种子检验原理和方法

1、种子检验第一章 种子检验概述第一节 种子检验及其发展 一、种子检验的概念 通过对作物种子样品的主要质量指标进行鉴别，测定，来判断和评价整个种子批利用价值的一门应用（科学）技术。 为了获得种子批的准确信息，需要： 1、样品要有代表性； 2、按一定的标准程序进行检验； 3、所用仪器设备要先进且标准； 4、检验人员要精通相应的理论与技术。 二、种子检验的发展 1869年F.Nobbe在德国萨克森地区建立世界上第一个种子实验室，1876年出版种子学手册。 1906年在德国召开第一次国际种子检验大会。1908年美、加两国成立北美官方种子分析家协会（AOSA)。1921年在法国成立欧洲种子检验协会(EST

2、A)，1924年改为国际种子检验协会（ISTA）。不久颁布国际种子检验规程并多次修订。现下设17个技术委员会。 我国解放之初没有专门的种子检验机构，1957年开始举办检验训练班；1983 、1984年分别颁布农作物种子检验规程和农作物种子； 适应形势的发展1995和1996年分别颁布新的农作物种子检验规程与农作物种子质量标准，其中农作物种子检验规程中的主要方法即等效采用93国际种子检验规程。 三、种子检验的意义 1、根据种子检验正确划分种子等级，贯彻优质、优价政策，以经济杠杆促进种子质量提高。 2、为正确地进行种子贮运加工提供科学依据。 3、限制病、虫、杂草的传播与蔓延。 4、限制不符合标准的

3、种子销售与使用。 5、确保种子质量，维护国家声誉。第二节 种子检验的内容与程序 一、种子检验的内容 种子检验内容包括品种品质和播种品质两大类，前者包含品种真实性和纯度两个指标；后者包含的内容较多，主要有种子净度、发芽率、水分、活力、生活力、粒重、健康度等。 种子检验又分田间检验（种子生产过程中的检验）和室内检验（产后检验）两部分。 二、种子检验程序：取样检验签证第二章 田间检验第一节 品种纯度检验的意义 一、品种纯度的概念 品种纯度是指某一品种群体在特征特性方面典型一致的程度。用供检样品中本品种占本作物的数量百分率表示。即： 品种纯度=（本品种数量/本作物数量）100% 二、品种纯度检验的意义

4、 1、品种纯度在生产过程中不可避免要降低 2、品种真实性和纯度对作物产量和产品质量具有直接而显著的影响。第二节 品种纯度检验的依据 一、纯度检验的基本原则 1、要有标准对照；2、抓住火候； 3、综合判断； 4、注意环境的影响。 二、纯度检验的依据 纯度检验的依据是品种之间稳定而明显的差异性状（这种差异性是在品种审定时就已经决定了的）。 1、形态学性状：包括种子、幼苗和植株形态。 2、生理学性状：如抗性、光周期等。 3、化学性状：如苯酚染色。 4、物理学性状：如荧光测定。 5、生物化学性状：电泳谱带鉴定。 6、细胞学性状：染色体数目鉴定，如三倍体西瓜 7、分子标记性状：如RAPD多态性等。 8、

5、解剖学性状：如十字花科种皮解剖结构观察 三、田间检验的具体性状（以玉米为例） 1、苗期：叶色、叶鞘色、叶形等； 2、抽穗开花期：穗部性状（雌穗、雄穗）与植株性状； 3、成熟期：穗部性状（穗型、穗轴色、穗行） 子粒性状（粒形、粒色、粒重等）第三节 田间检验的内容与方法 一、田间检验的内容：真实性、纯度、隔离区为主，同时检验杂草、异作物混杂程度、病虫感染率和生育状况等。如果是杂交种生产田要分别检验父、母本杂株率，玉米制种田还要检验母本散粉株率。 二、田间检验时期：一般分苗期、花期和成熟期进行，其中常规品种重点在成熟期，杂交制种重点在花期。 三、田间检验的程序和方法 （一）了解种子田基本情况 （二）

