HPV分型检测的临床应用-基础版

1、 宫颈癌宫颈癌全球聚焦v 宫颈癌成为发展中国家妇女健康和生命的“头号杀手头号杀手”v 宫颈癌的发病趋于年轻化，发病年龄一般在40-60岁v 2006年世界卫生组织指出：如不采取措施，未来10年内因子宫颈癌导致的死亡病例将上升25% 宫颈癌宫颈癌中国关注v 宫颈癌预防已纳入国家医改、重大公共卫生项目和十一五国家重大支撑计划 宫颈癌与宫颈癌与HPVHPV昨日回眸宫颈癌与宫颈癌与HPVHPV昨日回眸宫颈癌成为目前癌症中： HPV HPV病毒学 HPV HPV基因结构HPV16早期区（早期区（E E区）区）含含6 6个基因，个基因，是维持病毒复制、是维持病毒复制、编码病毒蛋白、编码病毒蛋白、维持细胞内

2、病毒维持细胞内病毒高拷贝数的基因高拷贝数的基因晚期区（晚期区（L L区）区）含两个结构蛋白最保守的区域长控制区（长控制区（LCRLCR）E6E6 通过抑制p53p53而阻断凋亡E7E7 通过抑制pRB使细胞周期失控E2E2：负性调节E6和E7，维持凋亡和细胞周期的调控。病毒整合时会破坏E2基因的结构，导致失活E4E4：结合并破坏中表层细胞角蛋白网，形成中表层细胞的挖空外观L2:L2:次要衣壳蛋白抗体主要识别位点L1:L1: 主要衣壳蛋白，疫苗研发的主要成分 HPV HPV病毒分类 以病毒基因组中L1L1区区DNADNA同源性同源性作为分类依据：n 属：L1L1区区DNADNA同源性在同源性在6

3、0%60%以下以下L1L1区区DNADNA同源性介于同源性介于60%60%70%70%L1L1区区DNADNA同源性介于同源性介于7171% %89%89%L1L1区区DNADNA同源性介于同源性介于9090% %98%98%L1L1区区DNADNA同源性大于同源性大于98%98%HPV16HPV16型下分类型下分类v HPV16多态现象导致的变异可根据地域不同，分为欧洲型（E）、非洲型（Af）、亚洲型（As）以及亚-美型（AA）。v 不同变异可导致某些人群罹患宫颈疾病的风险增加。比如 AA具有较高的致癌性，主要体现在从原发感染至肿瘤形成仅需要不到3年的时间。 HPV HPV HPV HPVH

4、PV分型（2009） HPV HPV型别分布 HPV HPV型别分布HPV引发的癌症 HPV HPVHPVHPV与宫颈癌与宫颈癌感染途径HPVHPV与宫颈癌与宫颈癌HPV的入侵病毒通过皮肤或粘膜的微创口进入表层，然后感染基底层或副基底层细胞，并以附加体的形式在宿主细胞核内复制。病毒的复制依赖于上皮细胞的分化，在基底层上层细胞中开始复制，在表皮细胞中装配，当这些表皮细胞脱落时，在皮肤表面可发现病毒颗粒。HPVHPV与宫颈癌与宫颈癌细胞、组织的改变一过性一过性HPV感染感染持续性持续性HPV感染感染正常宫正常宫颈颈感染感染清除清除HPV 感染感染演进演进消退消退癌前病癌前病变变癌癌浸浸润润 Tra

5、nsient infectionHPV infectionPersistent infectionLow-Grade DysplasiaCIN1High-Grade DysplasiaCIN2/3InvasiveCancer1 yearOver 2 years2-5 years4-5 years9-10 yearsHPVHPV与宫颈癌与宫颈癌影响因子n 多个性伴侣多个性伴侣n 口服避孕药口服避孕药n HIVHIV、STISTI感染感染n 免疫缺陷免疫缺陷n 多产、密产多产、密产n 吸烟等吸烟等宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查筛查现状宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查筛查对象v 所有女性应在有性生活所有女性应在有

