探究培养液中酵母菌数量的动态变化学习教案

1、探究探究(tnji)培养液中酵母菌数量的动态培养液中酵母菌数量的动态变化变化第一页，共17页。(二二)酵母细胞数的测定操作方法酵母细胞数的测定操作方法1.血球计数板的构造血球计数板的构造 血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面个刻有一个方格网。方格网上刻有边上面个刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格，个大方格，其中只有其中只有(zhyu)中间的一个大方格为计数

2、室，供微中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。这一大方格的长和宽各为生物计数用。这一大方格的长和宽各为1mm，深度为，深度为，其体积为其体积为0.1mm3。 第1页/共16页第二页，共17页。第2页/共16页第三页，共17页。第3页/共16页第四页，共17页。计数室通常有两种规格。一种是大方格内分为计数室通常有两种规格。一种是大方格内分为16中格，中格，每一中格又分为每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为小格；另一种是大方格内分为25中中格，每一中格又分为格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一小格。但是不管计数室是哪一种构造；它们都有一个共同的特点，即每一大方格都种构造；它

3、们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由是由1625=2516=400个小方格组成，见图。个小方格组成，见图。2.血球计数板的使用血球计数板的使用(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数。用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数。(2)样品稀释样品稀释(xsh)的目的是便于酵母菌悬液的计数，以的目的是便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含有每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜，一般稀释个酵母细胞为宜，一般稀释(xsh)10倍即可。倍即可。 第4页/共16页第五页，共17页。(3)将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖专将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。用的厚玻片

4、。(4)将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，捎待边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，捎待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内。片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内。(5)计数时，如果使用计数时，如果使用16格格25格规格的计数室，要按对角格规格的计数室，要按对角线位，取左上、右上、左下、右下线位，取左上、右上、左下、右下4个中格（即个中格（即100个小格）个小格）的酵母菌数。如果规格为的酵母菌数。如果规格为25格格16格的计数板，除了格的计数板，除了(ch le)取其取其4个对角

5、方位外，还需再数中央的一个中格个对角方位外，还需再数中央的一个中格(即即80个个小方格小方格)的酵母菌数。的酵母菌数。 第5页/共16页第六页，共17页。(6)当遇到位于大格线上的酵母菌，一般只计数大当遇到位于大格线上的酵母菌，一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方或只计数下方和左方线上的酵母细胞和左方线上的酵母细胞)。(7)对每个样品计数三次对每个样品计数三次(sn c)，取其平均值，按，取其平均值，按下列公式计算每下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。菌液中所含的酵母菌个数。 第6页/共16页第七页，共17页。3.计算公式计算公式(1)

6、16格格25格的血球计数板计算公式：格的血球计数板计算公式： 酵母细胞数酵母细胞数ml=100小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数100400104稀释稀释(xsh)倍数倍数(2)25格格x16格的血球计数板计算公式：格的血球计数板计算公式： 酵母细胞数酵母细胞数ml=80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数80400104稀释稀释(xsh)倍数倍数第7页/共16页第八页，共17页。4.血球计数板的清洁血球计数板的清洁 血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95的乙醇、无水

7、的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过(tnggu)镜镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。则必须重复清洗直到干净为止。 第8页/共16页第九页，共17页。/80400104稀释倍数第9页/共16页第十页，共17页。方案设计：方案设计：一、提出问题一、提出问题 培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？也可以提出其培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？也可以提出其他的探究问题，例如，在不同温度（以及通氧、通他的探究问题，例如，在不同温度（以及通氧

8、、通CO2等）条件下等）条件下酵母菌种群数量增长的情况如何？不同培养液（如加糖和不加糖）酵母菌种群数量增长的情况如何？不同培养液（如加糖和不加糖）中酵母菌种群数量增长的情况如何？等等。中酵母菌种群数量增长的情况如何？等等。 二、猜想假设二、猜想假设 酵母菌种群的数量随时间呈酵母菌种群的数量随时间呈S型增长变化。型增长变化。三、设计实验三、设计实验 全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组。分别用等量培养液，全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组。分别用等量培养液，在相同适宜环境中培养等量酵母菌。每天用血球计数板，采用在相同适宜环境中培养等量酵母菌。每天用血球计数板，采用(ciyng)抽样检测的方法计数一

