实验室生物安全(NEW)

1、生物技术大实验生物技术大实验孙孙 林林 讲师讲师 扬州大学生物科学与技术学院扬州大学生物科学与技术学院实验室生物安全实验室生物安全(Laboratory biosafety)一、实验室概念一、实验室概念实验室是人类认识自然、改造自然，利用自然界中与人类生产生活相关的实验室是人类认识自然、改造自然，利用自然界中与人类生产生活相关的物理、化学、生物、辐射等各种因素，经特殊实验技术，按照科学的规律物理、化学、生物、辐射等各种因素，经特殊实验技术，按照科学的规律进行研究（实验）活动的场所。进行研究（实验）活动的场所。特点：特点： 1、多专业、多部门、多专业、多部门 2、接触的有毒有害物质繁多、接触的有

2、毒有害物质繁多 3、对实验人员产生各种危害、对实验人员产生各种危害 4、专业性强，管理难度大、专业性强，管理难度大 实验室安全管理应根据各种实验室的专业特点及接触的有害实验室安全管理应根据各种实验室的专业特点及接触的有害因子进行分类管理，采取不同的安全防护措施，但其防火、因子进行分类管理，采取不同的安全防护措施，但其防火、防盗、防水及消防工作是一个共性的任务，生物安全实验室防盗、防水及消防工作是一个共性的任务，生物安全实验室的安全防护主要有：的安全防护主要有： 生物安全防护生物安全防护 化学物品安全防护化学物品安全防护 放射（辐射）安全防护放射（辐射）安全防护 动物安全防护等动物安全防护等二、

3、实验室安全管理范围二、实验室安全管理范围三、实验室生物安全的核心三、实验室生物安全的核心管理管理1 1、生物安全、生物安全管理是关键管理是关键n如果缺乏健全和行之有效的管理体系，无论多么高级如果缺乏健全和行之有效的管理体系，无论多么高级的实验室硬件设施，都难以发挥其安全作用，也无法的实验室硬件设施，都难以发挥其安全作用，也无法确保生物安全。确保生物安全。n与发达国家的差距主要表现在：人员素质（社会责任与发达国家的差距主要表现在：人员素质（社会责任心与自觉性）和管理制度的刚性（国外专家认为中国心与自觉性）和管理制度的刚性（国外专家认为中国大部分大部分BSL-3实验室硬件比较好）实验室硬件比较好）

4、 n据不完全统计，国内外绝大多数生物安全实验据不完全统计，国内外绝大多数生物安全实验室的感染事件和遗漏事故都是由管理不善而导室的感染事件和遗漏事故都是由管理不善而导致的，国内更是如此。致的，国内更是如此。中国中国CDC实验人员感染非典病毒事故实验人员感染非典病毒事故 2004年年4月中国月中国CDC病毒所腹泻病毒室两名研究生在做病病毒所腹泻病毒室两名研究生在做病毒实验时感染毒实验时感染SARS病毒。（后患者又引发北京与安徽各病毒。（后患者又引发北京与安徽各1人感染）人感染） 事故调查：事故调查： 事故起因系该所实验人员多次违规将未完全灭活的事故起因系该所实验人员多次违规将未完全灭活的SARS病

5、毒从病毒从P3实验室带出至普通实验室操作而引起（时间与实验室带出至普通实验室操作而引起（时间与患者发病相吻合）。患者发病相吻合）。东北农业大学布鲁氏菌病感染事件。东北农业大学布鲁氏菌病感染事件。2 2、事故频发的背后是、事故频发的背后是“海恩法则海恩法则” n关于飞行安全的关于飞行安全的“海恩法则海恩法则”n一起重大的飞行安全事故背后一起重大的飞行安全事故背后有有29个事故征兆个事故征兆n每个征兆背后每个征兆背后有有 300个事故苗头个事故苗头n每个苗头背后还有每个苗头背后还有1000个事故隐患个事故隐患n几乎所有的灾难都是多个漏洞的叠加。只要认真落实已有几乎所有的灾难都是多个漏洞的叠加。只要

6、认真落实已有的规则、规定，的规则、规定，很多事故完全可以避免很多事故完全可以避免3、实验室感染必然性和可控性、实验室感染必然性和可控性n必然性必然性: 客观存在，无法避免客观存在，无法避免n可控性可控性: 只要重视，认真对待是可以控制的只要重视，认真对待是可以控制的五、生物安全实验室五、生物安全实验室n生物安全实验室实质实质是指生物安全实验室实质实质是指: 通过规范的通过规范的实验室设计建实验室设计建造、实验设备的配置、个人防护装备造、实验设备的配置、个人防护装备的使用（硬件）严格的使用（硬件）严格遵从遵从标准化的操作程序标准化的操作程序和和管理规程管理规程等（软件）。等（软件）。n确保操作生

