现代生物技术(一)

1、1、下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程的示意图。是导入目的基因的受体细胞，经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。已知几种氨基酸的密码子：甲硫氨酸（AUG）、甘氨酸（GGA）、丝氨酸（UCU）、酪氨酸（UAC）、精氨酸（AGA）、丙氨酸（GCU）,请根据图结合你所学过的知识回答以下问题:（1）步骤为 ，该过程是基因工程操作程序的核心，II包括 、四环素抗性基因、启动子、终止子以及复制原点等。将II导入双子叶植物棉花受体细胞最常用的方法是 。（2）为在短时间内大量获得目的基因，可用 扩增的方法，其原理是 。（3）

2、过程的原理是 。理论上，在该转基因植物自交产生的F1代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的 。（4）图中合成的多肽，其前三个氨基酸的序列是 。2、下图表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”主要培育流程，据图回答： （1）过程应用的生物技术主要是 。 （2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构设计并人工合成的，这属于 工程技术。 （3）若限制酶切割DNA他子后形成的末端为 ，则该酶识别的核苷酸序列是 。 （4）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析： 人工改造时，要使抗虫基因表达，还应

3、插入 。 人工改造时用限制酶处理，其目的是：第一，去除质粒上的 （基因），保证TDNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于 ；第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。 若用限制酶1分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒，分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是 。 （5）检测“华恢l号”具有抗虫性状的方法是 。3、下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。（1）能否利用人的皮肤细胞来完成过程？ 。原因是 。（2）过程称为 。（3）为使过程

4、更易进行，可用 处理D。为了检测大肠杆菌是否产生了人胰岛素，可采用的方法是 。（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。将用EcoRI切割后的目的基因与质粒用DNA连接酶进行连接，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有 种。将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是 。在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶

5、切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是 。（5）若要使A在体外通过过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是 。除酶外还需要加入引物，其作用是 。（6）如果用该技术将一个位于DNA一端的目的基因进行扩增，那么连续扩增4次后，只含目的基因的DNA占全部DNA的比例是 。4、36.（10分）长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟 ,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答： (1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 ，对 进行切割

6、。(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。（3）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是： (填字母序号)。 A启动子 B终止子 C 复制原点 D标记基因（4）将目的基因导入植物细胞常用方法有多种，图中所示方法为 。 （5）欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术 (填字母序号)。 A. 核酸分子杂交 B. 基因序列分析 C. 抗原-抗体杂交 D. PCR(6)利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成转基因植株。香蕉组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质外还必须含有 等植物激素

7、，它们会在 （填图中标号）阶段发挥作用，同时 （填图中标号）阶段还需要给予一定光照。（7）从香蕉组织块到获得转基因抗病香蕉试管苗的过程中，需经过 。(填数字)无丝分裂 有丝分裂 减数分裂 原代培养 传代培养 植物体细胞杂交 细胞融合 脱分化 再分化5、请回答有关下图的问题：(1)图甲中所示的生物工程为_。该工程是指以_作为基础，通过_修饰或基因合成，对现有_进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。(2)图甲中序号所示过程叫做_，该过程遵循的碱基互补配对原因不同于翻译过程的是_(请将模板碱基写在前)。(3)如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有

8、2_；图中3_的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号1代表的是_；且在图甲中过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体_的精子。(5)为获得较多的受精卵进行研究，图甲中过程一般用激素对供体做_处理；为提高培育成功率，进行过程之前，要对_动物做_处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在之前需进行体外培养到_期方能受精。(6)用_技术处理发育到_期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若对囊胚进行处理，要注意将_均等分割。6、回答有关生物工程的问题。转基因抗病香蕉的

9、培育过程如下图所示。图中Pst、Sma、EcoR、Apa等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。若要获得抗病基因，能否用限制酶Sma对图中对应的位点进行切割？_，说明理由_。要获得含抗病基因的重组质粒能否用Pst、Apa限制酶切割质粒？_。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有_基因，作为标记基因。利用组织培养技术能将香蕉组织细胞培育成植株，这是因为香蕉组织细胞具有_，图中、依次表示香蕉组织细胞的_和_的过程。、阶段是否可使用同种培养基？ _；理由是_。阶段是否可使用

