猪圆环病毒的综合防治

1、猪圆环病毒的综合防治一、病原猪圆环病毒（Porcinecircovirus,PCV）在分类上属圆环病毒科、圆环病毒属。本病毒是动物病毒中最小的一种病毒，病毒粒子呈20面体对称结构，大小约426.5nm，平均直径17nm,无囊膜，含有共价闭合的单股环状负链DNA，基因组大小约为1.76kb。该病毒可在猪源细胞上复制，但CPE不明显，病毒沉降系数为52 S，CsCl浮密度 137gcm3。PCV对外界理化因子的抵抗力相当强，72的高温环境中也能存活一段时间，56 不能将其灭活，即便在PH3的酸性环境及氯仿中可存活较长时间。该病毒无囊膜，因此对氯仿等有机溶剂不敏感。PCV 不凝集牛、羊、猪、鸡等多种

2、动物和人的红细胞，其抗血清不能抑制猪细小病毒(PPV)对红细胞的凝集性。根据PCV的致病性、抗原性及核苷酸序列的差异，可将其分为PCVl和PCV2两种血清型。PCVl首先由Tischer（1974）从长期持续污染的猪肾传代细胞系pk15中分离获得，实验证实PCVl并无致病性，广泛存在于猪体内及猪源传代细胞系。而PCV2则是自1996年以来新发现的一种与PMWS密切相关的病毒，人工感染的结果也已表明它是PMWS的病原。在临床上主要表现为断奶后仔猪多系统衰弱综合症( PostweaningMultisystemic WastingSyndrome PMWS)和猪皮炎与肾炎综合征(PDNS)。二、流

3、行病学本病最早发现于加拿大（1991），很快在欧美及亚洲一些国家包括我国发生和流行,除PMWS外，PDNS（猪皮炎与肾病综合征）、PNP（增生性坏死性肺炎）、PRDC（猪呼吸道疾病综合征）、繁殖障碍、先天性颤抖、肠炎等疾病亦与PCV2感染有重要关联。PCV2及其相关的猪病，死亡率10%30%不等，较严重的猪场在暴发本病时死淘率高达40%，给养猪业造成严重的经济损失。现已被世界各国的兽医与养猪业者公认为是继猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）之后新发现的引起猪免疫障碍的重要传染病，与PRRSV有协同性。2008年第20届国际猪病大会上，人们已将PCVD列为当前危害养猪业发展的头号疾病。相关PCVD流行

4、病学调查显示，加拿大猪群阳性率达832，美国阳性率约80，欧洲部分国家阳性率也在75以上。世界范围内PCV2分离株的序列分析表明，毒株间同源性大于96，但毒力差异显著，PCV2毒株变异、毒力增强与当前该病流行的相关性已是各国学者的重要议题。Tischer等报道,在人、牛和鼠血清中也存在能与PCV 发生群特异性结合的低水平抗体，用ELISA证实人血清有30%、小鼠血清12%69%、牛血清35%抗体阳性。PCV主要易感动物是猪,各种年龄、不同性别的猪都可以感染PCV，但它们的临床症状不尽相同，常见的PMWS主要发生在哺乳期和育成期的仔猪。病猪和带毒猪是本病主要的传染源。该病毒可以通过水平传播和垂直

5、传播感染猪群，病猪或带毒猪可以通过分泌物、粪便将病毒排到体外而污染饲料、水和周围的环境，造成病毒在猪群中的蔓延和扩散。在疫病感染流行过程中发病率和死亡率都较低，急性发病猪群中的死亡率可达10% ，在感染的猪群中常常由于并发或继发其它细菌或病毒感染而死亡率大大增加。PCV 可经口、呼吸道感染不同日龄的猪；少数怀孕母猪感染PCV 后,可经胎盘垂直感染仔猪；感染的猪可通过鼻液、粪便等排出病毒，因此PCV 分布十分广泛。PMWS可见于516周龄的猪, 但最常见于68 周龄。猪群发病率为3% 50% ,病死率为8% 35% 。本病发展缓慢,猪群一次发病可持续1218个月。我国学者王永康在上海郊区观察发现

6、,猪皮炎肾病综合征（PDNS）的发病率可达11% ,病死率达到40% 。此外,本病常与集约化生产方式有关,饲养管理不善、环境恶劣、饲养密度过大、应激、不同年龄和不同来源的猪混群等,均可诱发本病。Larcochelle等报道,PCV2 可间歇性地自公猪精液中排出,感染公猪的精液可看作一种潜在的PCV2 病毒来源。Kiupel等报道,被PCV2 感染的小鼠能否排毒尚不清楚,但小鼠的先天性及出生后的感染现象说明,可能由于野生小鼠作为PCV2的宿主或传媒的潜在危险及鼠群中感染的流行。1.我国个地区PCV-2感染状况目前除个别地区外，我国绝大部分省、市、自治区均有PCV2感染的相关报道。统计分析2002

