化学计量学和计算机技术等。“中药化学成分群”：药材、饮片、中药提取物和成药中与药理活性相关的，由次生代谢产

12、物组成的化合物群。“代表性”：中药化学成分群信息须具有统计学意义的样本数。令 国际上基本认可，草药色谱指纹图谱可以提供复杂成分的定性甚至定量信息，考察生产 中的影响，控制产品的一致性。1、色谱指纹图谱的基本属性整体性：将指纹图谱作为一个整体来分析和比拟它的综合特征以到达鉴别的目的。模糊性：强调分析、比拟指纹图谱的相似性，而不是完全相同。是一种综合的、量化的色谱鉴别手段。2、指纹图谱的制定原那么系统性：指图谱所反映的化学成分全部信息，其中包括中药有效部位所含主要成分的种类, 或指标成分的全部。特征性：指图谱中反映的化学成分信息是具有高度选择性的，这些信息的综合结果，将有助 于特征区分中药的真伪与优劣。稳定性：在规定的方法与条件下，不同的操作者和不同的实验室应能作出相同的指纹图谱。3、色谱指纹图谱平台流程（中药液相色谱（中药液相色谱1 .计算机辅助指纹图谱评价2 .多成分定量分析方法建立中药预处理色谱条件初始化别离方法学考察巾药指纹图谱 工作站软件调整色谱条件第六节中药体内分析 中药体内定量分析方法中药药代动力学 代谢组学研究例如：基于RPLC-HIL