10、不添加植物激素的培养基？_；理由是_。7、操纵元是原核细胞基因表达调控的一种组织形式，它由启动子、结构基因（编码蛋白基因）、终止子等部分组成。下图表示大肠杆菌细胞中核糖体蛋白（RP）合成及调控过程，图中表示相关生理过程，mRNA上的RBS是核糖体结合位点。请回答下列问题：（1）启动子和终止子的基本组成单位是 。（2）过程进行的场所是 ，RP1中有一段氨基酸序列为“一丝氨酸一组氨酸一谷氨酸一”，转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的反密码子分别为AGA、GUG、CUU，则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为 。（3）图示表明，当细胞中缺乏足够的rRNA分子时，核糖体蛋白RP1能与mRNA

11、分子上的RBS位点结合，从而导致mRNA ，终止核糖体蛋白的合成。这种调节机制既保证细胞内rRNA与核糖体在数量上的平衡，又可以减少 。（4）大豆中的一种成分染料木黄酮因能抑制rRNA形成而成为抗癌药物的成分，试结合题中信息分析染料木黄酮抗癌的机理：该物质（染料木黄酮）可以抑制rRNA的形成，RPI与mRNA中RBS位点结合， (2分)。8、（现代生物科技专题8分）干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血中提取，每升人血只能提取0.5g，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点。（1）从人的淋巴细胞中取出干扰素基因，一般可采用用_技术进行扩增，此基因

12、在基因工程中称为_。（2）此基因与细菌的质粒相结合要依靠_酶，其作用部位是_，然后将目的基因移植到酵母菌体内。（3）为了明确干扰素基因在酵母菌体内能否发挥功能作用，从分子水平看，首先要检测其是否_。（4）科学家在培养转基因植物时，常用土壤农杆菌中的质粒做运载体。质粒是基因工程最常用的运载体，它具备运载体的条件:能够在宿主细胞中_并稳定地保存；具有多个_，以便与外源基因连接；具有某些_，便于进行筛选。9、55（12分）据统计2009年甲型11流感在全球范围内致死超过12万人。9月8日，中国卫生部长陈竺表示，中国成为世界上第一个可以应用甲型H1N1流感疫苗的国家。甲型H1N1流感病毒是一种RNA病

13、毒，有多种类型，请回答下列与甲型11流感病毒有关的问题：（1）我国科研人员研制甲型H1N1流感病毒疫苗的简要操作流程如下：图中步骤所代表的过程是_；步骤可用_处理大肠杆菌，使其处于_；检验S基因是否翻译成S蛋白的方法是_。（2）有一个制药厂设想生产抗甲流的单克隆抗体，请你帮助完成制备单克隆抗体的主要步骤：用甲流病毒对小鼠进行注射，从产生免疫反应小鼠的_中得到相应的淋巴细胞；设法将鼠的_与淋巴细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，得到既能_，又能_的杂交瘤细胞；对上述杂交瘤细胞，还需进行_和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；将杂交瘤细胞在体内或_培养，就可以从中提

14、取出大量的能抗甲流的单克隆抗体了。（3）甲型H1N1流感病毒感染正常人体后能引发_；该病毒可能会通过发生_而改变传染性。10、40. 生物选修3：现代生物科技专题（15分）绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒（TMV）基因，可以合成一种抗TMV 蛋白，叶片对 TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于 TMV 的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如下图所示。（1）科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中过程表示_，获得的DNA必须在两侧添加_和_。（2）过程构建的重组Ti 质粒时，必须使用_和_两种工具酶。（3）由图分

15、析，在过程构建的重组Ti 质粒上应该含有卡那霉素抗性基因作为_，重组Ti 质粒导入烟草体细胞的方法是_。 （4）在过程培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加_，以保证受体细胞能培养成再生植株。（5）过程可采取_的方法，检测植株是否合成了抗 TMV 蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过_的方法来确定植株是否具有抗性。11、下图表示“华恢l号”抗虫水稻主要培育流程，据图回答：（1）杀虫基因（crylA）是根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于_工程技术范畴。（2）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限