7、-2007年我国关于PCVD流行病学的调查报告(包括病原学和血清学)，结果发现猪场阳性率为5875(7791 326)，猪群阳性率为3847(14 48737 657)。各地区猪群感染情况有所不同(图1)，其中安徽1481(48324)、厂东2240(7573 380)、吉林2500(25100)、海南2865(365/1 274)、福建3045(1 1563 796)、山东3127(5261 682)、陕西3492(249/713)、辽宁3533(106300)、江苏3715(175/471)、湖北3725(1 2823 442)、贵州3727(755/2 026)、广西3833(24864

8、7)、云南3839(754/1 964)、内蒙古3956(72182)、四川4104(165/402)、河南4234(1 5263 604)、上海4625(9632 082)、湖南4641(71153)、黑龙江4718(134284)、甘肃4829(1 525/3 158)、青海4961(378/762)、北京5358(1 004/1 874)、浙江5379(9301 729)、河北6376(454/712)、其它地区平均3155(819/2 596)。以上结果表明，PCV2感染在我国各地已广泛存在，猪群感染率高，阳性猪场多。2.不同生长阶段猪感染状况猪是PCV2的天然宿主，各种年龄、不同性别

9、的猪只均可感染。统计分析我国猪群不同生长阶段PCV2感染的情况发现，哺乳仔猪阳性率最低为435(27621)，保育猪4028(2 6596 602)，肥育猪4185(642/1 534)，后备猪3109(443/1 425)，公猪和母猪的阳性率最高，分别为53,04(96181)和5012(3 6497 280)。2008年第20届国际猪病大会上，Cunningham等对加拿大的PCV2感染情况进行了报道，结果发现猪群平均阳性率为832，其中种猪群阳性率最高，公猪群和母猪群均在98以上。三、致病机理Rosell等从慢性经过死亡的2个病例的病理变化发现，PCV 从猪的鼻、口腔侵入体内，在扁桃体局

10、部淋巴结增殖后，向其它淋巴组织肺、肝、肾传播，受慢性感染的影响，诱发免疫抑制、肠炎、间质性肾炎及肝损伤。在病猪鼻黏膜、支气管、肺脏、扁桃体、肾脏、脾脏和小肠中有PCV粒子存在。胸腺、脾、肠系膜、支气管等处的淋巴组织中均有该病毒，其中肺脏及淋巴结中检出率较高。表明PCV严重侵害猪的免疫系统：病毒与巨噬细胞/单核细胞、组织细胞和胸腺巨噬细胞相伴随，导致患猪体况下降，形成免疫抑制。由于免疫抑制而导致免疫缺陷，其临床表现为：对低致病性或减弱疫苗的微生物可以引发疾病；重复发病对治疗无应答性；对疫苗接种没有充分免疫应答；在一窝猪中有一头以上发生无法解释的出生期发病和死亡；猪群中同时有多种疾病综合征发生。这

11、些特征在PMWS的猪群中基本上都有不同程度的发生。淋巴细胞缺失和淋巴组织的巨噬细胞浸润，是PMWS病猪的独特性病理损害和基本特征。而且此特征与血液循环中B及T细胞减少和淋巴器官中这类细胞的减少呈高度相关；与周围血液和淋巴组织中巨噬细胞/单核细胞谱系细胞的增加呈高度相关。另外已证实淋巴组织、相关免疫细胞和血液中的细胞存在大量的PCV2抗原。PCV-1 和PCV-2 均可在PK-15 细胞上增殖而不引起PK-15 细胞产生细胞病变。感染PCV 的PK-15 细胞的细胞质和细胞核中有包涵体，一些包涵体中含有病毒粒子，其中形态较小的胞浆内包涵体可能是病毒装配成熟的场所。据资料表明，Rosell等发现含

12、包涵体的细胞多见于淋巴器官，如支气管、淋巴结、肺脏和扁桃体中均有PCV 粒子存在的证明，PCV 复制的靶细胞包括单核细胞/巨噬细胞系、抗原递呈细胞(APC)、上皮细胞(肾小管上皮细胞和支气管上皮细胞)、内皮细胞、肝实质细胞和淋巴细胞。据报道,Segales等利用流式细胞计数器分析感染猪外周血液中白细胞变化，发现单核细胞增加，T 淋巴细胞(主要是CD4+)和B 淋巴细胞减少，不成熟粒细胞的密度偏低。以上表明，PCV 引起了淋巴细胞凋亡，APC 递呈抗原能力的减弱，同时降低了B 淋巴细胞和CD4+T 细胞的机能。因此使患猪处于免疫抑制状态，导致患猪抵抗力下降。四、猪圆环病毒PCV-2导致的疾病类型