6、性生活3 3年开始做宫颈癌筛查年开始做宫颈癌筛查 （最晚不超过（最晚不超过2121岁）岁） 2009.1 NCCN子宫颈癌筛查临床实践指南 2003卫生部宫颈癌筛查及早诊早治指南v 高危妇女人群高危妇女人群：多个性伴侣、性生活过早、HIV/HPV感染、免疫功能低下、卫生条件差/性保健知识缺乏的妇女v 决定妊娠的妇女决定妊娠的妇女案例分享案例分享女，28岁，孕前体检，医生建议其进行宫颈癌的筛查，拒绝。后怀孕5个月出现流血症状，疑为先兆流产，进行保胎处理；保胎至7个月大出血，后组织病理切片确诊为宫颈癌。产后手术治疗不理想，于宝宝一周岁多死亡。 广东省妇幼保健院著名影星李媛媛，2002年因宫颈癌在北

7、京病逝，撇下了她一岁的儿子和心爱的观众。宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查技术的发展1943年巴氏涂片应用于宫颈癌的筛查1988年TCT应用于宫颈癌的筛查2003年高危HPV(HC2)应用于宫颈癌的筛查(辅助)2004年中国指南HPV+TCT为最佳宫颈癌筛查手段2007年欧洲EUROGIN 推荐HPV作为宫颈癌筛查首选手段2011年HPV分型检测是国际公认最重要的宫颈癌筛查手段2005年IARC/WHO推荐HPV检测可以用于宫颈癌筛查2006年HPV分型检测（凯普）应用于宫颈癌筛查宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查巴氏涂片及TCT的应用v 对妇女健康作出很大贡献v 局限性: 取样误差 / 制片误差 / 读片误差v

8、 敏感性差、假阴性率高（2%50%）、假阳性率高、漏诊多v 可重复性差，受阅片人主观影响正常高度病变HSIL低度病变LSIL癌变Cancer宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查v 准确性97%v 敏感度低，尤其是腺体病变v 重复性差重复性差，没有改变传统的阅片方式，与人为主观因素相关巴氏涂片及TCT的应用宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查HPV DNA检测细胞学检测细胞学检测HPV DNAHPV DNA检测检测对细胞形态改变的检查手段对病原体检查手段针对结果，评估临床阶段针对病因，评估发病风险敏感性相对稍低敏感性高方法不易质控方法易于质控宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查有充足的证据表明：HPV DNA检测可作为子宫颈癌的初

9、筛手段，并可以降低子宫颈癌的发病率和死亡率。-IARC/WHO，2005HPV检测为首选大规模筛查手段 任何筛查项目的初筛都应该采用 过分强调特异性，会使筛查工作堕入美国式的怪圈：检查越来越多，查出得越来越少，成本却越来越高 。Belinson-国际防癌组织主席国际防癌组织主席宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查首选HPV检测欧洲生殖道感染和肿瘤组织（欧洲生殖道感染和肿瘤组织（EUROGIN)2007EUROGIN)2007年提出的宫颈癌筛查方案年提出的宫颈癌筛查方案宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查HPV分型的应用专家意见2012AOGIN会议调查结果：会议调查结果：问题：对细胞学检查阴性

10、的患者进行基因问题：对细胞学检查阴性的患者进行基因分型有意义么？分型有意义么？1.错误错误-基因分型并不能带来益处基因分型并不能带来益处 14%2.正确正确-基因分型可以带来益处基因分型可以带来益处 86%Sun-Kuie Tay20122012亚太生殖道感染与肿瘤会议（亚太生殖道感染与肿瘤会议（AOGIN 2012AOGIN 2012）HPVHPV分型检测分型检测HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于区分一过性感染或持续性感染区分一过性感染或持续性感染n 在对丹麦2029岁妇女进行HPV检测时发现：间隔18个月2次检测HPV，相同基因型的HSIL发病风险明

11、显高于不同基因型。（Susanne K Kjaer,et al. BMJ. 2001: 325: 7364.）v HPV持续性感染：如果在间隔4-6 个月或 6-12个月的相邻2次随访中，同一患者的阴道宫颈检测样本均显示HPV 阳性且为同种类型，则称为此种类型 HPV 的持续性感染.Koshiol et al. Persistent Human Papillomavirus Infection and Cervical Neoplasia: A Systematic Review and Meta-Analysis。Am J Epidemiol 2008;168:123137 47 47岁，岁

