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文档简介
1、提示:鉴定还原糖时,选择白色材料能排除实验材料自身颜色对颜色反应的影响。鉴定脂肪时一般不选择蓖麻,因为其虽含脂肪较多,但有坚硬的外壳,不易除去,很难制作切片。使用蛋清时若不稀释,则实验后会粘在试管壁上,使反应不彻底,试管不易洗刷。2.试剂使用的注意事项斐林试剂很不稳定,故应将组成斐林试剂的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)分别配制、储存,使用时再临时配制。苏丹染液的染色时间为23分钟,苏丹染液的染色时间为1分钟,时间不能太长。双缩脲试剂的使用,应先加试剂A( 0.1g/mL的NaOH溶液),造成碱性环境,再加试剂B (0.01g/mL的CuSO4溶液
2、)。第1页/共39页【实验步骤】蓝色蓝色砖红色砖红色第2页/共39页苏丹苏丹50%的酒精溶液的酒精溶液橘黄色橘黄色脂肪脂肪第3页/共39页第4页/共39页【要点分析】一、实验中的注意事项1.对试管中的溶液进行加热时,试管底部不要触及烧杯底部;另外,试管口不要朝向人,以免沸腾的溶液冲出试管,造成烫伤。2.在提取液与斐林试剂混合后,为缩短时间,实验前可将烧杯内的水煮沸备用。3.鉴定还原糖和蛋白质时,在鉴定之前可以留出一部分样液,以便与鉴定后样液的颜色变化作对比,这样可以增强说服力。第5页/共39页第6页/共39页三、利用本实验原理和方法可以解决以下问题1.鉴定生物组织或器官中的有关成分。2.在医学
3、上进行疾病的诊断。3.鉴定某些消化液中酶的化学本质。4.用于食品中相关成分的鉴定。5.比较不同生物组织中相关成分含量的高低。6.检测生物在不同的代谢条件下,尿液中某些成分的变化。第7页/共39页实验练习1.(2009 宁波模拟)实验测得小麦、大豆、花生三种生物干种子中三大类有机物含量如图,有关叙述正确的是 ( )第8页/共39页A.选用花生检验细胞中有无脂肪存在时需要使用显微镜B.向小麦种子的研磨滤液中加入斐林试剂,就会出现砖红色C.用双缩脲试剂检验大豆组织样液中存在蛋白质,加热呈蓝色D.向萌发的小麦种子的研磨滤液中加入斐林试剂,立即便可观察到呈砖红色A第9页/共39页2.在下表中的四支试管中
4、加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是( )甲甲豆浆豆浆乙乙氨基酸溶液氨基酸溶液丙丙牛奶和蛋白酶牛奶和蛋白酶丁丁人的红细胞和清水人的红细胞和清水A.甲、丁甲、丁 B.甲、乙、丁甲、乙、丁 C.甲、乙、丙甲、乙、丙 D.甲、丙、丁甲、丙、丁D第10页/共39页实验二 观察植物细胞的有丝分裂第11页/共39页实验三 比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用第12页/共39页【实验原理】1、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率催化底物催化剂反应式现象H2O2Fe3+2H2O22H2O+O2产生氧气少过氧化氢酶产生氧气多第13页/共39页2、探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用 淀粉 麦芽
5、糖(1)非还原糖 还原糖 蔗糖 葡萄糖+果糖(2)还原糖+斐林试剂 砖红色沉淀(3)用淀粉酶分别催化淀粉溶液和蔗糖溶液后,再用斐林试剂鉴定,根据是否有砖红色沉淀来判断淀粉酶是否对二者都有催化作用,从而探索酶的专一性。煮沸1min酶酶第14页/共39页【实验步骤】1.比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率第15页/共39页2滴肝脏研滴肝脏研磨液磨液2滴氯化滴氯化铁溶液铁溶液多多剧烈剧烈少少不剧烈不剧烈高效性高效性第16页/共39页2.探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用可溶性淀可溶性淀粉溶液粉溶液新鲜的新鲜的淀粉酶淀粉酶溶液溶液60 第17页/共39页有有 没有没有专一性专一性第18页/共39页要点分析一
6、、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率1.注意事项(1)滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管。原因是酶的催化效率具有高效性,少量酶带入氯化铁溶液中也会影响试验结果的准确性。(2)过氧化氢有一定的腐蚀性,使用时不能让其接触皮肤。第19页/共39页2、实验现象的观察(1)理论基础:通过观察同一时间内两支试管中气泡产生量和产生速率来比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(2)观察指标:气泡产生速率、卫生香燃烧程度。提示:使用肝脏研磨液的目的是增大过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积,从而加速过氧化氢的分解。 两试管最终产生的氧气量是相等的,只是速度快慢不同。第20页/共39页二、探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的