16、制酶作用位点），据图分析：人工改造质粒时，要使抗虫基因能成功表达，还应插入_。人工改造质粒时，用限制酶处理，其目的是：第一，去除质粒上的_（基因），保证TDNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长；第二，使每种限制酶在质粒上只有单一作用位点，有利于_。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。若用限制酶分别切割经过过程改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的情况是：在含四环素的培养基中_，含卡那霉素的培养基中_。 12、【生物一现代生物科技专题】我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通

17、过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请回答：(1)在上述工程中，铁结合蛋白基因称为_，获取该基因后常用_技术进行扩增。(2)构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制酶分别切割_和_。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用_处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得_；培养基3与培养基2的区别是_。(4)检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻_。13、下图是某种动物蛋白质工程的示意图，请分析回答：(1)目前，蛋白质工程中难度最大

18、的图中编号_所示的过程，实现过程的依据有_。(2)若相关蛋白质的核酸片段是从细胞质中获取的，则过程包括_、_。(3)过程中对核苷酸序列有严格要求的工具酶是_，进行过程的目的是_。(4)为获得较多的受精卵进行研究，过程的处理方案是_。若过程所得的卵母细胞是从卵巢中获得的，则体外受精前的过程表示_。14、36.【生物选修3】（15分）某质粒上有Sal I、Hind III、BamH I三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题：（1）从基因文库中获得的抗盐基因可用_技术进行扩增。将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗

19、盐性状，这种新性状的产生所依据的原理是_。（2）如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能_，也不能_。（3）在构建重组质粒时，应选用_两种酶对_进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。（4）为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_作探针进行分子杂交检测，又要用_方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。15、绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是TCGA一，N端伸出的核苷酸的碱基序列是TGCA，

20、则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶是_。过程需要的酶是_。（2）过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是_。（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用_技术进行检测。（4）用显微镜可观察到用于过程的猪卵母细胞的卵黄膜和透明带之间有_个极体。用于过程的猪胎儿成纤维细胞，一般选用传代10代以内的细胞，原因是_。（5）由过程获得的重组细胞培育成绿色荧光转基因克隆猪，涉及到的现代生物技术手段有_。（6）为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若对过程得到的囊胚阶段胚胎进行分割，要注意_。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用_处理，使之超数排卵，提

21、高其繁育能力。16、下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：（1）一个图1所示的质粒分子经Sma切割后，含有 个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna切割，原因是 。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH和Hind 两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。 （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 （7）为了从cDN

22、A文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。（8）用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb 即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。17、【2011南京一模 】下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程。请据图回答下列有关问题：（1）若限制酶l的识别序列和切点是，限制酶的识别序列和切点是GATCC- 那么在过程中，应用限制酶_ _切割质粒，用限制酶 _ _ 切 割抗虫基因。过程在_ _ (体内体外)进行。（2）将通过

23、过程得到的大肠杆菌涂布在含有_ _ 的培养基h，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入，该培养基从功能方面属于_ _ 培养基。（3）重组质粒导人大肠杆菌的目的是 _ _。（4）经筛选分析该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段，因此可以把它看怍是杂合子。理论上该转基因植株自交产生的F1代中，优具有抗虫特性的植株占总数的 _ _。（5）过程所用技术称为_ _，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有 _ _。18、普通烟草转入抗盐基因培育抗盐烟草的过程如下图所示。已知含抗盐基因的DNA和质粒上均有sal、Hind、BamH酶切位点，质粒上另有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。

24、请回答问题：54.构建重组质粒时，应选用限制酶_对_进行切割，以保证它们定向连接。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键，具体说就是_和_之间的键。55.如果目的基因直接注入烟草细胞，一般会被烟草细胞_。质粒的作用是_。56.切割后的目的基因与质粒由_酶连接成重组质粒。筛选导入重组质粒的细菌，应在其培养基中加入_，理由是_。57.烟草细胞经_形成愈伤组织。某研究性学习小组以愈伤组织为材料进行了下列实验：一组在培养基中加30%的蔗糖，另一组不加蔗糖，接种后，每组再分成两个小组，分别在光下和黑暗中培养。1个月后，观察其生长、分化情况，结果见下表：培养条件加蔗糖不加蔗糖光照正常生

25、长，分化不生长，死亡黑暗只生长，不分化不生长，死亡你能得出什么结论？_。58.从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是_。19、人体细胞内含有抑制癌症发生的P53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。(1)目的基因的获取方法通常包括_和_。(2)上图表示从正常人和患者体内获取的P53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对，这种变异被称为_。(3)已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成_个片段，而患者的则被切割成长度为_对碱基和_对碱基的两种片段。

