第四章、药物定量分析与分析方法验证

1、第四章第四章 药物定量分析与分析方法验证药物定量分析与分析方法验证Quantitative Analysis and Analytical Method Validation内容内容第一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点第二节第二节 定量分析样品的前处理方法定量分析样品的前处理方法第三节第三节 药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证第二节第二节 定量分析样品的前处理方法定量分析样品的前处理方法一、概述一、概述 含金属药物含金属药物含卤素药物含卤素药物C-X根据所含金属或卤素在分根据所含金属或卤素在分子中结合的牢固程度，采子中结合的牢固程度，采用不同方法进行处理

2、。用不同方法进行处理。富马酸亚铁富马酸亚铁葡萄糖酸锑钠葡萄糖酸锑钠枸橼酸铋钾枸橼酸铋钾葡萄糖酸锌葡萄糖酸锌酒石酸锑钾酒石酸锑钾范影酸范影酸三氯叔丁醇三氯叔丁醇碘番酸碘番酸磺溴酞钠磺溴酞钠二、不经有机破坏的分析方法二、不经有机破坏的分析方法（一）直接测定法（一）直接测定法金属原子不与碳直接相连的或金属原子不与碳直接相连的或C-M键结合不牢固的有机金键结合不牢固的有机金属药物，在水溶液中电离，可选用适当方法直接测定。属药物，在水溶液中电离，可选用适当方法直接测定。例 葡萄糖酸锑钠葡萄糖酸锑钠为组成不定的五价锑，采用为组成不定的五价锑，采用间接碘量法测定锑的含量。在酸性条件下反应：间接碘量法测定锑的

3、含量。在酸性条件下反应：Sb5+ + 2I- = Sb3+ + I2Na2S2O3CH2OHCHOHCHOCHOCHOCOO-SbOHOSbO-OCHCHCHCCHOOCH2-OOHOHONa39H2O葡萄糖酸钙葡萄糖酸钙EDTA滴定法测定。滴定法测定。富马酸亚铁富马酸亚铁在热的稀硫酸中溶解，释放出在热的稀硫酸中溶解，释放出Fe2+，用，用Ce(SO4)2滴定液滴定。滴定液滴定。CCHCCOOOFeOCe4+ + Fe2+ = Fe3+ + Ce3+（二）水解法（二）水解法1.酸水解法酸水解法原理原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe3+ NN3Fe2+ - e- -NN3Fe3+红色

4、红色浅蓝色浅蓝色OCCHOFeHCCOOOOCCHOHCCO+Fe2+十一烯酸锌的含量测定十一烯酸锌的含量测定十一烯酸锌十一烯酸锌HCl共沸共沸滤除十一烯酸滤除十一烯酸氯化锌氯化锌EDTA-2Na（2）碱水解法）碱水解法适用于适用于C-X（卤素与脂肪（卤素与脂肪C相连）相连）例：例：三氯叔丁醇含量的测定三氯叔丁醇含量的测定CCH3OHCH3CCl3CCl3- -C(CH3)2- -OH + 4NaOH 回流回流(CH3)2- -CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2ONaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCNAgSCN + NH4NO3（淡棕红

5、色）（淡棕红色）(Ksp=1.561010 )(Ksp=1.010- -12 )Fe3+ + SCN Fe (SCN) 2+ 注意：注意：1）沉淀转化）沉淀转化加有机溶剂或先过滤；加有机溶剂或先过滤； 2）Fe3+的水解的水解酸性中滴定。酸性中滴定。（二）还原法（经水解还原后测定）（二）还原法（经水解还原后测定）卤素卤素芳环芳环结合牢固，需在碱性条件下结合牢固，需在碱性条件下加还原剂加还原剂回流，使回流，使C-X键断裂，形成无键断裂，形成无机卤化物后测定。机卤化物后测定。锌粉锌粉COOHINHCOCH3IIH3COCHN+ 11NaOH + Zn回流回流COONaN H2 H2N+ 3NaI