6、检查隔离区 杂交种及其亲本的隔离要求（米）种子田类 别玉米高粱水稻向日葵原 种亲本繁殖杂交制种10005003001000500400600300100500050003000 （三）取样 1、划区设点 大田作物的取样点数和株数作物种类面积（亩）取样点数每点株数稻、麦、粟黍5以下6-2021-5051-100101-200201以上5791115每增5亩，增1点1000豆类、花生同上同上500玉米、高粱同上同上300 2、取样方式：梅花式、对角线式、大垄取样、棋盘式取样。 （四）检验与计算 常规品种： 1、纯度=（本品种株数/本作物株数） 100% 2、杂株率=（异品种株数/本作物株数 100

7、% 杂交制种田： 1、父（母）本杂株率=父（母）本杂株数/供检父（母）本株数 100% 2、玉米母本散粉株率=母本散粉株数/供检母本株数 100% （五）结果填报 杂交种田间检验结果报告单 字第 号生产单位 作物名称 品种名称 制种面积 隔离情况 取样点数 取样总株数 田间纯度检验纯度% 母本杂株率% 异品种% 父本杂株率% 异作物% 母本散粉株率% 病虫感染率% 杂草% 生育状况 建议或意见 第三章 室内检验第一节 扦样 一、扦样的目的和原则 （一）扦样的目的：从一个种子批中扦取到数量适当、有代表性的供检样品。 （二）几个术语 1、种子批（Seed Lot)：同一品种、同一来源、同一年度、同

8、一季节收获、质量基本一致，在规定数量范围内的种子。 2、初次样品(Primary Sample)：从种子批的一个扦样点扦取的一小部分种子。 3、混合样品（Composite Sample)：同一种子批内扦取的所有初次样品混合而成的样品。 4、送验样品(Submitted Sample)：送到检验机构检验、数量在规定范围内的样品。 5、试验样品（试样）(Working Sample)：从送验样品中分出、供某一具体项目测定的样品。 6、封缄（Sealed）：把种子装在容器内，封好后如不启封，无法把种子取出。如果容器本身不具备密封性能，每一容器加正式封印或不易擦洗掉的标记或不能撕去重贴的封条。 （三

9、）扦样的原则 1、了解种子批的基本情况；2、根据种子数量和种子批数量要求正确划分种子批；3、种子质量应均匀一致。4、扦样点应均匀分布；5、同一种子批中各个初次样品大小要基本相同； 6、由合格扦样员扦样。 二、仪器设备 （一）扦样器 1、袋装扦样器：单管扦样器、双管扦样器； 2、散装扦样器：双管扦样器、长柄短筒圆锥形扦样器、圆锥形扦样器、气吸式扦样器。 （二）分样器：横格式分样器和钟鼎式分样器。 三、扦样方法 （一）了解情况 （二）划分种子批 种子批的最大重量和样品的最小重量 作 物种子批最大重量（kg) 样品最小重量（g)送验样品 净度试样 其他植物种子数试样洋葱1000080880大豆250

10、0010005001000小麦2500010001201000玉米4000010009001000 （三）初次样品的取得 1、袋装种子 （1）扦样袋数种子批袋（容器）数 扦取的最低袋（容器）数1-56-1415-3031-4950-400401-560561以上至少扦5个初次样品不少于5袋每3袋至少扦1袋不少与10 袋每5袋至少扦1袋不少于80袋每7袋至少扦1袋 （2）扦样方法（略） 2、散装种子 （1）扦样点数种子批大小（kg）扦样点数50以下51-15001501-30003001-50005001-2000020001-2800028001-40000不少于3点不少于5点每300kg至少

11、扦1点不少于10点每500kg至少扦1点不少于40点每700kg至少扦1点 (2)扦样方法（略） （四）混合样品的取得 （五）送验样品的分取 （六）送验样品的包装、封缄和发送 四、样品的保存 1、检验前：在适宜条件下贮藏，使种子质量变化降低到最小程度； 2、检验后：在适宜条件下贮藏一个生长季。附录：种子批异质性测定 种子批异质性测定 1、目的：检验种子质量分布是否均匀，从而判断能否对其进行扦样。 2、测定程序 （1）确定怀疑指标 （2）按标准取样（不能混合，单独测定） （3）测定 （4）计算：H=V/W-1H值测定举例 举例：一批种子共10袋，怀疑其发芽率存在明显差异，按标准取10个样测定，分

