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文档简介

1、绪论名词解释 1.外植体(explant):由活植物体(in vivo)上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。离体培养的材料,包括:器官、组织、细胞、原生质体。 2.愈伤组织:在组织培养中指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。3.细胞全能性:植物体的每一个细胞都含有一个完整个体的全套基因,这些基因在适宜的外界条件下按照某种特定的程序先后表达,最终分化形成一个完整的植株。 4.脱分化:一个成熟细胞转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象叫做脱分化。5.再分化:一个成熟的植物细胞经历了脱分化之后,经过培养还能形成完整的植株。再分化的过程有两种方式:器官发生方式,胚胎发生方式。

2、6.再生:指组织、器官、悬浮细胞和原生质体经培养后获得植株的过程。7.继代:植物组织培养过程中,外植体在培养基上培养一段时间以后需要转移到新的培养基上进行培养,称为继代。 8、初代培养;接种某些外植体后,最初的几代培养,旨在获得无菌材料和无性繁殖系。即9、消毒:是指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用。10、灭菌:是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,把所有生命的物质全部杀死。简答1.什么是植物组织培养?有哪些类型? (1)植物组织培养(plant tissue culture)是指在无菌和人工控制的条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官(如根、

3、茎、叶、花、果实、种子、胚、花药、子房等)、组织(如形成层、皮层、胚乳等)、细胞(如体细胞、生殖细胞花粉等)、原生质、幼小的植株进行培养,使其再生细胞或完整的植株的技术。 (2)组织培养分为五种类型:胚胎培养,器官培养(根、茎、叶、花、果实等),组织培养(茎尖分生组织、形成层、表皮组织等),细胞培养,原生质体培养。又可以根据培养方式的不同,分为固体培养和液体培养(纸桥,静置,旋转,震荡培养四种方式)。2.什么是细胞全能性学说?如何理解?(1)细胞全能性学说,即植物体的每一个细胞都含有一个完整个体的全套基因,这些基因在适宜的外界条件下按照某种特定的程序先后表达,最终分化形成一个完整的植株,称为细

4、胞全能性(totipotency)(2)必须满足两个条件: 一是要把这些细胞从植物体其余部分的抑制性影响下解脱出来,也就是说必须使部分细胞处于离体的条件下。 二是要给予它们适当的刺激,即给予它们一定的营养物质,并使它们受到一定的激素的作用。(3)全能性体现的两个过程 一个已分化的细胞要表现它的全能性,必须经历两个过程,即首先要经历脱分化过程,然后再经历再分化过程。3.培养基的营养组成:(1)无机营养大量元素:氮、磷、钾、硫、钙、镁;浓度大于0.5mmol(2)无机营养微量元素:铁、硼、锰、铜、锌、钼、氯;浓度小于0.5mmol(3)有机营养:维生素、肌醇、氨基酸等(4)植物生长调节剂:生长素类

5、(2,4-D、NAA、 IAA、 IBA),细胞分裂素类(KT BA ZT ),其他类(GA ABA)(5)附加物: 琼脂、活性碳、一些天然复合物。4、组织培养在农业中的应用可以有以下10个方面:(1)组织培养是转基因技术不可或缺的组成部分,无论是转基因受体的提供,还是转化细胞的筛选和再生,都需要有组织培养技术作为支撑。(2)在自花授粉作物杂交育种中,或在异花授粉作物自交系选育过程中,采用花药培养技术不但可缩短杂合体纯合化所需的时间,而且还可以节省土地面积。(3)在某些雌雄异株植物(如石刁柏)中,若把花药培养技术包括到制种程序中去,在后代就有可能得到均匀一致的单性群体,提高经济效益。(4)在远

6、缘杂交中,通过离体授粉或原生质体融合有可能克服受精前障碍,在通过幼龄合子胚培养可以克服受精后障碍,通过体细胞融合还有可能制造出细胞质杂种。(5)对于无药可治的病毒病,可通过茎尖培养消除病毒,这对解决马铃薯种薯退化问题能发挥重要的作用,在其他很多植物中也可用以建立无毒原种。(6)通过离体诱导不定芽或促进腋芽生枝,可对很多重要的园艺植物和名贵花卉、树种进行快速繁殖。(7)应用在细胞水平上进行突变体选择的技术,可以在一定程度上使高等植物的育种程序微生物化,从而大大提高选择效率,节省时间和土地面积,并且不受季节的限制。(8)体细胞无性系变异是除有性杂交和理化诱变之外的第三个变异来源。(9)通过用人工种