6、+ 2CH3COONa + 2Na2ZnO2 + H2OI- + Ag+ = AgI曙红钠指示剂曙红钠指示剂泛影酸的含量测定泛影酸的含量测定碘番酸含量的测定碘番酸含量的测定uUSP、BP、 Ch. P均采用均采用NaOH碱性条件碱性条件下用下用Zn粉还原，用粉还原，用AgNO3滴定液进行滴定滴定液进行滴定。u指示终点方法不同：指示终点方法不同：Ch. P： 曙红钠曙红钠USP： 四溴酚酞乙酯四溴酚酞乙酯BP： 电位法电位法IH2NIICH2CHCOOHC2H5三、经有机破坏的分析方法三、经有机破坏的分析方法湿法破坏湿法破坏HNO3-HClO4HNO3-H2SO4H2SO4-MSO4破坏力强，反

7、应激烈，注意勿蒸破坏力强，反应激烈，注意勿蒸干，以免爆炸。适于生物样品破干，以免爆炸。适于生物样品破坏，所得无机金属离子为高价态。坏，所得无机金属离子为高价态。对含氮杂环药物不适宜。对含氮杂环药物不适宜。适于大多数有机药物的破坏，适于大多数有机药物的破坏，所得无机金属离子为高价态，所得无机金属离子为高价态，对碱土金属药物不适用，可对碱土金属药物不适用，可用用H2SO4-MSO4法。法。所得金属离子为低价态，含碳所得金属离子为低价态，含碳量低的药物宜添加适量淀粉等量低的药物宜添加适量淀粉等多碳化合物，以保证破坏过程多碳化合物，以保证破坏过程中将金属离子转化为低价态中将金属离子转化为低价态HNO3

8、-H2SO4-HClO4H2SO4-氧化剂（H2O2，KMnO4）其它湿法破坏后金属呈高价态破坏后金属呈高价态凯氏定氮法（凯氏定氮法（Kjeldahl Nitrogen Determination）用于含氮有机药物的定量分析，以H2SO4-MSO4为破坏试剂，通过消解-蒸馏-滴定三步操作完成含氮药物的定量测定。R-NH2H2SO4K2SO4(NH4)2SO4NH4HSO4NH3NaOHCuSO4NH3+ H3BO3 NH4BO2 + H2OH2SO4滴定干法破坏干法破坏1. 高温炽灼法高温炽灼法：将有机物置于坩埚中，加：将有机物置于坩埚中，加Ca(OH)2或无水或无水Na2CO3或或Mg(NO

9、3)2或或ZnO，先小火加热，然后高温灰化。先小火加热，然后高温灰化。n适用于湿法不易破坏完全的有机药物（如适用于湿法不易破坏完全的有机药物（如含含N杂环），以及不能用杂环），以及不能用H2SO4破坏的有机破坏的有机药物，但不适用含挥发性金属的有机药物。药物，但不适用含挥发性金属的有机药物。注意：本法所得灰分往往不易溶解，注意：本法所得灰分往往不易溶解，但不能丢弃。但不能丢弃。2 氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法待测元素从有机结合状待测元素从有机结合状态转变为无机离子；态转变为无机离子；用于含用于含X, S, N, Se等元素等元素的有机药物的鉴别检查和的有机药物的鉴别检查和含量测定；含量测定；装置装置

10、将将含有卤素或硫等元素含有卤素或硫等元素的有机药物在的有机药物在充满充满氧气氧气的的密闭密闭燃烧瓶中进行燃烧瓶中进行燃烧燃烧，并将燃烧产物，并将燃烧产物吸收吸收于适当的吸收液中，再采用适宜的分析方于适当的吸收液中，再采用适宜的分析方法来检查或测定法来检查或测定卤素或硫等元素的卤素或硫等元素的含量含量。2. 氧瓶燃烧测定法氧瓶燃烧测定法(Oxygen flask combustion method)（1）原理）原理2NaOHCClOHClNaCl- 点燃溶液适用于含卤素、硫、氮、硒等有机药物的分析适用于含卤素、硫、氮、硒等有机药物的分析。 特点特点：简便、快速、破坏完全，尤其适用于简便、快速、破