12、别为90%，92 % ，91 % ，94 % ，98 % ，93 % ，96 % ，97 % ，99 % ，100 %，代入公式得 V=12.22 W=4.75 H=12.22/4.75-1=1.57 临界H值=1.41 说明该批种子发芽率确实存在明显差异，应拒绝扦样。第二节 种子净度分析 一、目的：测定样品中各成分的重量百分率和样品混合物的特性，椐此推测种子批的组成。 二、净种子、其他植物种子和杂质区分总则 （一）净种子：下列构造凡能明确辨别出它们是属于所分析的种（已变成菌核、黑穗病孢子团和线虫瘿除外），即使是未成熟的、瘦小的、皱缩的、带病的或发过芽的种子单位都应作为净种子。包括： 1、完整

13、的种子单位 2、大于原来大小一半的破损种子单位。 根据上述原则，在个别属或种中有一些例外： （1）豆科、十字花科，种皮完全脱落的列为杂质。 （2）即使带有胚中轴，并超过原来大小一半的种皮，豆科种子单位的分离子叶也为杂质。 （3）甜菜属复胚种子超过一定大小的种子单位为净种子。 （4）在燕麦属和高粱属中，附着的不育小花不须除去而列为净种子。 （二）其他植物种子：非本作物的完整种子单位和保留一半以上的破损种子单位。 （三）杂质：净度试样中除去净种子和植物种子后剩余的部分。 三、净度分析程序 (一）送验样品的称重与重型混杂物的检测 将明显大于供检种子的重型混杂物拣出并称重（m）并分为其他植物种子（m1

14、）和杂质（m2）。 (二）试样的分取和称重 1、试样的分取：从送验样品中用分样器分取试验样品1或2份，或规定重量一半的样品（半试样）2份。重复试样独立分取。 2、试样称重：称重保留小数位数要求如下：(半)试样或各成分重量(g)小数位数1.0000以下1.0009.99910.0099.99100.0999.91000以上43210 （三）试样的分析、分离与称重 按标准 将试样划分成净种子、其他植物种子和杂质。可借助筛子筛理。 甜菜属(单胚品种除外),用筛孔1.5mm*20mm,大小为200mm*300mm筛子筛理1分钟,留下的种球为净种子,筛下的为杂质。 分离后3种成分分别称重。 （四）结果计

15、算与表示 1、核查重量增失： （原重-和重）/原重*100% 5% 2、以和重为基数计算各成分的重量百分率（全试样计算时保留1位小数，半试样必须保留2位小数） 3、核查容许差距 分别计算三种成分两重复的平均数和差值，利用下表核查容许差距。两次分析结果平均 重复间的容许差距50%以上 50%以下 半试样 试 样无稃壳种子有稃壳种子无稃壳种子有稃壳种子98.7598.9998.5098.7498.2598.4998.0098.241.001.241.251.491.501.741.751.991.071.191.291.371.151.261.371.470.80.80.91.00.80.91.0

16、 1.0 如果实际差距超过容许差距时，按以下程序进行： （1）重新分析成对样品，直到一对数值在容许范围内（但分析不必超过4对） （2）凡一对间的差值超过容许差距2倍时，均略去不计 （3）各成分百分率的最后记录，应从全部保留的几对求加权平均数。 符合要求的三种成分百分率分别为：P1、OS1、I1。 4、含重型混杂物的结果计算： 数字取舍原则：4舍6入，5看后前，后有数字则进，后无有效数字时，5前为偶数则舍，5前为奇数则进（ 4舍6入，5 留双）。 如97.35001，21.450，0.55保留一位小数时分别为：97.4，21.4，0.6。 净种子： P2(%)=P1 (M-m)/M 其他植物种子

17、： OS2(%)=OS1 (M-m)/M+(m1/M) 100 杂质： I2(%)=I1 (M-m)/M+(m2/M) 100 (五）结果修约： P2+ OS2+ I2=100.0% （六）结果报告 各种成分保留一位小数， 如果某一成分结果小于0.05%，填报“微量”，结果为零，则填报“-0.0-”。 （七）其他植物种子数测定 1、意义：样品中其他植物种子含量用重量百分率表示不科学，如有的植物种子1g含上千粒有的只含数粒，二者的危害显然不同。 2、方法： （1）完全检验：指从供检样品中找出所有其他植物种子，并分种计数的方法； （2）有限检验：指从供检样品中找出指定种的方法； （3）简化检验：通