12、，20102010年年8 8月病患到宫颈门诊检查，当时的她已行子宫次全切月病患到宫颈门诊检查，当时的她已行子宫次全切除手术后两年，做除手术后两年，做HPVHPV分型检测，结果为分型检测，结果为HPV58HPV58型阳性，细胞学检测型阳性，细胞学检测为阴道炎症，阴道镜检测为为阴道炎症，阴道镜检测为CINCIN- -。对该病患进行随访观察，一年。对该病患进行随访观察，一年后，病患做后，病患做HPVHPV分型检测，结果仍为分型检测，结果仍为HPV58HPV58型阳性，细胞学检测为阴型阳性，细胞学检测为阴道炎症，考虑到该病患为道炎症，考虑到该病患为HPVHPV高危阳性的持续感染，决定对其行高危阳性的持

13、续感染，决定对其行LeepLeep诊断性锥切及组织性活检，结果发现该病患为宫颈原位癌诊断性锥切及组织性活检，结果发现该病患为宫颈原位癌(CINIII)(CINIII)。上海市松江妇幼保健院上海市松江妇幼保健院 案例分享案例分享李女士，李女士，2525岁，岁，20082008年年2 2月到广东省妇幼就诊，发现月到广东省妇幼就诊，发现HPV16HPV16（+ +），），TCTTCT：良性反应改变。宫颈重度糜烂。阴道镜：良性反应改变。宫颈重度糜烂。阴道镜：CINCIN，病理，病理CINCIN，并，并进行了宫颈锥切术。进行了宫颈锥切术。20082008年年9 9月随访，持续月随访，持续HPV16HPV

14、16（+ +），），TCTTCT：HSILHSIL，阴道镜：阴道镜：CINCIN，病例，病例，CINCIN累腺。累腺。20082008年年11 11月随访，月随访，HPV16HPV16（+ +），），由于怀孕拒绝宫颈活检。由于怀孕拒绝宫颈活检。20102010年年6 6月，产后月，产后9 9个月，宫颈活检：子宫颈鳞个月，宫颈活检：子宫颈鳞状细胞癌。状细胞癌。 广东省妇幼保健院宫颈病变中心毛玲芝教广东省妇幼保健院宫颈病变中心毛玲芝教授授案例分享案例分享 女性，女性，2525岁，岁，20082008年年2 2月月2727日，日，HPV16HPV16（+ +），），TCTTCT：良性：良性反应改变。

15、宫颈重度糜烂。阴道镜：反应改变。宫颈重度糜烂。阴道镜：CINICINI，病理，病理CINIICINII，行了宫，行了宫颈锥切术。颈锥切术。20082008年年9 9月月HPV16HPV16（+ +），），TCTTCT：HSILHSIL，阴道镜，阴道镜CIN2CIN2，病理：，病理：CINIICINII，累腺。，累腺。20082008年年11 11月月HPV16HPV16（+ +），拒绝宫），拒绝宫颈活检。颈活检。20102010年年6 6月月2828日，产后日，产后9 9个月，宫颈活检：子宫颈鳞状个月，宫颈活检：子宫颈鳞状细胞癌。广泛全子宫切除加盆腔淋巴结清扫，病理：子宫颈鳞细胞癌。广泛全子宫

16、切除加盆腔淋巴结清扫，病理：子宫颈鳞状细胞癌（中分化型），位于宫颈上唇（状细胞癌（中分化型），位于宫颈上唇（12-112-1点），溃疡型点），溃疡型, ,癌癌组织浸润宫颈间质浅层组织浸润宫颈间质浅层, ,溃疡处浸润深度约溃疡处浸润深度约5mm5mm，宽约，宽约1cm1cm。此。此例是例是HPV16HPV16持续阳性两年最后导致宫颈癌。持续阳性两年最后导致宫颈癌。 广东省妇幼保健院广东省妇幼保健院案例分享案例分享n 早期的文献报道，HPV的多重感染与宫颈癌直接相关。n 现在越来越多的报道发现，HPV的多重感染与宫颈癌之间，不存在显著性的关系。潮州宫颈癌筛查工程潮州宫颈癌筛查工程-广东省妇幼保健院

17、广东省妇幼保健院 毛玲芝毛玲芝HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于区分单一感染或多重感染区分单一感染或多重感染女，女，4141岁，岁，20102010年做妇科检查，年做妇科检查，HPVHPV为多重感染，为多重感染，TCT(-)TCT(-)，医生建，医生建议半年后复查。议半年后复查。20112011年年3 3月患者进行复查，月患者进行复查，TCT(-)，HPVHPV感染型别比原感染型别比原来少了两个，病人因为少了两个型别很高兴，但妇科主任很重视，建来少了两个，病人因为少了两个型别很高兴，但妇科主任很重视，建议其进行活检，阴道镜下宫颈表面光滑，无任何异样，主任