7、物危险因子的确保操作生物危险因子的工作人员工作人员不受实验对象的伤害，不受实验对象的伤害，确保确保周围环境周围环境不受其污染，确保不受其污染，确保实验因子实验因子保持原有本性所保持原有本性所采取综合措施的实验室。采取综合措施的实验室。 生物安全防护三原则（三要素）生物安全防护三原则（三要素）实验室生物安全防护的内容包括：实验室生物安全防护的内容包括：1. 安全设备、个体防护装置和措施（一级防护）安全设备、个体防护装置和措施（一级防护）2. 实验室的特殊设计和建设要求（二级防护）实验室的特殊设计和建设要求（二级防护）3. 严格的管理制度和标准化的操作程序和规程等方面严格的管理制度和标准化的操作程

8、序和规程等方面采取综合措施来达到：采取综合措施来达到： 确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染的目的环境不受其污染的目的 。危险级别危险级别个体危险度个体危险度群体危险度群体危险度实验室分级实验室分级例如例如1低低低低Level 1大肠杆菌大肠杆菌2中等中等限制性限制性Level 2 大肠大肠O157，链球菌，链球菌 & 沙门菌属沙门菌属，腺病毒，腺病毒，A, B & C型肝炎，流感，型肝炎，流感，麻疹麻疹3高高低低Level 3 结核分枝杆菌，汉塔病毒，结核分枝杆菌，汉塔病毒，HIV，黄热病病毒黄热病病毒4高高高

9、高Level 4 由拉沙病毒，由拉沙病毒，Ebola virus，马尔堡，马尔堡病毒病毒不可能导致健康的人和动物感染很少导致病人和动物感染可能导致严重疾病很可能导致非常严重的疾病常规病原体常规病原体Level 1Level 1 n基本的实验室基本的实验室n不需要特殊设置不需要特殊设置n不需要生物安全柜不需要生物安全柜适用于实验对象已知对健康成年人无致病作用，对实验室工作人员和环境的潜在危害很小。如用于教学的普通微生物实验室等。典型的一级生物安全水平实验室（典型的一级生物安全水平实验室（CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA ）Level 2 n具有具有2级实验室相应的临床的、诊断的

10、、研级实验室相应的临床的、诊断的、研究的和教学的设备究的和教学的设备n容易产生气溶胶或者飞溅时需要容易产生气溶胶或者飞溅时需要 I级或级或II级级的生物安全柜的生物安全柜 n需要有对突发事件的应急处理预案需要有对突发事件的应急处理预案n需要进入规定需要进入规定n适用于实验对象对人和环境具有中等潜在适用于实验对象对人和环境具有中等潜在危害危害* * 有效的疫苗或抗生素治疗有效有效的疫苗或抗生素治疗有效典型的二级生物安全水平实验室（典型的二级生物安全水平实验室（CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA ）。）。在生物安全柜中进行可能发生气溶胶的操作程序。门保持关闭并贴上适当的危险在生物安

11、全柜中进行可能发生气溶胶的操作程序。门保持关闭并贴上适当的危险标志。潜在被污染的废弃物同普通废弃物隔开。标志。潜在被污染的废弃物同普通废弃物隔开。n专门的设计和建筑专门的设计和建筑最主要是个体防护最主要是个体防护其次是保护环境其次是保护环境n所有的工作人员在进入实所有的工作人员在进入实验室进行操作前均需经过验室进行操作前均需经过严格培训包括严格培训包括个人防护装个人防护装备备，设备，垃圾处理，设备，垃圾处理Level 3 适用于实验对象是通过呼吸途径适用于实验对象是通过呼吸途径使人感染导致重的甚至是致死性使人感染导致重的甚至是致死性疾病的感染性材料。疾病的感染性材料。结核杆菌结核杆菌圣路易脑炎

12、病毒圣路易脑炎病毒伯纳特考克斯体伯纳特考克斯体汉坦病毒等汉坦病毒等典型的三级生物安全水平实验室（典型的三级生物安全水平实验室（CUH2A ，Princeton ，NJ ，USA ）。）。实验室与公共通道分开并通过缓冲间（双门入口或二级生物安全水平的基础实验室）或气实验室与公共通道分开并通过缓冲间（双门入口或二级生物安全水平的基础实验室）或气锁室进入。处理废弃物前，在实验室内先进行高压灭菌以清除污染。应有非手控的水槽。锁室进入。处理废弃物前，在实验室内先进行高压灭菌以清除污染。应有非手控的水槽。形成向内气流而且涉及感染性材料的全部工作应在生物安全柜中进行。形成向内气流而且涉及感染性材料的全部工作