9、个小方格内的酵母菌数量并作记录，抽样检测的方法计数一个小方格内的酵母菌数量并作记录，连续连续7天。天。7天后，各组向全班汇报本小组天后，各组向全班汇报本小组7天的数据，算出每一天天的数据，算出每一天数据的全班平均值，根据平均值画出酵母菌种群数量的增长曲长。数据的全班平均值，根据平均值画出酵母菌种群数量的增长曲长。第10页/共16页第十一页，共17页。实验过程：实验过程：一、材料用具一、材料用具 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球液、试管、血球(xuqi)计数板计数板（2mm2mm0.1mm方格）、滴管、显微镜等。方格）、滴管、

10、显微镜等。二、方法步骤和记录二、方法步骤和记录 1、取相同试管若干支，分别加入、取相同试管若干支，分别加入5ml肉汤培养液，肉汤培养液，塞上棉塞。塞上棉塞。 2、用高压锅进行高压蒸汽、用高压锅进行高压蒸汽 灭菌后冷却至室温，标灭菌后冷却至室温，标记甲、乙、丙等。记甲、乙、丙等。 3、将酵母菌母液分别加入试管各、将酵母菌母液分别加入试管各5ml，摇匀后用血，摇匀后用血球球(xuqi)计数板计数起始酵母液个数，做好记录。计数板计数起始酵母液个数，做好记录。 4、将各试管送进恒温箱，、将各试管送进恒温箱，25 下培养下培养7天。天。第11页/共16页第十二页，共17页。三、现象观察三、现象观察 每天

11、同一时间，各组取出本组的试管，用血球每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球(xuqi)(xuqi)计数板计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7 7天。天。菌数菌数时间时间（2.5104个）个） （天）（天）组别组别起始起始1234567甲甲乙乙丙丙平均平均第12页/共16页第十三页，共17页。四、实验结论四、实验结论 1 1、根据表格平均值作出培养液中酵母菌种群、根据表格平均值作出培养液中酵母菌种群(zhn qn)(zhn qn)数量数量7 7天中的变化曲线。天中的变化曲线。2、培养液酵母菌种群、培养液酵母菌种群(zhn qn)数量随时间呈数量随时间呈_

12、型增长变化。型增长变化。第13页/共16页第十四页，共17页。注意事项：注意事项： 1 1、操作过程中要建立、操作过程中要建立“有菌有菌”的观念，不能随意谈笑。的观念，不能随意谈笑。 2 2、 酵母菌计数方法：抽样检测法。先将盖玻片放在计数室上，酵母菌计数方法：抽样检测法。先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌底部，将计数板放在载物

13、台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。 3 3、从试管中吸出培养液进行计数时，应将试管振荡几次，以便、从试管中吸出培养液进行计数时，应将试管振荡几次，以便使酵母菌均匀分布，提高使酵母菌均匀分布，提高(t go)(t go)计数的代表性和准确性。计数的代表性和准确性。 4 4、对于压在小方格界线上的酵母菌应计数同侧相邻两边上的菌、对于压在小方格界线上的酵母菌应计数同侧相邻两边上的菌体数，另两边不计数。体数，另两边不计数。 5 5、影响酵母菌种群数量的因素可能有养料、温度、影响酵母菌种群数量的因素可能有养料、温度、pHpH、空间及、空间及有害代谢废物等有害代谢废物等 第14页/共16页第十五页，共17页。问题探究问题探究(tnji)： 1、如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应、如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？当采取怎样的措施？ 2、本探究、本探究(tnji)需要设置对照吗？如果需要，请需要设置对照吗？如果需要，请讨论说明怎样设计；如不需要，请说明理由。讨论说明怎样设计；如不需要，请说明理由。摇匀试管取摇匀试管取1ml酵母菌培养液稀释几倍后，再用血球酵母菌培养液稀释几倍后，再用血球(xuqi)计数板计数，所得数值乘以计数板计数，所得数值乘