7、皮包被体细胞胚制造人工种子,为某些稀有和珍贵物种的繁殖提供了一种高效的手段。(10)在无性繁殖植物中,通过对茎尖分生组织等离体材料进行超低温保存,不但可以大大节省空间,而且还可以避免病虫害的侵袭。第一章1、组织培养室的组成:准备室,温室,驯化室,培养室,无菌操作室,缓冲室。2、接种器具:镊子、剪刀、解剖刀等,培养设备:培养箱、培养架等。3、培养基的成分:无机营养物,有机营养物(碳水化合物,维生素,肌醇,氨基酸),植物生长调节剂,碳水化合物以及其他添加物。4、植物生长调节物质主要有哪几类,及其主要类型与作用。(1)主要有生长素类,细胞分裂素类,赤霉素。(2)生长素类。作用:主要被用于诱导愈伤组织

8、形成;促进细胞脱分化;促进细胞伸长;促进生根。在配置生长素溶液时,溶于95%乙醇或1mol/LNaOH。常用的生长素有吲哚乙酸(IAA),2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)等。IBA是促进发根能力较强的生长调节物质。NAA和IBA广泛用于生根,并与细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。2,4D起动能力比IAA高10倍,特别在促进愈伤组织的形成上活力最高,但它强烈抑制芽的形成。诱导愈伤组织的能力:2,4-D>NAA>IBA>IAA。 (3)细胞分裂素作用:促进细胞分裂与扩大。诱导芽分化,促进侧芽萌发,使茎增粗,抑制茎伸长。 抑制根的分化。种类:

9、6BA(6苄基腺嘌呤),Kt (kinetin 激动素),Zt (zeatin 玉米素)。其中最常用的是6BA。其中ZT活性最强,但昂贵,常用的是6BA。配置溶液时溶于1mol/L的HCl。作用强弱顺序:Zt>6-BA>Kt (4)GA3(赤霉酸):作用:促进幼芽伸长生长,促进不定胚发育成小植株。易溶于水,但是不稳定,常溶于95%酒精,配成母液。赤霉素和生长素协同作用,对形成层的分化有影响:当生长素赤霉素比值高时有利于木质部分化,比值低时有利于韧皮部分化。 (5)脱落酸 适当加入ABA可明显提高体细胞胚的数量和质量,抑制异常体细胞胚的发生。 (6)乙烯 组织培养中,乙烯对培养物的生

10、长、胚胎发生或芽的形成有抑制作用。 抑制乙烯:可降低培养基中蔗糖的浓度,或用麦芽糖或葡萄糖代替蔗糖,也可添加一定浓度的硝酸银(5-15mg/L)抑制乙烯形成。乙烯的合成途径:蛋氨酸SAM ACC 乙烯成熟基因(PG,PE)。控制乙烯合成: ACC合酶 (ACC synthase),ACC氧化酶(ACC oxidase)5、培养基中的有机成分及其作用 (1)、碳水化合物里,最常用的碳源是蔗糖,葡萄糖和果糖也是较好的碳源。使用浓度在1%5%,常用3% 作用:碳源;维持培养基渗透压。 (2)、维生素,作用:在细胞里主要是以各种辅酶的形式参与多种代谢活动,主要有VBl(盐酸硫胺素)、VB6(

11、盐酸吡哆醇)、Vpp(烟酸)、Vc(抗坏血酸)、有时还使用生物素、叶酸、VB12等。一般用量为0110mgL。 (3)、肌醇,使用浓度:一般为lOOmgL,作用:适当使用肌醇,能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用,对细胞壁的形成也有作用。 (4)氨基酸,作用:是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收利用。使用浓度:为10200mgL。种类:最常用的是甘氨酸,其他的如精氨酸、谷氨酸,谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等。6如何利用植物激素调控愈伤组织形态的发生?形态发生有哪些途径?生长素/细胞分裂素的比值与组织培养的关系: 比值大时有利于愈伤组织、根的形成,这时