18、还建议进议其进行活检，阴道镜下宫颈表面光滑，无任何异样，主任还建议进行多点随机组织取样，检查结果为原位癌，病人随后被送到省肿瘤医行多点随机组织取样，检查结果为原位癌，病人随后被送到省肿瘤医院，妇科主任亲自手术，现已痊愈、恢复出院。院，妇科主任亲自手术，现已痊愈、恢复出院。 分析：分析： 1 1、HPVHPV持续感染是引发宫颈癌的生物学诱因持续感染是引发宫颈癌的生物学诱因2 2、病人两次都检测出、病人两次都检测出HPVHPV阳性，但液基细胞检测两次均为阴性，阳性，但液基细胞检测两次均为阴性，说明说明HPVHPV检测比细胞学检查具有更高更明显的敏感度。检测比细胞学检查具有更高更明显的敏感度。 湖南

19、省湘潭市妇幼保健院湖南省湘潭市妇幼保健院案例分享案例分享n 不同型别的致癌风险不同不同的高危型促进LSIL向SCC转变的能力有差异。 HPV16，18 的致宫颈癌风险性大于其他高危型HPV。HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于阴道镜适应征阴道镜适应征HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于阴道镜适应征阴道镜适应征n 2009/2012年，美国年，美国ASCCP发布了发布了HPV 基因分型检测指南，基因分型检测指南，明确指出明确指出: 30妇女，细胞学未见上皮内病变和恶性细胞，妇女，细胞学未见上皮内病变和恶性细胞，;其他其他

20、HPV高危型，则在高危型，则在12个月后重个月后重复复HPV DNA检测和细胞学检查。检测和细胞学检查。（American Society for Colposcopy and Cervical Pathology, 2009）n 2010年，年，杨英捷、赵健、毕蕙等人的研究数据表明，等人的研究数据表明，HPV31、33的致癌风险也很高，建议的致癌风险也很高，建议HPV31、33直接行阴道镜检测直接行阴道镜检测 44 44岁女性，岁女性，20082008年年1010月月2424日，妇检宫颈光滑，滴虫（日，妇检宫颈光滑，滴虫（+ +）HPV16HPV16，5252（+ +），），TCTTCT：炎

21、细胞中度。未行阴道镜检查，：炎细胞中度。未行阴道镜检查，20102010年年1010月月1818日。阴道镜下宫颈活检病理日。阴道镜下宫颈活检病理: :鳞状细胞癌（中分化）。未鳞状细胞癌（中分化）。未按规范筛查及随访，导致宫颈癌发生。按规范筛查及随访，导致宫颈癌发生。 广东省妇幼保健院广东省妇幼保健院 37 37岁，细胞学检测结果为非典型腺细胞（岁，细胞学检测结果为非典型腺细胞（AGCAGC）并伴有阴道炎）并伴有阴道炎症，症，HPVHPV分型检测为分型检测为HPV16HPV16型阳性；医生建议病人做阴道镜及组型阳性；医生建议病人做阴道镜及组织活检，不过，当时病人没有同意。该病患回去后，考虑再三，

22、织活检，不过，当时病人没有同意。该病患回去后，考虑再三，两个月后才来到医院宫颈门诊做阴道镜检查。对该病患做两个月后才来到医院宫颈门诊做阴道镜检查。对该病患做LeepLeep诊诊断性锥切及组织性活检发现，该病患为宫颈原位癌断性锥切及组织性活检发现，该病患为宫颈原位癌(CINIII)(CINIII)。 上海市松江妇幼保健院上海市松江妇幼保健院案例分享案例分享HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于ASCUSASCUS分层管理分层管理 NCCN 子宫颈癌筛查临床实践指南 (2012)指出：对发生在成年人的ASC-US&LSIL有3个可供选择的方案，可选择HPV-DN

23、A检测将患者分流、6个月复查细胞学或立即阴道镜检查。n 阴道镜即使按照规范流程执行，依然有30%的漏诊HSIL。n 直接阴道镜检查或多点病理活检，引起创伤和过度诊治（40-60%）n 重复细胞学检查，有25%失访率，此外复检会增加病人经济及精神负担n HPV检测：为目前的最优方法。HPV检测阴性，可列入常规筛查人群；如HPV检测阳性，则考虑配合阴道镜检查4141岁女性，岁女性，20102010年年1010月，主诉性交出血，妇检；宫颈光滑。月，主诉性交出血，妇检；宫颈光滑。HPV16HPV16（+ +），），LCT ASCUSLCT ASCUS，阴道镜：宫颈，阴道镜：宫颈2 2点点0.5mm0.