11、坏完全，尤其适用于微量样品的分析微量样品的分析（ 2） 仪器与材料仪器与材料 仪器装置仪器装置 燃烧瓶为燃烧瓶为500、1000或或2000ml无色、磨口、厚壁、无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空空心，底部熔封铂丝一根，心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状下端呈螺旋状或网状。称样用材料及称样称样用材料及称样 A. 固体样品固体样品: 无灰滤纸无灰滤纸 B. 液体样品液体样品 : 纸袋纸袋 C. 软膏类样品：将适量样品置软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的不含被测成分的蜡油纸蜡油纸中包裹严密，中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹外层再用无灰滤纸包裹吸收液吸收液 A.

12、作用：将样品经燃烧分解所作用：将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为硒等，定量地吸收并转变为单一单一的的便于测定的价态便于测定的价态氧气氧气B. 吸收液的选择吸收液的选择氟氟 水水 氯氯 NaOH溶液溶液溴溴 NaOH-SO2饱和溶液饱和溶液碘碘 NaOHSO2饱和溶液饱和溶液 硫硫 H2O2 -H2O 磷磷 硝酸溶液硝酸溶液（3）操作方法）操作方法燃烧瓶燃烧前的准备燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后，按各药品项下用洗液洗净后，按各药品项下的规定加入吸收液，将瓶口用水湿的规定加入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入氧气润，小心急速

13、地通入氧气1min，立即用表面皿覆盖瓶口。立即用表面皿覆盖瓶口。样品的准备样品的准备 取样品适量，精密称定后按规取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝下端的定方法包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。网内或螺旋处。样品的燃烧样品的燃烧 点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片应无黑色碎片），充分），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置放置15min15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，用水少量冲洗瓶塞及铂丝

14、，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行检查或然后按各药品项下规定的方法进行检查或测定。测定。BrBrBrBrOSOHHOSONaOOONaOOO燃烧分解燃烧分解O2HBr + S2- + SO42- + HBr + S2- NaBr + Na2SO4 + H2O NaOH, H2O2Br- + Ag + AgBr剩余的Ag+ + SCN- AgSCN例例 磺溴酞钠的含量测定磺溴酞钠的含量测定 Ch.P (2010)例例 碘苯酯的含量测定碘苯酯的含量测定 Ch.P（2010）碘苯酯碘苯酯CHCH3(CH2)8COOCH2CH3I原

15、理原理 碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶燃烧分解，转变为碘化物，继而氧化燃烧分解，转变为碘化物，继而氧化为游离的碘，并被定量地吸收于吸收为游离的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氢氧化钠反应，生成碘化物液中，和氢氧化钠反应，生成碘化物与碘酸盐，加入与碘酸盐，加入溴溴- -醋酸醋酸溶液，溶液，使全部使全部转变为碘酸盐转变为碘酸盐，过量的，过量的溴以甲酸溴以甲酸及及通通空气去除空气去除。加入碘化钾，使与碘酸盐。加入碘化钾，使与碘酸盐反应析出游离碘，用硫代硫酸钠液滴反应析出游离碘，用硫代硫酸钠液滴定，碘与淀粉结合所显的蓝色消失即定，碘与淀粉结合所显的蓝色消失即为终点为终点. .滴定

16、度的计算滴定度的计算 放大反应放大反应I2 + NaOHNaIO+NaI3NaIONaIO3+2NaINaI+3Br2+3H2ONaIO3 + 6HBrIO3- + 5I- - + 6H+3I2 + 3H2OI2+ 2S2O32-2I-+S4O62-1mol碘苯酯碘苯酯3 mol I2 6 molNa2S2O3反应摩尔比为反应摩尔比为1 60.02 416.341.388/6CMTmg mln思考题试述氧瓶燃烧法和凯氏定氮法的原理以及两法的异同。若用氧瓶燃烧后碘量法测定泛影酸含量，每1 mLNa2S2O3滴定液（0.02 mol/L）相当于多少毫克的泛影酸？COOHINHCOCH3IIH3CO