12、生长素起主导作用;比值小时,则促进芽的形成,这时细胞分裂素起主导作用。 愈伤组织的形态发生途径 : 胚胎发生途径 器官发生途径 7、固体培养基最好的固化剂-琼脂Agar。用量:6-10g/L。90时融化,40凝固。配制完的培养基灭好菌后要早点拿出来,防止琼脂不凝固。灭菌时间过长则颜色会变深,pH高易于凝固。8、 抗生物质 种类:青霉素、链霉素、庆大霉素等。浓度:520mg/L。作用:可防止菌类污染。9、 活性炭 目的:是利用其吸附能力,减少一些有毒物质的影响;利于生根;减少玻璃化。缺点:无选择性,营养物质和植物调节剂。使用浓度:15gL。10、 配制培养基时,水要用蒸馏水。11、 pH值 多数

13、植物要求pH5.6-5.8,用0.1-1N的NaOH和0.1-1N的HCI调节.。注意:经高压灭菌后,培养基pH会下降0.2-0.8,固调整pH值时,应高于0.5;pH的大小会影响琼脂的凝固能力,当pH>6.0时,培养基将会变硬,pH <5.0时,琼脂凝固不好。23、常用培养基的种类:MS培养基。无机离子浓度较高。White培养基 无机盐浓度较低,适于生根培养或者胚培养,也可用于悬浮细胞和原生质体培养。N6培养基 在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花粉和花药培养。B5培养基 为培养大豆根细胞设计。KM8P培养基:为原生质体培养而设计的。24、培养基的配制流程 (1)将母液按顺

14、序摆放(2)取适量的蒸馏水(所需培养基量的2/3)入容器(3)按需要量依次取母液及生长调节物质(4)加入蔗糖(30g/L)溶解(5)加琼脂(6-10g/L),煮沸,2-3min(6)定容(7)调PH值(pH=5.8)(8)分装培养瓶,封口(9)高压灭菌25、常用的灭菌方法:物理方法,干热灭菌,湿热灭菌(培养基在配置完成24h之内完成灭菌工序),射线处理,过滤除菌(不耐热的物质,滤膜网孔直径为0.45m),大量无菌水冲洗。26、继代中常会出现的问题(1)驯化现象:在植物组织培养中,发现一些植物组织经长期继代培养,发生了一些变化。开始继代培养要加入生长调节物质,其后加入少量或不加入生长调节物质就可

15、以生长、这种现象称为“驯化”。(2)玻璃化现象:当植物材料不断地进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明状,呈水迹状,这种现象通常称为玻璃化。(3)衰退现象:培养材料经过多次继代培养,而发生形态能力丧失、生长发育不良、再生能力降低和增值率下降的现象。27、试管苗移栽时的注意事项:(1)防止断根;(2)选用生根粉(3)育苗基质;(4)适当遮阴;(5)移栽后管理。第二章名词解释1. 植物快繁:利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养,使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法,也称植物快繁或微繁。 2. 丛生芽:定芽的萌动,形成微型的多枝多芽的小灌木丛状结构。如顶芽切取尖端,可产生无

16、病毒植株。 3、.原球茎:短缩的、珠粒状的、胚性细胞、类似幼茎的器官,可增殖、形成原球茎丛。 4、.驯化:试管苗从异养到自养的转变,是一个逐渐适应的过程。5、.玻璃化现象:表现:试管苗叶片、嫩梢呈水浸透明或半透明状。6. 褐化现象:表现:培养材料向培养基中释放褐色物质,致使培养基和培养材料逐渐变褐,导致植物体死亡的现象。7. 黄化现象:试管苗幼苗整株失绿,全部或部分黄化、斑驳的现象。 8.无性系:以茶树单株营养体为材料,采用无性繁殖法繁殖的品种(品系)称无性系品种9.无性系变异:培养物在培养阶段发生变异,进而导致再生植株也发生遗传改变的现象。简答1、简述植物快繁器官形成的5种方式及其特点?植物