18、过对较少样品的检验，确定供检样品中其他植物种子数的方法。 举例：水稻种子净度分析:送验样品M=402.0g，从中捡出重型混杂物1.0000g，其中玉米.5000g(m1)，石块0.5000g(m2)。半试样原重,g净种子其他植物种子杂质和重重量差 %120.1519.530.2118 0.4082 20.150百分率96.921.052.03220.1219.510.2108 0.4101 20.130.049百分率96.871.052.09平均%96.901.052.06差值%0.050.000.06容许1.881.151.54 P1=96.90% OS1=1.05% I1=2.06 % P

19、2=96.90 (402.0-1.0000)/402.0=96.7% OS2=1.05 (402.0-1.0000)/402.0 +0.5000/402.0 100=1.2% I2=2.06 (402.0-1.0000)/402.0 +0.5000/402.0 100= 2.2% P2+ OS2+ I2=100.1% 则 P2= 96.7%0.1%=96.6%， OS2=1.2% I2= 2.2%第三节 发芽试验 一、目的：测定种子批的最大发芽潜力，据此比较种子批的 质量，并估测种子批的播种价值。 二、术语 1、发芽：发芽是指幼苗出现和生长达到一定阶段，幼苗主要构造表明在田间的适宜条件下能进一

20、步生长成良好的植株。 2、发芽率：在规定的条件和时间内长成的正常幼苗数占供检种子数的百分率。 3、幼苗主要构造：因种而异，由根系、幼苗中轴（上胚轴、下胚轴和中胚轴）、顶芽、子叶和芽鞘等组成。 4、正常幼苗：在适宜条件下具有继续发育成正常植株潜力的幼苗。包括完整幼苗、轻微缺陷幼苗和二次感染的幼苗。 5、不正常幼苗：在适宜条件下不能继续发育成正常植株的幼苗。包括损伤幼苗、畸形不匀称幼苗和腐烂幼苗。 三、种子萌发的生态条件 1、温度 2、水分和通气 3、光照双子叶幼苗 四、仪器设备与试剂 五、试验程序 1、数取试验样品：从充分混合的净种子中随机数取400粒种子，通常每个 重复100粒。 2、选用发芽

21、床并调节好水分： 3、置床： 4、贴标签： 5、培养： 6、试验管理：温度、水分、通气、发霉情况。 7、幼苗鉴定： 8、重新试验： （1）当怀疑种子有休眠时 （2）由于微生物蔓延导致结果不可靠时 （3）正确鉴定幼苗有困难时 （4）发现试验条件、幼苗鉴定或计算有错时 （5）重复间差距超过容许差距时 9、结果计算和表示：各个成分之和为100，平均数修约到最近似的整数。 10、结果报告 将各成分百分率分别填入报告单相应栏中，如某一项为零，则填报“-0-”。 同一试验四次重复间的最大容许差距 平均发芽率最大容许差距50%以上50%以下9998979695939491928990878884868183

22、78802345678910111213141517182021235678910111213141516 两次测定结果的容许差距平均发芽率最大容许差距50%以上50%以下9899959791948590778460765159234671011161724254146502345678第四节 品种真实性和纯度鉴定 一、意义 二、术语 1、真实性：种子批（样品）与其品种名称是否相符。 2、品种纯度：品种与其名称相符的程度(一个品种群体在特征特性方面典型一致的程度，用供检样品中本品种的数量所占百分率表示）。 三、鉴定方法 （一）种子形态鉴定 1、依据：种子形态特征的差异（大小、形状、颜色、表面附

23、属物的特征等） 2、特点： （1）简便、快速、成本低廉 （2）适用范围有限 3、方法：随机数取100*4粒种子，根据形态特征的差异（如豆科种脐颜色、形状；玉米直感现象的）进行鉴定。 母本（黄顶）父本（白顶） 杂交种（白顶） （二）快速鉴定 1、苯酚染色法 （1）原理： 无色的苯酚在酚酶的作用下生成黑色的醌，而使种皮中含有酚酶的种子染色。种皮是否发生颜色变化，颜色的深浅则取决于种皮是否含有酚酶以及酶的数量多少。 （2）适应范围：小麦、大麦、燕麦、水稻种子 （3）方法：略小麦种子苯酚染色图谱 （4）注意事项： 种子染色会随着时间而加深，超过一定时间会使品种间的差异缩小，因此鉴定要掌握好时机 对本地