17、CHN泛影酸泛影酸第五章第五章 体内药物分析体内药物分析一一、常用生物样品的种类常用生物样品的种类、采集和贮藏采集和贮藏l血样血样血浆血浆(plasma)血清血清(serum)全血全血(whole blood)全血全血+抗凝剂抗凝剂(肝素肝素) 离心离心 上清液上清液全血全血 离心离心 上清液上清液全血全血+抗凝剂抗凝剂(肝素肝素) 混合混合 注意注意：采血后应尽快：采血后应尽快(24 h)分离出血分离出血浆浆、血清，再冰冻保存血清，再冰冻保存(-20 oC).l尿液尿液(Urine)收集服药后一定收集服药后一定时间时间内内(8 h、12 h、24 h)尿样，记尿样，记录体积，混匀后取一定量，

18、测定尿中药物浓度，计录体积，混匀后取一定量，测定尿中药物浓度，计算一定时间内尿中药物的累积量。算一定时间内尿中药物的累积量。尿中药物浓度变化较大，其变化不能直接反映血液尿中药物浓度变化较大，其变化不能直接反映血液中药物浓度，因此两者相关性较差。中药物浓度，因此两者相关性较差。尿中药物以尿中药物以原型原型、代谢物代谢物或或缀合物缀合物形式存在。主形式存在。主要用于要用于药物剂量回收药物剂量回收，肾清除率，代谢类型研究及，肾清除率，代谢类型研究及人群代谢分型研究。人群代谢分型研究。尿液主要成分是水尿液主要成分是水、尿素尿素、盐类，易长细菌，短期盐类，易长细菌，短期(24-36 h)保存可置保存可置

19、4 oC冷藏或加防腐剂冷藏或加防腐剂(如如甲苯、氯仿甲苯、氯仿、浓盐酸浓盐酸等等)，若长期保存则需冷冻保存。，若长期保存则需冷冻保存。l唾液唾液(Saliva)漱口漱口15 min后收集口内自然流出或经舌尖在后收集口内自然流出或经舌尖在口内搅动后流出的混合唾液，离心后取上清。口内搅动后流出的混合唾液，离心后取上清。唾液采集不受时间唾液采集不受时间、地点限制，容易反复采地点限制，容易反复采集，采集时患者无痛苦。集，采集时患者无痛苦。唾液组成受各种因素影响，个体差异大，与唾液组成受各种因素影响，个体差异大，与血浆药物浓度相比，唾液中药物浓度变化不大，血浆药物浓度相比，唾液中药物浓度变化不大，且浓度

20、较低。但且浓度较低。但部分药物在血浆中的游离药物部分药物在血浆中的游离药物浓度与唾液中浓度相当浓度与唾液中浓度相当。因此，可由唾液中药。因此，可由唾液中药物浓度推断血浆中药物浓度。物浓度推断血浆中药物浓度。l组织组织l头发头发二、生物样品分析前处理技术二、生物样品分析前处理技术考虑的因素：考虑的因素：l药物的药物的理化性质理化性质（酸碱性、亲脂性、挥发（酸碱性、亲脂性、挥发性、性、UV吸收、稳定性、代谢途径等）吸收、稳定性、代谢途径等）l药物浓度药物浓度（ug、ng级）级）l样本类型样本类型（血、组织需除蛋白；唾液需除（血、组织需除蛋白；唾液需除黏蛋白；尿液需将缀合物水解）黏蛋白；尿液需将缀合

21、物水解）分析技术：分析技术：光谱分析（光谱分析（UV、荧光）、荧光）色谱分析（色谱分析（HPLC、GC、LC/MS、GC/MS、TLC）免疫分析（放射免疫分析法（免疫分析（放射免疫分析法（RIA）、酶免疫分析）、酶免疫分析法法（EIA）、）、荧光免疫分析法（荧光免疫分析法（FIA）样品处理步骤与分析方法选择样品处理步骤与分析方法选择HPLC、LC/MS/MS1.沉淀蛋白沉淀蛋白2.调节调节pH血样血样/组织组织提取提取分离分离净化净化浓缩浓缩残渣残渣溶解溶解酸碱回提酸碱回提衍生化衍生化免疫分析免疫分析GC/MS光谱法光谱法去除蛋白去除蛋白l意义意义：使结合型药物释放出来，以测定药物总浓度，使结