26、(4)如果某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现1 70 2 20 290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是_(以P表示正常基因，P表示异常基因)。20、在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。右图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、_、将目的基因导入受体细胞、_。（2）A过程需要的酶有 和 。（3）要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用_处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为_态；然后将 在缓冲液中混合培养完成转化过程。（4）含

27、有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过C_和E_。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入_。(5)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是_。这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是_。（6）如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括_。A.生物安全 B.环境安全 C.食品安全 D.伦理道德问题（7）抗虫基因基因能在植物体内成功表达是因为 。说明苏云金杆菌和植物等生物共用 。21、质粒能成功转入植物细胞，并将质粒上的一部分外源DNA整合到植物的DNA中。下图表示利用质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程。请

28、据图分析回答：（1）过程将目的基因导入质粒后，需要通过 使质粒与目的基因切口黏合。（2）整合了目的基因的重组质粒，在组成上还含有启动子、终止子和 。（3）过程可以采用的方法是 。（4）过程运用了细胞工程中的 技术，该技术的理论依据是 ；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行 和 。（5）为了检测通过过程获得的幼苗是否具有抗除草剂的特性，可采用的方法是 。 22、降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工

29、合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：(1)Klenow酶是一种_酶，合成的双链DNA有_个碱基对。(2)获得的双链DNA经EcoR(识别序列和切割位点GAATTC)和BamH(识别序列和切割位点GGATCC)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它_。设计EcoR和BamH双酶切的目的是_。要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_。(3)经

30、DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_。(4)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_。23、回答下列有关微生物和生物工程的问题。基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。下图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题。 48.

31、 写出下列字母和编号的名称：A： ； D： ；II： ；49. 将A和B形成D所需的酶是_ 。过程表示 。50. 为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有 特性。然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养。根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落_（填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是 （2分）。 51. 上述培养基从功能上属于 培养基。配制培养基时，在各成分都溶化后分装前，要进行的依次是 和 ，培养基配制后采用高压蒸汽灭菌的原因是_。24、依据基因工程技术有

32、关原理回答下列问题：（1）限制性内切酶是在基因工程中用来切开DNA的酶，EcoR是大肠杆菌的R型菌株分离而来的限制性核酸内切酶，它总是在一定的碱基序列中切断DNA。以下的碱基序列表示的是EcoR的识别序列，请用虚线在下图中画出EcoR的作用部位：G A A T T CC T T A A G（2）基因工程操作的基本步骤是：a _， b _，c _，d _。（3）获取目的基因途径有_、_；（4）下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。请回答下列问题： 简述重组质粒

33、的主要过程 导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是什么 （5）假如预期到某种酶的功能，要设计相应的基因，下列图示中是 ，是 ；25、科学家将人的胰岛素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并使其成功地在大肠杆菌中得以表达。操作过程如图，请根据图回答问题：(1)能否用人的皮肤生发层细胞代替图中的胰岛细胞，为什么_(2)若将目的基因与质粒A结合形成重组质粒，需要_酶的作用。(3)在导入过程中可能会出现三种情况：即将重组质粒导人受体细胞、将质粒A导人受体细胞、没有任何质粒进入细胞；如何去除没有导人质粒的大肠杆菌_，原理是_。(4)如果把已经导入普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上

34、培养，将发生的现象_，原理是_。26、（现代生物科技专题8分）干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血中提取，每升人血只能提取0.5g，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点。（1）从人的淋巴细胞中取出干扰素基因，一般可采用用 技术进行扩增，此基因在基因工程中称为 。（2）此基因与细菌的质粒相结合要依靠 酶，其作用部位是 ，然后将目的基因移植到酵母菌体内。（3）为了明确干扰素基因在酵母菌体内能否发挥功能作用，从分子水平看，首先要检测其是否 。（4）科学家在培养转基因植物时，常用土壤农杆菌中的质粒做运载体。质粒是基因工程最常用的运载体，它具备运载体的