24、5mm溃疡，未溃疡，未见醋白及异型血管。因患者一直有性交出血，一个月后病理：宫见醋白及异型血管。因患者一直有性交出血，一个月后病理：宫颈鳞状细胞癌。颈鳞状细胞癌。分析：分析：此例此例LCTLCT及阴道镜均漏诊了宫颈癌。及阴道镜均漏诊了宫颈癌。 广东省妇幼保健院广东省妇幼保健院案例分享案例分享HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于宫颈癌晚期治疗手段的选择宫颈癌晚期治疗手段的选择HPV18Advanced cervical cancerAdding chemo to RT:HPV18,58: improving survivalHPV16,33: minimal

25、 benefitHPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于宫颈病变的随访宫颈病变的随访n 宫颈病变治疗后失败失败的主要原因是同一基因型同一基因型HPVHPV的持续性感染的持续性感染 据瑞典的一项研究，针对完成宫颈锥切术后，术后随访结果有26例CIN复发；22例未复发。术后3个月用PCR方法检测宫颈细胞涂片HPV，其中： 26例复发者：25例为HPV阳性 22例对照组：全部为HPV阴性n 实验说明：宫颈病变治疗后检测HPV-DNA，可预测残余病变、估计疗效。 HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于宫颈病变的随访宫颈病变的随访女；

26、年龄女；年龄5454岁。于岁。于20112011年年3 3月月1414日到广东省妇幼保健院妇科就诊，日到广东省妇幼保健院妇科就诊，临床诊断为临床诊断为“子宫颈炎子宫颈炎”，行，行HPVHPV分型检查其结果为分型检查其结果为HPVHPV高危型高危型1616阳性。病人经手术治疗后，于同年的阳性。病人经手术治疗后，于同年的7 7月月1919日再次到省妇幼妇科就诊日再次到省妇幼妇科就诊（看诊的不是同一医生），临床诊断为（看诊的不是同一医生），临床诊断为“子宫颈恶性肿瘤术后子宫颈恶性肿瘤术后”，又复查又复查HPVHPV分型项目，其结果则为高危型分型项目，其结果则为高危型6868阳性，阳性，此标本此标本再

27、再做做HPV13HPV13荧光检查其结果也是阳性，荧光检查其结果也是阳性，CTCT值是值是2828. .9 9。针对此问题进行分析，得出以下几点原因：针对此问题进行分析，得出以下几点原因：1 1）此病人重新感染了）此病人重新感染了HPVHPV病毒；病毒；2) 2) 第一次检查中第一次检查中HPVHPV的两种型别产生了竞争性的抑制，术后优势的两种型别产生了竞争性的抑制，术后优势性别性别HPV16HPV16型被去除，型被去除，HPV68HPV68型显现；型显现；3 3）两次检查医生取样的部位不一致。）两次检查医生取样的部位不一致。 广东省妇幼保健院广东省妇幼保健院案例分享案例分享 43 43岁女性

28、，于岁女性，于20092009年年4 4月到广东省妇幼保健院妇检，月到广东省妇幼保健院妇检，HPVHPV分型检查分型检查结果为结果为HPV16HPV16（+ +），遂行阴道镜检查，拟诊为），遂行阴道镜检查，拟诊为HSILHSIL，即进行，即进行leepleep术，术，术后病理检查为术后病理检查为CIN2CIN2；于；于20102010年年9 9月进行复诊，月进行复诊，HPVHPV分型检查结果为分型检查结果为HPV56HPV56（+ +），细胞学检查结果为低度鳞状上皮内瘤样病变，阴道镜检），细胞学检查结果为低度鳞状上皮内瘤样病变，阴道镜检查拟诊为查拟诊为LSILLSIL，病理检查为，病理检查为C