17、快繁的器官再生方式分为:一、短枝发生型:外植体携带的带叶茎段,在适宜的培养环境下萌发,形成完整植株,再将其剪成带叶茎段,继代成苗的繁殖方法。与田间的扦插方法相似,也称微繁扦插。优点:一次成苗,遗传性状稳定,培养过程简单,移栽成活率高。应用:花卉和葡萄试管苗的繁殖。二、丛生芽发生型:外植体携带的顶芽或腋芽,在适宜的培养环境中不断发生腋芽而呈丛生芽状态,将单个芽转入生根培养基中,诱导生根成苗的繁殖方法。优点:不经过愈伤组织,保持性状好。应用:大多数植物试管苗的繁殖。三、不定芽发生型:外植体在适宜的培养环境中,经历两种途径:a.经过脱分化形成愈伤组织,然后经过再分化产生不定芽-器官发生型b.外植体不

18、形成愈伤组织而直接从其表面形成不定芽-器官型。将芽苗转入生根培养基中,诱导生根成苗的繁殖方法。特点:增殖率高于丛生芽,但有变异发生。应用:也是大多数植物试管苗的繁殖方式。四、胚状体发生型:外植体在适宜的培养环境中,经过诱导产生体细胞胚的繁殖方法。特点:不经过生根培养,直接形成小植株。成苗数量大,速度快,结构完整。五、原球茎发生型:茎尖或腋芽外植体诱导成原球茎,切割原球茎进行增殖,或停止切割使其继续培养转绿,产生毛状假根的繁殖方法。应用于兰科植物快繁。2、快繁的过程:无菌培养物的建立:繁殖体增殖:芽苗生根:小植株的移栽驯化3、影响快繁的因素:外植体,培养基(MS,糖),培养条件,继代培养,移栽4

19、、驯化原则:从温,光,湿度及有无杂菌等环境因素考虑,驯化开始数天内,与培养环境条件相似,后期与预期栽培环境相似,逐步适应。 5、试管苗移栽的步骤(1)轻轻地洗掉粘在根上的琼脂培养基。(2)移栽时,把小植株的一部分叶片剪掉也可能是有益的。(3)移栽后,最初10-15天要通过喷雾或罩上透明塑料以保持很高的湿度(90-100%),在塑料罩上可打些小孔,以利气体交换。(4)在保湿数天之后,可把植株搬入温室,但仍需遮荫数日。移栽后要完成上述各个步骤可能需花费4-6周时间,此后即可让这些植株在正常的室温条件下生长。6、褐变的发生,影响因素及处理方法(1)外植体褐变:多酚氧化酶是植物体内普遍存在的一类末端氧

20、化酶,它催化酚类化合物形成醌和水,醌再经非酶促聚合形成深色物质,对植物体材料产生毒害作用。(2)褐变的影响因素:1、植物种类及基因型。2、外植体的部位及生理状态。3、外植体的受伤程度。4培养基的成分和培养条件。5、培养时间过长(3)防止褐变的方法:选择适宜的处植体;对外植体进行处理,如先进行低温处理,再放入只含糖的琼脂培养基中,使酚类物质渗入到培养基中;选择适宜的培养基和培养条件;添加褐变抑制剂和吸附剂。如维生素C等连续转移。减轻酚类化合物的毒害。7、玻璃化现象:在进行植物组织培养时,经常会出现试管苗生长异常,叶等出现透明或半透明的水浸状植物矮小肿胀,失绿等现象称为玻璃化现象。机理:在芽分化启

21、动后,某些生物分子发生生理变化,内源乙烯过剩,诱发了其他激素质和量的改变。防止玻璃化措施:1、增加琼脂浓度。2、提高糖的含量或加入渗透剂,降低培养基中渗透势,减少植物材料可获得的水分。3、降低培养基中细胞分裂素的含量4、增加光照、控制温度、改善通风换气条件。植物体脱毒技术名词解释1、茎尖:是由顶端分生组织及其下方的1-3个幼叶原基组成的. 2、原原种:脱毒试管苗出瓶移栽后的苗木称作原原种,一般保存在科研单位的隔离网室内3、原种:原原种繁殖的苗木称作原种 4、微体嫁接法:将极小的茎尖(0.14-1.0mm)作为接穗嫁接不带病毒的种子实生苗砧木上,然后将砧木、接穗一起在培养基上培养。5、珠心组织培