7、作用1.探索酶具有专一性的试验设计思路第21页/共39页2.注意事项(1)酶与底物混合后,应将试管在相应温度下(淀粉酶为60,唾液淀粉酶为37 )保持一段时间后,再加入斐林试剂共热,否则会导致酶因温度过高而失活。(2)制备的可溶性淀粉溶液,必须完全冷却后才能使用,如果用刚煮沸的可溶性淀粉溶液进行试验,会因温度过高而破坏淀粉酶的活性。(3)鉴定试剂不能选用碘液,因蔗糖及其分解产物葡萄糖和果糖与碘液都无颜色变化,这样淀粉酶是否能催化蔗糖水解就得不到验证。第22页/共39页3.试验结果分析 若加入蔗糖的试管内最终也出现砖红色沉淀,其原因可能是:(1)蔗糖不纯,混有还原糖。(2)蔗糖溶液放置时间过长,
8、被微生物分解生成还原糖。(3)试管不干净,试管壁上带有还原糖。第23页/共39页实验演练1.某同学进行了如下实验第24页/共39页根据实验内容,下列说法正确的是( )A.说明酶具有高效性的是3号和4号实验B.1号和3号对照不能说明酶有专一性C.3号和5号对照可以说明酶的活性受PH影响D.实验中不能体现酶的活性与温度之间的关系2.如图为不同条件下,酶催化反应速率(或生成物)的变化情况,以下叙述不正确的是C第25页/共39页A.图能用来表示反应物浓度变化与反应时间的关系。B.图虚线为增加酶浓度后,其他条件不变时,生成物的量与反应时间的关系。C.若图中实线表示过氧化氢酶对H2O2的催化效率,则虚线表
9、示Fe3+的催化效率。D.图也可以用来表示处理温度不同的情况下,反应速率与时间的关系C第26页/共39页实验四 叶绿体中色素的提取和分离实验原理1.色素提取的原理 叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂(丙酮)中,利用有机溶剂(丙酮)提取叶绿体中的色素。2.色素分离的原理 (1)叶绿体中的色素在层析液中溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快。 (2)利用纸层析法将不同色素分离开。第27页/共39页用品分析1.新鲜的绿色叶片 选取的叶片应是新鲜、颜色深绿的,以便提取到较多的叶绿素。2.二氧化硅和碳酸钙的作用(1)二氧化硅:使叶片研磨的更加充分。(2)碳酸钙:调解PH,防止在研磨时叶绿体中的色素
10、受到破坏。第28页/共39页实验步骤1.提取色素:称重、剪碎、研磨、过滤、收集滤液2.制备滤纸条3.画滤液细线4.色素分离(纸层析法)5.观察结果第29页/共39页要点分析一、色素的提取和分离过程中的注意事项及操作分析1.称取绿叶质量和加入丙酮的体积要适当,以保证提取液色素的浓度。2.滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,防止滤液挥发。3.研磨要迅速、充分的原因(1)丙酮容易挥发;第30页/共39页(2)可以使叶绿体完全破裂; (3)叶绿素极不稳定,能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。4.画线时,一定要细且直;重复画23次是为了增加滤液的细线上的色素分子数量,使实验效果更加明显。5.滤纸条上的滤
11、液细线不能触及到层析液,否则会使滤液中的色素溶于层析液中,滤纸条上得不到色素带。第31页/共39页二、实验结果:叶绿体中色素的种类及功能 由上图可以看出:1.含量:叶绿体中含量最多的色素是叶绿素a,含量最少的色素是胡萝卜素。2.扩散速度:扩散最慢的色素是叶绿素b,扩散最快的色素是胡萝卜素。3.距离:叶绿素a与叶绿素b之间距离最近,胡萝卜素和叶黄素之间的距离最远。第32页/共39页三、色素提取液颜色浅的原因分析 1.研磨不充分,色素未能充分提取出来。2.未加碳酸钙,叶绿体中色素分子被破坏。3.剪取叶片太少或加入丙酮太多,色素提取液浓度过低。4.选取叶片不够新鲜,是处于衰老或光照不足环境下生长的叶片。第33页/共39页实验五 DNA的粗提取与鉴定实验原理1.DNA的提取2.DNA的提纯:95%的冷酒精3.DNA的鉴定:DNA+二苯胺 蓝色沸水浴第34页/共39页用品分析1.实验材料的选择动物:鸡血细胞(含DNA丰富,经济易得)植物:新鲜菜花、菠菜等注:哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核,所以哺乳动物的血液不
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