22、合型药物释放出来，以测定药物总浓度，得到较得到较“干净干净”的提取液，消除对测定的干扰。的提取液，消除对测定的干扰。l方法：方法：u蛋白质沉淀法蛋白质沉淀法溶剂沉淀法：溶剂沉淀法：乙腈、甲醇、丙酮、四氢呋喃等乙腈、甲醇、丙酮、四氢呋喃等中性盐盐析法：中性盐盐析法：硫酸铵、硫酸钠、硫酸镁、氯化钠、硫酸铵、硫酸钠、硫酸镁、氯化钠、磷酸钠等磷酸钠等强酸沉淀法：强酸沉淀法：10%三氯醋酸、三氯醋酸、6%高氯酸高氯酸热凝固法：热凝固法：90oC，只能除去热凝固蛋白，只能除去热凝固蛋白u酶水解法酶水解法蛋白水解酶（枯草菌溶素）蛋白水解酶（枯草菌溶素）缀合物（结合物）水解缀合物（结合物）水解含含羟基羟基、氨

23、基氨基、羧基羧基、巯基巯基的药物或代谢物的药物或代谢物与与葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸结合成苷，与结合成苷，与硫酸硫酸结合成酯。结合成酯。这些缀合物的极性较母体大，亲水性强，不这些缀合物的极性较母体大，亲水性强，不易被有机溶剂提取，需水解处理。易被有机溶剂提取，需水解处理。方法：方法：酸水解酸水解：简便、快速，但专一性差；简便、快速，但专一性差；酶水解酶水解：-葡糖糖醛酸苷酶、硫酸酯酶或两葡糖糖醛酸苷酶、硫酸酯酶或两者的混合酶；者的混合酶；溶剂水解溶剂水解分离、净化和浓集分离、净化和浓集u提取法提取法：液：液-液提取、液液提取、液-固提取固提取 液液-液提取液提取：选与水不相混溶的有机溶剂进：选与水不

24、相混溶的有机溶剂进行提取。行提取。 提取的关键性问题：提取的提取的关键性问题：提取的选择性选择性和提取和提取率的率的重复性重复性。影响提取的因素主要有：影响提取的因素主要有：水相水相pH、提取溶、提取溶剂、离子强度剂、离子强度。液液-固提取固提取固相萃取固相萃取 (solid phase extraction, SPE)固相柱种类（固相柱种类（C-8，C-18，离子交换等），离子交换等）规格（填料量、体积）规格（填料量、体积）形状（针筒型、子弹型）形状（针筒型、子弹型）固相萃取步骤（以反相柱为例）固相萃取步骤（以反相柱为例） 活化活化：6-10倍体积的甲醇或乙腈润洗填料，使倍体积的甲醇或乙腈润

25、洗填料，使其溶剂化；其溶剂化；6-10倍体积的水或缓冲液冲洗柱子，倍体积的水或缓冲液冲洗柱子，使其达到良好的吸附分离状态；使其达到良好的吸附分离状态； 上样上样：将样品加到柱子上，用抽真空或加压：将样品加到柱子上，用抽真空或加压的方法，让样品缓缓通过萃取柱。的方法，让样品缓缓通过萃取柱。 净化分离净化分离：用适当溶剂洗涤，使感兴趣化合：用适当溶剂洗涤，使感兴趣化合物保留在柱子上，洗除杂质，达到净化目的。物保留在柱子上，洗除杂质，达到净化目的。 洗脱洗脱：改变洗脱剂的极性：改变洗脱剂的极性 和（或）和（或）pH，使待，使待测物从柱上解吸，收集洗脱液。测物从柱上解吸，收集洗脱液。SPE示意图示意图

