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文档简介
1、原理实验材 料试齐操作结果淀粉的 检验淀粉遇碘单 质艾盅。物质 氧化碘液,置 换碘单质,碘 单质与物质 发生颜色反 应。马铃薯匀浆碘液(碘化 钾溶液)向试管内注入2mL待测组织 样液。向试管内滴加两滴碘液,观 察颜色变化。样液颜 色艾盅, 则样液 含淀粉。还原糖 的检验还原糖(葡.萄 糖,果糖,麦 芽糖)与斐林 试剂发生作 用,生成醇红 色沉淀。苹果或梨匀浆斐林试剂: 甲液:质量 浓度为0.1g/mL 的 NaOH 溶 液;乙夜: 质量浓为0.05g/mL向试管内注入2mL待测组织 样液。向试管内注入1mL斐林试剂 (甲液乙液等量混合均匀后再注入)将试管放入盛有5065 C温水的大烧杯中加热约
2、 2min观察试管中出现的颜色变化若生成 醇红色 沉淀,则 样液含 还原糖。脂肪脂肪被苏丹 出染成橘黄 色,被苏丹IV 染成红色花生种 子或花 生种子 匀浆苏丹山或苏丹IV方法一:向待测组织样液中滴 加三滴苏丹印染液,观察染液 被染色情况方法二:制作子叶临时切片 取材切片制片:1.在花生 子叶薄片上滴在3滴苏丹出, 染色 3min (苏丹染色一分 蜜2.用吸水纸吸去染液再滴 加12滴体积分数为50%的酒脂肪颗 粒被染 成橘黄 色(红 色)精溶液,洗去浮色 3.用吸水纸 吸取花生子叶周围的酒精,滴 一滴蒸播水,盖上盖玻片,制 成临时装片观察花生子叶最溥处蛋白质蛋白质(肽 键)与双缩胭豆浆或 鲜肝
3、研双缩月尿试 剂:A液:向试管内注入2mL待测组织 样液样液变紫发生颜色反 应,蛋白质含 量越高紫色 越深磨液质量浓度 为 0.1g/mL 的NaOH溶 液;B夜: 质量浓为0.01g/mL 的 CuSO4向试管内注入双缩月尿试剂A液1mL,摇匀向试管内注入双缩月尿试剂B液4滴,摇匀观察试管内出现的颜色变化观察 DNA和RNA在 细胞中 的分布两种染色剂对 DNA和RNA的亲和 力不同,甲基 绿使DNA呈人的口 腔上皮 细胞或 洋葱鳞 片叶内质量分 数为0.9% 的NaCl溶 液质量 分数为8%去口腔上皮细胞制片:1.在载玻片上2滴 NaCl溶液。2.在口腔内侧轻刮几下,将碎屑在液滴中涂抹。3
4、.点燃酒精灯, 将载玻片烘干真核细 胞 DNA 主要分 布在细胞核中,现绿色,口比罗 红使RNA呈 现红色。表皮细胞的盐酸水解1.在小烧杯中加入30mL质量 分数为8%的盐酸,载玻片放入 其中。2.在大烧杯中加入 30jC 温水。3.将小烧杯放在大烧杯 中保温5min冲洗涂片:用缓水流冲洗载 玻片10s染色:1.吸水纸吸水 2.将混 合染色剂滴2滴在载玻片上, 染色5min 3.吸去多余染色剂, 盖上盖玻片观察RNA主 要分布 在细胞 质中。用图倍 显微镜 观察叶 绿体和 线粒体叶绿体散布 于细胞质中, 可用高倍显 微镜观察其 形态和分布。健那绿染液 是将活细胞新鲜菠 菜叶或 黑藻叶; 人的口
5、 腔上皮 细胞质量分数 为1%的健 那绿溶液制作群类叶片临时装片:在 载玻片上淅-滴清水,用镣子 取一片小叶或菠菜叶带叶肉的 卜表皮,放入水滴盖上盖玻片观察叶绿体制作人的口腔上皮细胞临时叶绿体 随细胞 质流动 而流动。代谢旺 盛的位 置线粒中线粒体染 色的专一性 染料,使活细 胞中线粒体 呈现蓝绿色 可维持活性 数小时装片观察线粒体体较多鉴别死 细胞与 活细胞活细胞的细 胞膜可以控 制物质进出动物细胞台盼蓝用台盼蓝染色,观察细胞是否活的动 物细胞 /、着色植物细 胞的吸 水与失 水植物细胞的 原生质层相 当于一层半 透膜;原生质 层比细胞壁 的伸缩性大; 细胞液浓度 大于外界溶 液的浓度紫色的
6、 洋葱鳞 片叶质量浓度 为 0.3g/mL 的蔗糖溶液1.制作临时装片 2.用低倍显微 镜观察液泡大小及原生质层位 置3.从盖玻片的一侧滴入蔗糖 溶液,在盖玻片的另一侧用吸 水纸吸引。4.用低倍显微镜再 次观察5.在盖玻片的另一侧滴 入清水,在盖玻片的另一侧用 吸水纸吸引。6.再次用低倍显 微镜观察细胞发 生质壁 分离,后 又发生 质壁分 离的复 原探究酵 母菌的 呼吸方 式酵母菌是兼 性厌氧菌; CO2可使澄 清石灰水变 浑浊,也可使 澳麝香草酚 蓝水溶液由 蓝变绿再变 重;橙色的重 铭酸钾在酸 也条件下与 乙醇发生化 学反应,变成 灰绿色。食用酵母菌澄清石灰 水;质里分 数为5%的 葡萄糖
7、溶 液;澄清后 灰水;澳麝 香草酚蓝 水溶液;重 铭酸钾溶 液酵母菌培养液的制备:制备 两瓶,均注入葡萄糖溶液检测CO2的产生:对A:让空 气间歇性依次通过三个锥形瓶,然后放置25-35C环境中培 养5-8h对B:封口放置一段时 间,再联通盛有澄清石灰水的 锥形瓶检测酒精的产生:各取培养 液的余液,分别注入两只试管, 分别滴加0.1g溶有重铭酸钾的 浓硫酸溶液,轻轻振荡,观察 试管中溶液颜色变化观察根 尖分生 组织细有丝分裂常 见于根尖根 芽等分生区洋葱根尖细胞质量分数 为15%的盐 醛,体积分洋葱根尖的培养装片的制作;处于间 期的细胞的有丝分裂细胞,染色体 容易被碱性 染料如龙胆 紫和醋酸洋
