糖类脂肪蛋白质核酸的鉴定

1、实验一：生物组织中可溶性还原糖、 脂肪、蛋白质的鉴定（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定1. 1. 实验原理实验原理 当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。 Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O+2H2O2 2 实验目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖的基本方法。

2、3 3 实验材料实验材料 做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验结果及其观察的最重要因素。 因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。4 4 试剂配制试剂配制 甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）斐林试剂 乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）甲、乙试剂千万要分开放，不可混合。在实验过程中，将4-5滴乙液滴入2mL甲液中现混现用！5 5 实验步骤实验步骤（1 1）制备组织样液（教师制备）制备组织样液（教师制备）（2 2）鉴定样液）鉴定样液先在试管中加入2mL组织样液再加入2mL刚配制的斐林试剂水浴煮沸2分钟注意观察整

3、注意观察整个实验过程个实验过程中，溶液颜中，溶液颜色的变色的变化！化！（二）生物组织中脂肪的鉴定（二）生物组织中脂肪的鉴定1 1 实验原理实验原理 苏丹是可以对脂肪染色的试剂，因此，当含有大量油滴的植物细胞用苏丹染色后，在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒。2 2 实验目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中脂肪的基本方法3 3 实验材料实验材料 做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。 将花生种子经过3-4小时的浸泡使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易碎裂，切不成薄片。4 4 试剂配制试剂配制 苏丹溶液：将0.1

4、g苏丹干粉溶于100mL体积分数为95%的酒精溶液中，待全部溶解后即成。5 5 实验步骤实验步骤（1 1）切片制作）切片制作去掉花生种皮用左手的三个手指夹住花生的一片子叶，使花生子叶高于手指之上（为为什么？什么？）。右手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连续动作，切下一些薄片。（2 2）染色）染色 用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央滴苏丹滴苏丹溶液溶液2-3滴于花生子叶薄片上滴于花生子叶薄片上2-3min后，吸去染液后，吸去染液滴

5、滴50%的酒精洗去浮色的酒精洗去浮色吸去吸去多余酒精多余酒精再滴再滴1-2滴蒸馏水滴蒸馏水盖上盖玻片，制成盖上盖玻片，制成临时装片。临时装片。（3 3）镜检鉴定）镜检鉴定 在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处（），移至视野的中心换用高倍镜观察，调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。（三）生物组织中蛋白质的鉴定（三）生物组织中蛋白质的鉴定1 1 实验原理实验原理 在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu 2+作用，形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。 由于蛋白质分子中含

6、有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。2 2 实验目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中蛋白质的基本方法。4 4 试剂配制试剂配制 A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）双缩脲试剂 B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）3 3 实验材料实验材料 做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质含量较高的大豆或鸡蛋白。5 5 实验步骤：实验步骤：（1 1）制备生物组织样液（教师制备）制备生物组织样液（教师制备）（2 2）鉴定）鉴定先加2mL组织样液再加2mL双缩脲试剂A液加3-4滴双缩脲试剂B液注意观察溶液中颜色的变化？1、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是（ ） A、用于鉴

7、定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B、脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用 B2、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是 （ ） A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定 B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料 C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 D、鸡蛋清含

8、蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料 A3、将三个鉴定实验与其使用的试剂和结果之间用直线连接起来。 可溶性还原糖 斐 林 试 剂 紫 色 脂 肪 双缩脲试剂 橘黄色 蛋 白 质 苏 丹 砖红色 NH2 | 4 、实验可知，在尿素（O=C）溶液中加入双缩脲试剂，也能产生紫色反应。依据蛋 |白质鉴定实验原理说明之。 NH2 实验：实验： 观察观察DNA和和RNA在细胞中的分布在细胞中的分布实验原理：甲基绿使实验原理：甲基绿使DNA呈现绿色呈现绿色 派洛宁使派洛宁使RNA呈现红色呈现红色 盐酸水解能改变细胞膜的通透性，加速染色盐酸水解能改变细胞膜的通透性，加速染色剂剂 进入细胞，使染色体的进入细胞，使染色体的DNA和蛋白质分离和蛋白质分离实验材料：实验材料： 口腔上皮细口腔上皮细胞胞实验步骤：实验步骤：A.取口腔上皮细胞取口腔上皮细胞 载玻片上滴载玻片上滴0.9 NaCl牙签刮取细胞，涂片牙签刮取细胞，涂片B.水解水解 8 盐酸水解盐酸水解30摄氏度温水摄氏度温水C.冲洗冲洗 蒸馏水（蒸馏水（DW）冲洗）冲洗D.染色染色