24、区的各个品种染色情况要事先掌握。2、大豆种皮愈伤木酚染色法 3、荧光测定法： （三）幼苗鉴定 一种方法是在温室或培养箱中提供幼苗生长的适宜条件，待幼苗长到一定大小时根据幼苗特征的差异区分品种，进行鉴定；另一种方法是使幼苗在逆境条件下生长，根据幼苗的抗性差异进行鉴定。1.利用幼苗芽鞘颜色等鉴定真假杂种rr(绿芽鞘，)RR(红芽鞘，) Rr(红芽鞘) 杂交种子 rr(绿芽鞘，) rr(绿芽鞘， ) rr(绿芽鞘) 自交种子 禾谷类种子幼苗芽鞘法鉴定纯度原理 2.根据子叶与第一片真叶形态鉴定十字花科品种 3.根据第一片真叶叶缘特性鉴定西瓜纯度 （四）田间小区种植鉴定 1、特点：准确性高、适应范围广。

25、 2、方法：种植株数根据标准计算得到 若标准为（N-1)/N 100%,则种植4N即可。如标准规定纯度为98%，则N为50，种植200株即可。 要求：单粒点播，土壤肥力、田间管理一致。 （五）纯度鉴定的新技术 1、电泳鉴定 （1）概述： （2）原理 （3）鉴定电泳谱带 三交种与改良单交种电泳谱带示意图 F1 F1 2、DNA分子标记鉴定 （1）原理 （2）鉴定第五节 种子水分测定 一、水分测定的意义 二、测定程序 （一）低恒温烘干法 1、适用种类：葱属、花生、芸薹属、辣椒属、大豆、棉属、向日葵、亚麻、萝卜、蓖麻、芝麻、茄子。 该法必须在相对湿度70%以下的室内进行。 2、取样磨碎： 样品应充分

26、混合，并从中取出1525克。烘干前必须磨碎的种子及磨碎细度要求如下：作物种类磨碎细度燕麦属、水稻、甜荞、苦荞、黑麦、高粱属、小麦属、玉米至少50%磨碎成分通过0.5mm筛孔的金属丝筛，而留在1.0mm筛面上的不超过10%。大豆、菜豆属、豌豆、西瓜、巢菜需要粗磨，至少50%磨碎成分通过4.0mm筛孔。棉属、花生、蓖麻磨碎或切成薄片。 试样需设2次重复，样品在样品盒内的分布不超过0.3g/cm2 取样时勿用手接触样品。 、烘干称重：用干燥的样品盒个，各取样品.55.0g，精确称重（精确至0.001g）。放入预先预热的烘干箱中，待箱温达到 时计时，烘干小时。取出后放在干燥器中冷却至室温，称重。 （二

27、）高恒温烘干法 、适用种类： 、程序： ，烘干小时。 其他与低恒温烘干法相同。 （三）高水分种子二次烘干法 需要磨碎的种子，禾谷类种子水分超过，油料和豆类种子超过，必须预烘干。 称取克种子在 烘干半小时（油料种子 烘干小时），取出冷却称重，然后再用（一）或（二）法测定。 （四）计算： 水分（）（样品烘前重-烘后重）样品重 若为二次烘干，则：种子水分（）S1+S2-S1 S2/100 S1_为第一次烘干的水分（），_ S2为第二次烘干的水分（）。_ 容许差距：二次重复间水分差不得超过.2%。 （五）结果报告 结果填报在报告单的规定空格内，精确度为.1%。 关于水分速测仪关于水分速测仪第六节其他项目的测定 一、种子生活力测定 、概念：种子潜在的萌发能力。 、意义： 、方法（四唑染色法）： （）原理：TTC+H+(无色） TTCH（红色） （）方法：取样样品预措种子预湿种子处理染色鉴定计算分析结果填报小麦种子生活力鉴定标准图谱大豆种子生活力鉴定标准图谱 二、种子健康度检验 （一）病害检验（略） （二