8、 红溶液染色数为95%的 酒精,龙胆 紫溶液或 醋酸洋红 液1 .解离2 .漂洗:用镣子把根尖放入盛 有清水的玻璃皿中3 .染色4 .制片:根尖放载玻片上,用 镣子吧根尖弄碎,盖上盖玻片, 用拇指轻轻按压根尖细胞有丝分裂的观察胞最多低温诱 导植物 染色体 数目的 变化用低温处理 植物分生组 织细胞,能抑 制纺锤体的 形成,洋葱或 大葱,蒜卡诺氏液; 改良苯酚 品红染液;质量分数 为15%的盐 酸溶液;体 积分数为 95%的酒精 溶液将洋葱放在装满清水的广口瓶上,待洋葱长出乐 1cm不定 根时将装置放入冰箱(约4C), 诱导培养36h男取经处理的根尖0.5-1cm放入卡诺氏?中浸泡 0.5-1h
9、, 以固定细胞形态,然后用体积 分数为95%的酒精冲洗两次制作装片,包括:解离,漂 洗,染色,制片观察DNA的鉴定DNA中喋吟 核甘酸上的 脱氧核糖遇 酸生成w 羟基一r酮基 戊醛,它再和 二苯胺作用 而显现蓝色 (溶液呈浅蓝色)鸡血或 菜花细 胞二苯胺试 剂取两只20ml试管,各加入量 浓度为 2mol/L的NaCl溶液5mL。将丝状物放入其中一支试 管,用玻璃棒搅拌,使物质溶 解向两只试管个加入 4ml 一苯 胺试剂,混合均匀。将试管置于沸水中加热 5min,待试管冷却后,比较溶 液颜色,观察含DNA的试管溶液是否艾盅鉴定能 分解尿 素的细 菌在细菌分解 尿素的化学 方应中,月尿酶 将尿素
10、分解 成氨,是培养 基碱性增强, 使酚红指示 剂变红能分解 尿素的 细菌酚红指示剂在以尿素为唯一氮源的培养基 中加入酚红指示剂,培养某种 细菌后,如果pH升高,指示剂 将变红,就可以初步鉴定该种 细菌可以分解尿素绿叶中 色素的 提取与 分离色素能溶解 在无水乙醇 中;小同色素 在层析液中 溶解度不同。 溶解度高的 扩散快。菠菜的绿叶无水乙醇; 层析液;二 氧化硅(研 磨充分); 碳酸钙(防 色素被破 坏)提取绿叶中的色素:1.男碎绿叶,向研钵中放入少许二氧 化硅和碳酸钙,再加入10ml无水乙醇,进行迅速充分的研 磨。2.将研磨液迅速倒入玻璃 漏斗中进行过滤,用棉塞将试 管口封严。制备滤纸条:将
11、滤纸条的一 端剪去两角,并在距这端 1cm 处用铅笔画一条细线画滤液细线:用毛细管吸取 少量滤液,沿铅笔线均匀画细 线,彳寺十后,冉回一两次分离绿叶中的色素:将滤纸 条有细线的一端轻轻插入层析 液中,随后用棉花紧塞试管口 (不能让滤液细线触及层析液)从上到 下:胡萝卜 素:橙黄口 to 原;色叶绿素 a:蓝绿(最多)叶绿素 b:黄绿(叶绿 素,3/4 主要吸 收蓝紫 和红光, 类胡萝卜 素1/4主 要吸收 蓝紫光)测定饮 用水中 的大肠 杆菌数 目如果有大肠 杆菌,因其强 烈分解乳糖 而产生大量 的混合酸,菌饮用水 的滤膜伊红美蓝/口加小根据培养基上黑色菌落的数 目,计算出水样中大肠杆菌的 数
12、量。体带H+,故 菌落被染成 深紫色,从菌 落表面的反 射光中还可 以看到金属 光泽。鉴别纤 维素分 解菌刚果红可以 与纤维素这 样的多糖物 质形成红色 复合物,但不 和纤维二糖 和葡锢糖反 应。纤维素 分解菌刚果红(CR)法1:在长出菌落的培养基上覆盖1g/ml的CR溶液, 10-15min后倒去,再加入 NaCl 溶液,15min后倒去法2: 1:200比例将10g/ml的 CR溶液加入培养基,混匀后倒 平板通过是 否产生 透明圈 来筛选 纤维素 分解菌酒精在高中生物中:1、脱色剂“探究叶绿体在光照下合成淀粉实验”中,将处理过的天竺葵叶片放入盛有酒精的小烧杯里,隔水加热,使叶片褪色(破坏和
13、溶解叶片中所含的色素).这样就可在滴加碘液后,避免对观察叶片颜色变化的干扰.2、漂洗剂酒精是良好的有机漂洗剂.“脂肪的鉴定实验”中,用苏丹出染液对脂肪组织进行染色后,可用体积分数为50%的酒精来冲洗浮色,以免干扰对细胞内脂肪颗粒的观察 .3、 提取剂和层析剂绿叶中色素的提取和分离实验”中,可以用纯酒精作为提取色素的试剂和层析剂.在“DNA的粗提取与鉴定实验”中,采用酒精沉淀法,利用DNA不溶于酒精,而蛋白质、脂肪及磷脂等能 溶解其中,可以进一步提出含杂质较少的DNA丝状物.4、固定剂在“观察植物细胞有丝分裂实验”中 ,一般采用质量分数为 15%的盐酸和体积分数为 95%的 酒精按体积比1:1混