13、应在生物安全柜中进行。n实验室结构和设施、安全操作实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物，上述情况类似的不明微生物，也必须在四级生物安全防护实也必须在四级生物安全防护实验室中进行。验室中进行。Level 4 六、实验室相关感染的原因六、实验室相关感染的原因 实验室相关感染的原因主要有误食，皮肤实验室相关感染的原因主要有误食，皮

14、肤切割，针刺，动物抓、咬，气溶胶吸入等。切割，针刺，动物抓、咬，气溶胶吸入等。正确操作和使用各种仪器和设备，对正确操作和使用各种仪器和设备，对于各种可能的危害应非常熟悉。于各种可能的危害应非常熟悉。掌握各种感染性物质操作的一般准则掌握各种感染性物质操作的一般准则和技术要点。和技术要点。BSL-1人员防护人员防护1) 在实验室操作感染性材料时，任何时候都必须戴口罩和防护镜、穿着工作服，在实验室操作感染性材料时，任何时候都必须戴口罩和防护镜、穿着工作服，穿防护鞋袜，不得裸露腿部和脚趾，必要时穿连体衣。穿防护鞋袜，不得裸露腿部和脚趾，必要时穿连体衣。2) 在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他

15、具有潜在感染性的材料或在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。随后必须洗手。3) 在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。洗手。4) 为了防止眼睛或面部受到洒溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害，必须戴为了防止眼睛或面部受到洒溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害，必须戴安全眼镜，必要时戴面罩安全眼镜，必要时戴面罩(面具面具)或其他防

16、护装备。或其他防护装备。5) 严禁穿着实验室防护装备离开实验室严禁穿着实验室防护装备离开实验室(如去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、如去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、员工休息室和卫生间员工休息室和卫生间)，更不能把防护器械带回家。，更不能把防护器械带回家。6) 禁止在实验室的准备间和操作间里进食、饮水、吸烟、化妆、处理隐形眼镜禁止在实验室的准备间和操作间里进食、饮水、吸烟、化妆、处理隐形眼镜和储存食品和饮料。和储存食品和饮料。7) 在实验室内用过的防护服要先消毒后清洗，不得和日常服装放在同一柜子内。在实验室内用过的防护服要先消毒后清洗，不得和日常服装放在同一柜子内。Contamination o

17、f Hands and EnvironmentFirst cleaning, then disinfection (if appropriate)控制感染控制感染最简单，最有效，最方便，最经济方法最简单，最有效，最方便，最经济方法 标准洗手方法标准洗手方法 正确洗手的方法正确洗手的方法 n正确洗手方法包含下列五个步骤：正确洗手方法包含下列五个步骤： 1、湿、湿 ：在水龙头下把手淋湿，包含手腕、手掌和手指均要充分淋湿。：在水龙头下把手淋湿，包含手腕、手掌和手指均要充分淋湿。 2、搓：双手擦上肥皂，搓洗双手之手心、手背、手指、指尖、指甲及手腕最少要洗、搓：双手擦上肥皂，搓洗双手之手心、手背、手指、

18、指尖、指甲及手腕最少要洗20秒。秒。 3、冲：用清水将双手彻底冲洗乾净。、冲：用清水将双手彻底冲洗乾净。 4、捧：因为洗手前开水龙头时，手实际上已污染了水龙头，故捧水将水龙头冲洗乾净，或用擦、捧：因为洗手前开水龙头时，手实际上已污染了水龙头，故捧水将水龙头冲洗乾净，或用擦 手纸包著水龙头关闭水龙头。手纸包著水龙头关闭水龙头。 5、擦：以擦手纸将双手擦乾。、擦：以擦手纸将双手擦乾。 n洗手的注意事项：洗手的注意事项： 1、最好使用温水：摄氏、最好使用温水：摄氏38-42度的温水比冷水较有清洁效果。度的温水比冷水较有清洁效果。 2、去除手部首饰：如手上戴了戒指，会使局部形成一个藏污纳垢的特区，难以完全洗净。、去除手部首饰：如手上戴了戒指，会使局部形成一个藏污纳垢的特区，难以完全洗净。 3、要使用肥皂：效果比单独用水洗要好得多。、要使用肥皂：效果比单独用水洗要好得多。 4、时间、时间30秒：全部的洗手时间至少约需秒：全部的洗手时间至少约需30秒，才能达到有效的清洁。秒，才能达到有效的清洁。 5、冲洗乾净：在整个冲洗过程中，双手须保持比较向下的姿势，以避免水逆流回未洗的手肘部、冲洗乾净：在整个冲洗过程中，双手须保持比较向下的姿势，以避免水逆流回未洗的手肘部位。位。 6、使用擦手纸：最好不要使用毛巾，因毛巾容易潜藏病菌，易将洗净的双手沾染病菌。擦手纸、使用擦手纸：最好不要使用毛巾，