22、养脱毒法:病毒通过维管组织传播,而珠心组织与维管组织没有直接联系,故可以通过珠心组织培养获得无病毒植株。二、简答1.简述植物脱毒方法的种类?茎尖培养脱毒法,热处理脱毒法,微体嫁接法,珠心组织培养脱毒法,愈伤组织培养脱毒法2、简述植物茎尖脱毒方法的原理? 病毒是DNA大分子,它侵染植物后可进入植物细胞。当植物细胞分裂时,病毒DNA随着复制。因此,植物细胞分裂和病毒繁殖之间存在相互竞争,在迅速分裂的植物细胞中,是正常核蛋白合成占优势,而在植物细胞伸长期间,是病毒核蛋白合成占优势。生长点、分生组织细胞是活跃分裂的细胞。其分裂速度比病毒DNA复制速度快,故采用旺盛分裂的生长点离体培养,就有可能脱除植物

23、病毒。3、如何进行脱毒效果的检测? 视觉观察法,生物鉴定法(利用嫁接法接种,把待测的植物接种在敏感植物上,然后视其有无病斑,来判断是否脱除了病毒),电子显微镜鉴定法(用电子显微镜直接观察经脱毒培养的叶片,检查是否有病毒粒子存在,还可测量病毒颗粒的大小、形状和结构),抗血清鉴定法(利用抗原与抗体特异反应的特性,用已知病毒的抗血清来鉴定未知病毒的种类,其中酶联免役吸附反应(ELISA)是常用的一种方法),分光光度法。4、植物病毒病的防治措施:1)、选育抗病品种 2)、消灭传毒昆虫 3)、用无性繁殖法培育无毒苗 4)、接种弱毒株来保护植物 5)、采用合理的栽培措施等5、植物脱毒的意义1)、能够有效地

24、保持优良品种的特性2)、快速繁殖品种,使优良品种迅速应用3)、生产无病毒种苗,防止品种退化4)、节约耕地,提高农产品的商品率5)、便于运输第三章 1、 植物细胞培养(plant cell culture):是在离体条件下,将愈伤组织或其他易分离的组织置于液体培养基中,进行振荡培养,得到分散成游离的悬浮细胞,通过继代培养增殖,获得大量细胞群体的一种技术。优点:操作简便、重复性好、群体大等。分类:植物细胞培养的特性(1)植物细胞较微生物细胞大得多,有纤维素细胞壁。(2)培养过程生长速度缓慢,易受微生物污染,需用抗生素;(3)细胞生长的中期及对数期易凝聚为团块,不能象微生物一样均匀分散,悬浮培养较难

25、;(4)培养时需供氧。(5)因为有细胞壁, 培养细胞产物滞留于细胞内,产量较低;(6)细胞培养过程有结构与功能全能性,因而易分化。(7)悬浮培养中要求有一定的细胞浓度,否则不生长(25000-50000个/ML)。植物细胞培养需要解决的问题(1)氧和二氧化碳的控制,过多氧过少氧均不利于生长;(2)营养物的供应;(3)细胞密度过高引起细胞团聚甚至分化,培养过程中细胞的分化的防止,(4)细胞取得中微生物的去除;植物细胞培养的意义:(1)研究细胞生理代谢过程及各种影响因子;(2)用于植物品种的改良;(3)用于植物次生代谢物质的生产。 (生产药物、食品添加剂、农药、饲料等。)一、单细胞分离 机械法和酶

26、解法(果胶酶处理)2、 单细胞培养 单细胞培养:对分离得到的单个细胞进行培养,诱导其分裂增殖,形成细胞团,再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体,直到长成完整植株的技术。 平板培养法(将一定浓度的单细胞悬浮液接种于含薄层固体培养基的培养皿内的培养过程)、 看护培养(指利用生长的愈伤组织所产生的物质来培养单细胞或者异种愈伤组织等的方法)、 微室培养(在人工制造的无菌小室中,将一滴悬浮细胞液培养在少量培养基上,置于微室中培养,使其分裂增殖形成细胞团的方法) 纸桥培养法(是指植物茎尖分生组织培养常用的方法,有时也可用于单细胞培养)三、细胞悬浮培养1、定义:将单个游离单细胞或小细胞团按一定密度悬浮在液