35、条件:能够在宿主细胞中 并稳定地保存；具有多个 ，以便与外源基因连接；具有某些 ，便于进行筛选。27、（每空1分，共10分）细胞融合技术有着广泛应用。下图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题 （1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYRr两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再把这些融合细胞进行培养，培育出了玉米新品种。 这两个品种的花粉可用化学诱导剂 诱导融合，共可产生 种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），这些融合细胞经过脱分化形成 ，再经培养可能得到新品种。 若想培育出基因型为yyRR的玉米植株，也可直接用yyRr植

36、株的花粉培养，再经过秋水仙素处理并筛选获得，这种方法叫做 。 （2）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，请据图回答： 在“番茄马铃薯”的培育过程中，运用了植物细胞工程中的 技术，植物体细胞融合完成的标志是 。 a、b细胞融合之前，要用到的酶是 ，酶处理后得到 。 （3）若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞，请据图回答： 为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的d细胞，由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有 能大量制备等特点。下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备

37、过程的顺序连接起来 。28、人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：（1）过程代表的是 。（2）过程构建A基因重组载体时，必须使用 和 两种工具酶。（3）过程是 。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。（5）科学家发现转基因植株的抗病基因的传递符合孟德尔遗传规律：将该转基因植株与非转基因植株杂交，其后代中抗病类型与不抗病类型的数

38、量比为11。若该转基因植株自交，则其后代中抗病类型与不抗病类型的数量比为_ _。若将该转基因植株的花药作离体培养，则获得的再生植株群体中抗病类植株占 %。29、（15分）I右图为细胞融合的简略过程图，请回答：（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已经用 处理，除去了 ；A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是 ，融合完成的标志是 。（2）若A、B是动物细胞，一般取自 _ ，然后用 使其分散开来。A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞的手段是 _ 。II.以下是通过基因工程获得含有人生长激素基因的奶牛的过程，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)，请结合图示回答下

39、列问题：（3）如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出_和_等特点。（4）图中所示的生物技术整体被称为核移植，它包括的具体生物技术有_、_等。（5）形成重组细胞时应选用_期的卵母细胞，并去掉其细胞核。去掉细胞核的原因是_。（6）图中犊牛并非是对体细胞核供体母牛l00的复制，其原因是主要有_；_。30、下图是植物体细胞杂交过程示意图，据图分析回答：(1)图中过程是，目前最常用的方法是。(2)在过程中，必须通过一定的手段进行，才能实现原生质的融合。(3)和分别表示和过程。(4)这项研究可克服 的障碍，从而培育出新的作物品种。 31、科学家利用细胞工程培育了“白菜甘蓝”杂种植株，如下图

40、所示，请根据图回答下列问题：（1）图C表示 ；由D形成E的过程称为 ，由E形成F的过程称为 ；由E形成F的过程中细胞的增殖方式为 。生产中可以通过调整 控制DEF过程。（2）图中A、B的制备，需要去除细胞壁，此时要用到 酶；从根本上讲， “白菜甘蓝”杂种植株性状的出现是由于 的结果。（3）“白菜甘蓝”杂种植株的食用部分是叶，但叶又易受昆虫危害而影响产量，科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜甘蓝”植株，请你设计实验，检测此植株的抗虫基因是否表达。取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜甘蓝”植株甲上，再取等量的、生活状态基本一致的昆虫幼虫放在 植株乙上。适宜条件下培养一段时间后，分别观察 的

41、生活情况。若 ，说明甲植株的抗虫基因未得到表达；若 ，说明甲植株的抗虫基因得到表达。32、下图为“番茄马铃薯”的培育过程示意图，请据图回答：(1)在“番茄马铃薯”的培育过程中，运用了植物细胞工程中的_技术，原理是_。(2)可用_对番茄和马铃薯细胞进行处理获得原生质体；诱导番茄和马铃薯原生质体融合的化学试剂一般用_。(3)愈伤组织常用作诱变育种的理想材料，理由是_。(4)不同物种生物之间存在着天然的_，用传统的有性杂交方法不可能得到二者的杂种后代，而体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍。(5)植物组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质之外，还必须含有_从而促进愈伤组织的形成和再分化；而用合成培养基体外培养动物细胞时，通常需加入_等一些天然成分。33、下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题(1)人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异_；从免疫学角度看，这种凝集原是_。(2)图中细胞中1是小鼠体