重组乙肝疫苗的研究

1、单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级*单击此处编辑母版标题样式*重组乙肝疫苗的研究主讲人：陶长寿组员：周庆科 兰榆坤 张娜 陶长寿 尹秀 指导老师：胡昌华 5乙肝疫苗的未来开展1346重组乙肝疫苗的种类及生产现状 重 组 乙 肝 疫 苗 的 工 艺 路 线参 与 竞 争 的 主 要 公 司现有乙肝疫苗存在的问题及优化改进的研究2乙 肝 以 及 乙 肝 疫 苗 的 研 究 历 史 成 员 安 排7目 录乙 肝乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种疾病。开展中国家发病率高，据统计，全球约20亿人曾感染过HBV，每年约有100万人死于HBV感染所致肝肝衰竭、肝硬

2、化和原发性肝癌HCC，全世界无病症乙肝病毒携带者超过亿,我国约占亿。多数无病症，其中1/3出现肝损害的临床表现。目前我国有乙肝患者3000万。乙肝的特点为起病较缓，以亚临床型及慢性型较常见。本病主要通过血液、母婴和性接触进行传播。什么是乙肝呢？乙肝：乙型病毒性肝炎，简称乙肝，是一种由乙型肝炎病毒HBV感染机体后所引起的疾病，分急性和慢性两种。 HBV不仅能引起急性肺炎、慢性肺炎，更为严重的是它与肝硬化、肝癌的发生有密切关系。临床主要表现为食欲减退、恶心、厌油、巩膜黄染、黄色尿、肝脏肿大、肝区痛等。乙肝的防治乙肝的治疗 最大限度地长期HBV，减轻肝细胞炎性坏死及肝纤维化，延缓和减少肝脏失代偿、肝

3、硬化、HCC及其并发症的发生，从而改善生活质量和延长存活时间。 乙肝的预防 接种 乙肝疫苗 是预防乙肝病毒感染最有效的方法 乙肝疫苗的研究历史血源性乙肝疫苗：此疫苗是用无病症的HBsAg携带者的血液制成基因重组乙肝疫苗：应用基因工程技术把编码HBSAg基因插入酵母菌基因组制成DNA 疫苗联合疫苗 未来新型疫苗的开展方向 目前仅停留在动物实验阶段血缘性疫苗是采用无病症HBsAg携带者的血浆并提纯，然后采用胃酶、尿素、甲醛三步化学灭活制备而成。重组疫苗是将编码诱导保护性免疫应答的结构抗原决定簇的病毒基因插入作为表达载体的DNA分子中，然后将载体导入细胞，使之表达编码病毒抗原的基因。其价廉、平安、制

4、备容易且可大批量生产，且与血源性疫苗具有相同的免疫源性，至今已渐取代血源疫苗。 乙肝疫苗的开展为预防和治疗乙肝起到了巨大的作用，从传统的血源疫苗开展到目前普遍采用的重组乙肝疫苗 重组乙型肝炎疫苗的种类及现状重组乙肝疫苗：由重组酵母或重组CHO工程细胞表达的乙型肝炎外表抗原，经纯化、灭活及参加佐剂吸附制成的疫苗。目前重组乙肝疫苗主要分为酵母表达疫苗，酿酒酵母和甲基营养型酵母以及中国仓鼠卵巢细胞CHO表达疫苗。重组酵母乙肝疫苗 重组酵母乙肝疫苗是借助基因工程技术，使酵母细胞表达重组的乙型肝炎病毒外表抗原(HbsAg)，经纯化并加佐剂吸附而制成，一种预防乙型肝炎的疫苗 。优点：酵母为低等真核微生物，

5、易于在营养成份简单的培养基中高密中发酵培养，利用工业化生产，表达量高，目前世界上大规模生产和上市的疫苗大多数由该表达系统制备而成。缺点：酵母不能模拟蛋白在人体肝细胞中的翻译后修饰、蛋白折叠、大分子组装以及糖基化。 重组CHO乙肝疫苗是采用哺乳动物细胞表达系统建SFDA的技术路线，20世纪80年代国内外学者对其展开了研究，采用中国仓鼠卵巢细胞，用基因工程技术将乙型肝炎外表抗原基因片段重组到中国仓鼠卵巢细胞(CHO)内，通过一定工艺制成的，疫苗外观有轻微乳白色沉淀。 优点：CHO细胞表达的重组HepB是高等真核细胞表达产物，其天然结构较低等的真核细胞酵母表达的HBsAg蛋白更适合人体吸收，生产过程

6、中不同于酵母使用硫氰酸盐处理，平安性好。 重组CHO乙肝疫苗重组乙肝疫苗的工艺路线 重组酵母乙肝疫苗的工艺路线菌种制备以及发酵过程别离纯化过程 重组CHO乙肝疫苗的工艺路线取细胞株收集培养液旋转培养至抗原分泌量达硫酸铵盐析密度梯度离心色谱纯化浓缩除菌过滤甲醛灭活AL(OH)3吸附分装注：选取的细胞株是国家批准的重组CHO乙型肝炎疫苗的细胞株目前，全球约有20家企业被世界卫生组织认定为疫苗生产商，然而疫苗市场实际上被4家跨国企业所垄断，这4家公司掌握着全球约34的疫苗市场。参与竞争的公司国外四大公司占据全球3/4疫苗市场葛兰素史克赛诺菲巴斯德默克公司立达公司葛兰素史克公司Engerix-B 由B