27、体培养基中进行悬浮培养增殖的技术。又分为成批培养和连续培养。成批培养(分批培养)是在一个封闭的系统中进行细胞培养,当培养物增加到一定量时,需继代培养,即取出少量培养物转接于新鲜培养液中。连续培养是用一定容积的非密闭系统进行细胞培养的方法,在培养过程中不断注入新鲜培养基,而使营养物连续得到补充,细胞生长和增殖连续进行,同时有等体积的培养物排除系统。分为封闭型和开放型连续培养两种。分批培养:将愈伤组织培养在一定容积的密闭容器中进行培养。特点:培养基体积固定;细胞数目不断发生变化,呈S增长。分批培养中细胞生长各个时期的特点:滞后期:细胞很少分裂,其长短与接种量大小和继代时原种细胞所处的生长期有关对数

28、生长期:细胞分裂活跃,细胞数目增加,增长速率保持不变直线生长期:细胞生长和发育最明显的时期缓慢期:生长逐渐缓慢:培养液消耗将尽,有毒代谢物质增多,氧气减少静止期:生长几乎处于停止状态,细胞数目增加极少,甚至开始死亡。开放式连续培养:排出液中的细胞用机械方法收集后,又放入原培养基,所以其培养细胞数目不断增加;封闭式连续培养:在注入新鲜培养基的同时,培养细胞随同培养液一起流出,培养细胞数目保持恒定;通过调节流入和流出的速度,使培养物的生长速度永远保持接近最高值的恒定水平上。2、 悬浮培养的步骤:愈伤组织诱导,悬浮系的建立与继代培养,悬浮细胞的生长动态,悬浮培养细胞的同步化3、 细胞同步化是指同一悬

29、浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。4、 同步化的方法:(1)分选法 梯度离心、过滤;根据细胞体积大小分级,将悬浮细胞通过20、30、40、60目的滤网过滤,培养,再过滤,重复几次即可获得同步化较高的细胞。优点:操作简便,维持了细胞的自然生长状态。缺点:无细胞壁,形状不规则,分选精细程度较差。(2)低温处理 4DNA合成受阻,细胞趋向G1期。(3)饥饿法 细胞生长所需的营养成分丧失,导致细胞因饥饿而分裂受阻,停留在某一时期,加入所缺成分后又恢复。N、P同时饥饿处理一种海藻50 h,有二分之一的细胞处于G1期。(4)抑制剂法 DNA合成抑制剂,如5-氨基尿嘧啶。细胞不能合成DN

30、A,处于G1和S期。四、次生代谢产物积累1、次生代谢产物:是指有些生物体利用某些初生代谢产物 为“原料”,在一系列酶的催化下,形成一些特殊的化学物质的过程,这些特殊的化学物质即为次生代谢产物。2、植物产生代谢产物的类型及结构特点3、次生代谢产物生产中存在的问题(1)细胞的增殖与次生物质的合成速度不够理想;(2)代谢产物的释放问题;(3)生长激素是否安全问题;(4)生产成本较高的问题。第四章 转基因技术1、目的基因的分离 (1)文库法(cDNA文库,基因组文库)(2)PCR法(3)目的基因的化学合成2、转基因方法概括起来主要有两类:外源目的的DNA直接转化,或者叫直接导入法。如基因枪法;电击法;花粉管通道法。以载体为媒介的遗传转化,也称间接转移系统法。农杆菌介导法和病毒介导法。3、转基因植株的检测方法(1) 报告基因检测(2) DNA水平检测(PCR,southern blot 检测插入基因的拷贝数,RT-PCR检测和荧光定量PCR和Northern blot为转录水平的检测。(3)蛋白水平的检测,第五章 植物花药和花粉培养一、名词解释:单倍体:指的是具有配子

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