14、合而成的药液作为解离试剂 .盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化 ,并使细 胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的 .酒精的作用是固定蛋白质 ,使细胞的原生质凝固,不发生变化,固定细胞的分裂相,以尽可能保持原来的结构供观察.酒精也可与其它试 剂混合成复合固定剂,如“低温诱导染色体加倍”中的卡诺固定液就是由无水酒精3份:冰醋酸1份配制而成,适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等.5消毒剂选一中所有的 70%的酒精都是消毒剂.70%75%浓度杀菌作用最强,此浓度的酒 精与细菌的渗透压近似,在细菌表面蛋白未变性前能不断地向菌体内部渗入,使细菌所有蛋白脱水、变性凝固,最终
15、杀死细菌,以达到消毒杀菌的目的.浓度低于70%,则渗透性降低,达不到 灭菌消毒目的.5.燃烧剂酒精灯中的燃料盐酸在高中生物中:1、“DNA和RNA在细胞在的分布”中 8%盐酸的作用(1)盐酸能改变细胞膜的通透性 ,加速染色剂的跨膜运输;(2)盐酸使染色体中的 DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合2、“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中3盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化并使细胞间的中胶层物质溶解 ,从而达到分离细胞的目的.3、“酶活性受PH影响实验”和“生物组织中 PH维持稳定的机制”盐酸用来变PH值。高中生物常见染色剂氧化还原类1斐林试剂2.重铭酸钾络合物类1.碘2.双缩月尿有机染
16、色剂:1.苏丹染色剂2.甲基绿,口比罗红,二苯胺 3.龙胆紫,醋酸洋红,刚果红酸碱指示剂类:1. 溴麝香草酚蓝水溶液2.酚红指示剂1 斐林试剂检测可溶性还原糖原理:还原糖+斐林试剂-醇红色沉淀注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热 .应用: 检验和检测某糖是否为还原糖; 不同生物组织中含糖量高低的测定; 在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎.2苏丹出、苏丹IV检测脂肪原理:苏丹出+脂肪-橘黄色;苏丹IV +脂肪-红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察.应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪.3 双缩脲试剂检测蛋白质原理:蛋白质+双缩月尿试剂-紫色注意
17、:双缩月尿试剂在使用时,先加A液再加B液反应条件为常温(不需要加热).应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定.4 碘液检测淀粉原理:淀粉+碘液-蓝色注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘.应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉5 DNA 的染色与鉴定染色原理:DNA+甲基绿-绿色应用:可以显示DNA 在细胞中的分布.鉴定原理:DNA+二苯胺-蓝色应用:用于DNA 粗提取实验的鉴定试剂6 吡罗红使 RNA 呈现红色 原理:RNA+:比罗红-红色应用:可以显示RNA 在细胞中的分布.注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和口比罗红混合染色剂,而不是单独染色 .7 台盼蓝使
18、死细胞染成蓝色原理: 正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性.8 线粒体的染色原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色.应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在.9 酒精的检测原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色.应用: 探究酵母菌细胞呼吸的方式; 制作果酒时检验是否产生了酒精; 检查司机是否酒后驾 驶.10 CO2的检测原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使澳麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中 CO2 的产生情况.11 染色体(或染色质)的染色原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋
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