7、iogen公司与英国的Edinburgh大学共同研发酵母菌制造乙肝疫苗技术，并授权史克必成公司销售其产品。FendrixEngerix-B葛兰素史克公司生产的疫苗本品是葛兰素史克公司集乙肝疫苗Engerix-B 超过15年的经验的根底上研制而成的。本品的几何平均滴度(GMTs)更高，抗体存在的时间更长。赛诺菲巴斯德公司赛诺菲巴斯德HBvaxPROProcomvax默克公司默克公司Recombivax由默克公司销售的乙肝疫苗技术来自Chiron公司，它是在美国推一能与EngerixB竞争的产品。1992年的Recombivax销售额为09亿美元，1996年为44亿美元，其中重组酵母菌乙肝疫苗和血

8、源乙肝疫苗各占50，1999年为亿美元；在世界畅销的处方药中排字第147位，销售额比1998年增长69。 其它公司生产的CHO表达基因重组乙肝疫苗： 法国巴斯德研究所的Gen Hevac B 以色列 Bio-Technology General公司的Bio-Hep-B 瑞士的Hepreeombe等。 我国生产的基因乙肝疫苗有两种：一种是从默克公司引进的酵母基因工程乙肝疫苗, 另一种是1991年中国预防医学科学院病毒学研究所联合长春生物技术研究所等单位研制成功哺乳动物CHO细胞表达的基因工程疫苗，国内公司情况 :前几年重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母) 北京天坛生物深圳康泰GKS大连汉信华兰生物成都生

9、物研究所武汉生物研究所华北制药北京华尔盾长春生物研究所兰州生物研究所重组乙型肝炎疫苗(汉逊酵母) 重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞) 国内公司情况 :治疗性乙肝疫苗上市公司：重庆啤酒、天坛生物、广州药业从事乙型肝炎疫苗业务的上市公司主要有广州药业、重庆啤酒、通化东宝、华兰生物、天坛生物等。 天坛生物(600161) 广州药业(600332) 通化东宝(600867) 重庆啤酒(600132) 华兰生物(002007) DNA疫苗或于2021年上市 多肽疫苗吸引力强 Y型PEG类干扰素尚有不确定性 重组乙型肝炎疫苗通过GMP认证 重组酵母乙型肝炎疫苗 20212021现有乙肝疫苗存在的问题及优化改进

10、的研究(一). 现有疫苗剂量和免疫策略函待改进(二). 临床试验不标准(三). 首针及时率和全程覆盖率急待提高(四). 疫苗企业注册标准和说明书存在的问题(五). 不良反响(SAE)无有效的报告、 鉴别、处理以及反响 制度；(网络)(六). 加强科研图.成人5g/剂国产酵母疫苗免疫效果(检定所) 应增加生产高剂量酵母乙肝疫苗以满足成人需要成人乙肝疫苗免疫效果 应加强方案免疫外人群的疫苗接种1 现有疫苗剂量和免疫策略函待改进 成人与儿童乙肝疫苗免疫持久性比较中国公共卫生杂志 乙肝疫苗免疫后抗HBs阳转率与年龄的关系 免后 儿童 成人 时间 阳转率% 阳转率% 12 24 36 成人乙肝疫苗免疫效

11、果中华预防医学杂志乙肝疫苗免疫后抗HBs阳转率与年龄的关系 免疫后 35岁 35岁 时间月人数 阳转数% 人数 阳转数% 12 62 52 54 28 51.9* 24 54 21 53 14 36 50 14 46 6 2 临床试验不标准解决方法：?疫苗临床试验指导原那么? 2004年10月执行1.试验设计2.试剂质量水平低,统计分析方法不标准3.操作不标准4.未进行真正意义上的IV期临床试验3 计免疫苗首针及时率和全程覆盖率急待提高 管理、宣传、组织 新型减少针刺、缓释、控释疫苗及联合疫苗的研发和推广4 疫苗企业注册标准和说明书存在的问题 目前的企业标准以国家标准为最高标准 使用说明书缺乏

12、信息5 不良反响管理制度亟待完善6 加强科研加强科研函待深入研究病毒与宿主的相互作用机制病毒感染后的自然史病毒变异和基因型与临床转归和疫苗效果的关系 . 影响现有乙肝疫苗效果因素分析; 病毒体液免疫; 细胞免疫位点变异的影响; 无应答人群的遗传背景研究；研究新型佐剂和控释系统，开发研制新型减少针次的预防性疫苗和治疗性疫苗。 乙肝疫苗的未来开展传统疫苗受制作工艺的限制，其保存、使用和接种副反响等方面都容易出现一些问题。其特点主要有三点：以完整的病原体作为抗原、在身上容易获得抗原、灭活不好会导致感染。如何解决呢？联合疫苗治疗性疫苗针对传统疫苗的缺乏，进一步研究，开展出联合疫苗及治疗性疫苗，它们克服

13、传统疫苗的缺乏同时也有自身的优点。联合疫苗是指由多种抗原混合制成的疫苗，包括两大类：一类是由多种病原的抗原组成的多联疫苗，可预防多种疾病，如“百白破疫苗等；一类是由同一细菌或病毒的不同亚型或血清型组成的多价疫苗，如“价肺炎球菌疫苗等。优点：减少注射针次； 接种副反响少； 提高接种覆盖率 联合疫苗代表了未来疫苗的开展方向。通过对联合疫苗的生产技术、临床评价以及使用时的接种程序等方面问题的不断探索，相信越来越多的集便捷、舒适、平安、有效于一体的联合疫苗将用于免疫预防 。 联合疫苗 VS 传统疫苗 治疗性疫苗 VS 传统疫苗治疗性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的机体中，通过诱导特异性的免疫应答，到