26、 优点：优点： 1. 引入杂质少引入杂质少 2. 提取效率高，可用少量生物样品进行分析提取效率高，可用少量生物样品进行分析 3. 不会形成乳化现象不会形成乳化现象 3. 处理样品速度快处理样品速度快 4. 安全、价廉安全、价廉 5. 萃取操作可在室温进行，适于处理挥发性及萃取操作可在室温进行，适于处理挥发性及对热不稳定的药物对热不稳定的药物。被测组分的浓集被测组分的浓集直接吸出适量供分析直接吸出适量供分析 尖底试管，加入小体积的、比重大的有机溶剂尖底试管，加入小体积的、比重大的有机溶剂挥去提取溶剂法挥去提取溶剂法l氮气流吹干法氮气流吹干法：适用于不易挥发的药物：适用于不易挥发的药物l减压法减压

27、法：适用于易挥发或遇热不稳定的药物：适用于易挥发或遇热不稳定的药物化学衍生化化学衍生化目的目的 增加被测组分的热稳定性和挥发性（增加被测组分的热稳定性和挥发性（GC）减少被测组分在样品处理过程中因吸附强而减少被测组分在样品处理过程中因吸附强而导致的损失；导致的损失；改善被测组分的色谱行为；改善被测组分的色谱行为； 增加被测组分的检测灵敏度和选择性增加被测组分的检测灵敏度和选择性提高光学异构体的分提高光学异构体的分离的能力离的能力 方法：方法： GC：硅烷化、酰化、烷基化：硅烷化、酰化、烷基化HPLC：荧胺、丹酰氯、邻苯二醛：荧胺、丹酰氯、邻苯二醛三、体内样品分析方法与方法验证三、体内样品分析方

28、法与方法验证（1）特异（专属）性（）特异（专属）性（Specificity）：）：样品中样品中含有其他共存物质时，该法定量测定被测物的能力。含有其他共存物质时，该法定量测定被测物的能力。在生物样品分析中主要考察：代谢物、内源在生物样品分析中主要考察：代谢物、内源性物质，同时服用药物的干扰，以及在性物质，同时服用药物的干扰，以及在LC/MS测定中的介质效应。测定中的介质效应。HPLC要求提供：要求提供： 空白生物样品色谱图；空白生物样品色谱图； 空白生物样品空白生物样品+对照物质的色谱图；对照物质的色谱图； 用药后的生物样品色谱图。用药后的生物样品色谱图。（2）线性）线性范围范围与与校准曲线校准

29、曲线线性线性是指药物浓度与响应值的相关性，用回是指药物浓度与响应值的相关性，用回归方程来评价，一般归方程来评价，一般r0.99。线性范围线性范围：标准曲线的高低浓度范围。在线：标准曲线的高低浓度范围。在线性范围内供试品浓度测定结果应符合实验要求性范围内供试品浓度测定结果应符合实验要求的精确度与准确度。（偏差在的精确度与准确度。（偏差在15%以内）以内） 偏差%=回归值-标示值标示值100%至少用至少用6个浓度个浓度建立标准曲线，使用与建立标准曲线，使用与待测样品相同的生物介质，线性范围能待测样品相同的生物介质，线性范围能覆盖全部待测浓度，覆盖全部待测浓度，不允许外推不允许外推，标准，标准曲线曲

30、线不包括零点不包括零点。(3) 精密度精密度(precision)与准确度与准确度(accuracy)l选择选择高、中、低高、中、低三个浓度的质控样品，同三个浓度的质控样品，同时进行方法的精密度和准确度考察。时进行方法的精密度和准确度考察。l低浓度在定量下限的低浓度在定量下限的3倍内倍内，高浓度接近，高浓度接近标准曲线上限，中间选一个浓度，一般要求标准曲线上限，中间选一个浓度，一般要求每个浓度每个浓度n5。l日内、日间精密度用日内、日间精密度用RSD表示，一般表示，一般15%，定量下限这一点定量下限这一点20%。l准确度准确度:表示测得浓度与真实浓度的接近程度，表示测得浓度与真实浓度的接近程度，用用回收率回收率（recovery）表示，一般应在）表示，一般应在85-115%之间，定量下限附近在之间，定量下限附近在80-120%之间。之间。（4）定量下限）定量下限Lower Limit of Quantification, LLOQ是标准曲线上的是