29、IN1CIN1，该病情有所减轻。，该病情有所减轻。 31 31岁女性，每年岁女性，每年1 1次定期体检，于次定期体检，于20112011年年5 5月体检时，月体检时，HPVHPV分型检查分型检查结果为结果为HPV16HPV16、3333阳性，细胞学检查为阳性，细胞学检查为ASC-USASC-US，行阴道镜检查，拟诊，行阴道镜检查，拟诊为为HSILHSIL，病理检查为，病理检查为CIN3CIN3，即进行锥切；于，即进行锥切；于20112011年年1010月进行复诊，月进行复诊，HPVHPV分型检查结果为分型检查结果为HPV33HPV33阳性，细胞学检查为低度鳞状上皮内瘤样阳性，细胞学检查为低度鳞

30、状上皮内瘤样病变，阴道镜检查拟诊为病变，阴道镜检查拟诊为LSILLSIL，病理检查为，病理检查为CIN1CIN1，病情减轻，继续观察。，病情减轻，继续观察。 广东省妇幼保健院广东省妇幼保健院案例分享案例分享HPVHPV分型检测分型检测临床应用vHPVHPV分型检测用于分型检测用于指导疫苗的开发指导疫苗的开发n 针对针对衣壳蛋白（衣壳蛋白（L1L1）的的IgGIgG和和IgAIgA中和抗体在病毒感染的早期较为中和抗体在病毒感染的早期较为重要重要-预防性疫苗预防性疫苗 默沙东：默沙东：Gardasil（6、11、16、18） 葛兰素史克：葛兰素史克： Cervarix（16、18）n 针对针对早期

31、基因（早期基因（E6/E7E6/E7）的细胞免疫反应对最终清除病毒可能更为的细胞免疫反应对最终清除病毒可能更为重要重要-治疗性疫苗治疗性疫苗宫颈癌的预防宫颈癌的预防预防手段定期进行定期进行HPV检测检测51CE、SFDA认证凯普凯普HPV21HPV21分型分型52检测原理凯普凯普HPV21HPV21分型分型v PCRPCR，Polymerase Chain Reaction（聚合酶链式反应）v 导流杂交技术导流杂交技术（凯普自主创新技术） 高效、快速、灵敏、准确导流杂交导流杂交VSVS传统杂交传统杂交导流杂交导流杂交VSVS传统杂交传统杂交55实验过程凯普凯普HPV21HPV21分型分型生物素

32、点生物素点：主要监控所采用的杂交杂交体系是否有效；IC点：点：排除由于PCR抑制抑制导致的假阴性实验结果。凯普凯普HPV21HPV21分型分型n对于阴性样本，只有生物素点和对于阴性样本，只有生物素点和IC点同点同时显色才是正常结果时显色才是正常结果。n对于阳性样本，如果生物素点、对于阳性样本，如果生物素点、IC点和阳性点和阳性点都显色，则结果正常；点都显色，则结果正常；n有些阳性样本，生物素点和阳性点显色，但有些阳性样本，生物素点和阳性点显色，但IC点不显色，结果也是正常。点不显色，结果也是正常。凯普凯普HPV21HPV21分型分型58产品优势凯普凯普HPV21HPV21分型分型一次可同时得到

33、单一感染或多重感染的丰富信息在一张基因芯片上同时完成对杂交和扩增过程的全面监控独特的导流杂交原理使得操作更便捷，节约时间在一张基因芯片上可检出15种高危型和6种低危型分型分型检测检测省时省时省力省力双重双重对照对照信息信息丰富丰富论文论文科研项目科研项目HPVHPV数据库数据库卫生部临检中心卫生部临检中心HPVHPV检测行业室间评检测行业室间评估估WHO HPVWHO HPV网络监测评估网络监测评估国内外核心期刊上发表文章超过150篇，其中SCI收录国际论文15篇。参与国家863（北京大学附属第一人民医院）和973项目（华中科技大学附属同济医院）以及省市各级地方项目研究20余项。同卫生部合作，

34、凯普公司主导，北大附属第一人民医院、武汉同济医院、复旦大学附属妇产科医院及广东省妇幼联合参与。 中国临检中心之前一般只对HPV16和18两种型别进行测试。随着凯普21基因分型的推广，促使了中国临检中心从2012年5月开始对临床机构进行包含HPV16和18之内的多个HPV型别的检测评估。凯普凯普HPV21HPV21分型分型2010,2011连续两年参与WHO HPV网络试验评估，国际上使用凯普21基因分型检测产品的实验室（伊朗、马来西亚、中国香港、中国上海，中国潮州）检测结果同WHO提供的标准品检测，对16、18检测灵敏度高。宫颈癌的筛查宫颈癌的筛查学术影响凯普凯普HPV21HPV21分型分型凯

35、普凯普HPV21HPV21分型分型国际评价62市场份额凯普凯普HPV21HPV21分型分型v HPV分型试剂盒作为国内远销海外的分型产品，已成功打入到西班牙、日本、土耳其、以色列、印度、尼日利亚、新加坡、马来西亚等。v 已有在使用凯普HPV分型产品。v 检测网点遍布，临床检测量已达到。v月经期不可采集标本。（减少给受检者的损伤）v月经正常妇女，在月经来潮后1018天为最佳检查时间v不可在碘试验和醋酸试验之后采集样本。（可能会抑制PCR反应）v检查前48小时内不要作阴道冲洗，不要用避孕药膏等阴道内用药物。（可能会抑制PCR反应）v检查前48小时最好不要行性生活。（一过性假阳性） v样本采集后，注

36、意避免交叉污染。注意事项注意事项（1）样本的采集样本的采集采集部位样本的采集样本的采集uHPV-DNA检测样本是子宫颈转化带的子宫颈转化带的脱落细胞脱落细胞。u妊娠取样：妊娠取样：与非妊娠期相比,妊娠期由于高水平性激素的作用,使宫颈鳞柱状细胞交界线外移,柱状上皮暴露于宫颈阴道部,易于取材,并不增加检查的难度。u妊娠进行取样是安全的（NCCN.2012）v 凯普宫颈细胞采集器及细胞保存系统对于采集足够的宫颈脱落细胞和长期保存细胞样本十分必要。v 为了保证所采集细胞样本的质量，要求在采集细胞前先用棉拭子拭去拭去宫颈口的分泌物。宫颈口的分泌物。采集工具样本的采集样本的采集v 取样管上标签的名称须与患

37、者一一对应。v 使用凯普专用取样器及保存液，可抑制细菌生长，保持DNA完整性。v 宫颈保存系统包装打开后，必须立即进行采样，并连同刷头置于取样管中。v 样本收集中为保留足够的宫颈细胞标本，注意切勿将宫颈刷头丢弃。v 宫颈刷头折断、试验取样时，请小心操作，切忌大力震荡取样管，造成试剂及样本溅出影响检测结果或造成污染。v 取样后，切记拧紧取样管管盖。样本的采集样本的采集注意事项注意事项（2）v 样本一经采集，则应尽可能快的送至检测实验室。v 如若不能马上送检样本，请于4保存，并在2个星期之内进行检测。v 长期保存请放于-20。注意事项注意事项样本的保存样本的保存凯普公司成立12年，致力基因分子诊断

38、研究，并且在人乳头瘤病毒（HPV）检测研究方面取得世界领先地位。基于公司自主知识产权的导流杂交技术平台（美国专利号：5741647； 6020187）和通用荧光PCR技术平台，开发出了一系列针对宫颈癌早期筛查的HPV检测产品。 公司系列HPV检测技术产品，可以针对临床检测和大规模人群筛查等不同的需求，采用单一产品或者不同的HPV产品组合，在保证灵敏度和特异性的前提下，以最合适的性价比向医院、科研或政府部门提供优质的服务，造福于广大妇女。凯普公司介绍凯普公司介绍公司定位公司定位凯普公司介绍凯普公司介绍产品及服务产品及服务导流杂交导流杂交通用荧光通用荧光PCRPCR平台平台 参评产品：参评产品：凯普凯普2121分型、分型、1313荧光高危、荧光高危、1414高危荧光分型（高危荧光分型（12+212+2） 参评实验室：参评实验室：伊朗、马来西亚、中国香伊朗、马来西亚、中国香港、中国上海、中国潮州共提供港、中国上海、中国潮州共提供1010个检测个检测数据。数据。 凯普凯普2121分型分型产品在产品在5 5个实验室参加测评个实验室参加测评，其中对，其中对HPV16HPV16型别检测灵敏度型别检测灵敏度5 5个实验室个实验室均可达均可达5 IU /5l5 IU /5l，对，对HPV18HPV18型别检测灵敏型别检测灵敏度度4 4个实验室可达个实验室可达5 IU /5l5 IU /5