13、和临床症状4.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）主要发生在512周龄的仔猪，本病的主要临床症状为食欲减少或废绝，被毛粗糙，发育迟缓，猪只进行性消瘦，呼吸过速或呼吸困难，嗜睡、腹泻、贫血。有时出现皮肤苍白或黄疸，咳嗽和中枢神经系统紊乱，突然死亡。体表淋巴结，特别是腹股沟淋巴结肿大。由于在临床上经常与PRRSV、PRV等混合感染。从而使本病的临床症状更加复杂化。本病发病缓慢，猪群一次发病可持续12l8个月（刘元林，2000），抗生素治疗无效或疗效不佳。4.2 猪呼吸病综合征（PRDC）本病在多数情况下，被视为PMWS的孪生病，系PRRSV或PRV和PCV-2混合感染，致使在免疫抑制状态下，发

14、生多病原混合感染和后续感染出现的综合征，特别是多种细菌性疾病的混和感染。临床症状主要表现为咳嗽和呼吸困难，有时部分猪有全身潮红的败血症状和因微循环障碍导致的耳尖、尾端及股、前肢液下皮肤瘀血、出血，出现瘀血斑点。4.3 猪皮炎与肾病综合征（PDNS）病猪主要表现为后躯、后肢和腹部皮肤发生圆形或不规则隆起，周边红色或紫色，中央黑色，以后融合成条带状或斑块，有时可扩展到胸肋或耳部，病轻者体温正常，常自行康复，严重者表现跛行、发热、厌食和体重减轻等症状。该病以皮肤损伤和纤维蛋白坏死性肾小球肾炎为主要特征。常在1214周龄猪群中零星出现或爆发，猪群发病可持续l224个月。最常见的临床症状为皮肤发生圆形或

15、不规则形的隆起。呈现周边为红色或紫色中央为黑色的病灶。病灶直径一般为2cm,个别病灶常融合成条带和斑块。一般最早常在后驱、后肢和腹部出现。然后慢慢可扩展到胸肋、耳等部位。发病温和的猪体温正常，行为无有异常，常自动康复。发病严重的猪体温升高。食欲下降。体重减轻。哺乳仔猪发病时有的还伴有腹泻、贫血和黄疸症状。最后可衰竭死亡。4.4 PCV-2与母猪繁殖障碍该病近年来在我国也时有发生，通常是由多种病原混和感染引起。发病对象以初产母猪为多，主要表现为流产、死胎、弱仔、滞产、发情期延长、不育等。个别严重的初产母猪死产、流产发病率高达60%左右。4.5 初生仔猪先天性震颤本病多发生于初产母猪所产的仔猪，发

16、病率在1%3%,也有高达l0%左右。一般在生后第一周发病，震颤为双侧，影响骨骼和肌肉发育，当卧下或睡觉时震颤消失。外界刺激（如声音、温度等）可引发或加重震颤，有的在整个生长发育期间都不断发生震颤。影响仔猪的正常生长。严重的震颤可因不能吃奶而死亡。五、病理变化剖检可见全身淋巴结肿大，特别是腹股沟淋巴结、纵隔淋巴结、肺门淋巴结、肠系膜淋巴结及颔下淋巴结肿大切面硬度增大，可见均匀的白色；有的淋巴结有出血和化脓性病变。肺脏肿胀、坚硬或似橡皮（上图），严重的肺泡有出血斑；有的肺尖叶和心叶萎缩或实质性病变，肝脏发暗，萎缩，肝小叶间结缔组织增生（下图）；脾脏异常肿大，呈肉样变化；肾脏水肿，呈灰白色，被膜下有

17、时有白色坏死灶；胃的食管部粘膜水肿和非出血性溃疡，回肠和结肠段肠壁变薄，盲肠和结肠黏膜充血和出血。5.1剖检病变本病主要的病理变化为患猪消瘦，贫血，皮肤苍白，黄疸（疑似PMWS的猪有20%出现）；淋巴结异常肿胀，内脏和外周淋巴结肿大到正常体积的34倍，切面为均匀的白色；肺部有灰褐色炎症和肿胀，呈弥漫性病变，比重增加，坚硬似橡皮样；肝脏发暗，呈浅黄到橘黄色外观，萎缩，肝小叶间结缔组织增生；肾脏水肿（有的可达正常的5倍），苍白，被膜下有坏死灶；脾脏轻度肿大，质地如肉；胰、小肠和结肠也常有肿大及坏死病变。5.1.1 患断奶仔猪多系统衰竭综合征。（PMWS）的猪死亡后。一般病尸消瘦，皮肤轻度到中度苍白

18、，淋巴结肿大，切面发白，腹股沟、肠系膜、支气管等器官或组织的淋巴结病变尤为突出。肺质地坚实呈橡皮样，表面呈花斑状。灰棕色肺叶与正常的粉红色肺叶相问。有的病例肝表现呈花斑状，并有不同程度的萎缩，切面肉状、无充血、胆汁浓缩。肾肿大、苍白，肾被膜下呈现可见的白色病灶。盲肠和结肠粘膜充血或淤血。脾脏肿大，质地呈肉样变化。有报道发现有明显的脾萎缩现象。5.1.2 患猪皮炎与肾病综合征（PDNS）的猪。其特征性病理变化为全身性脉管炎和纤维蛋白坏死性肾小球肾炎。5.1.3 患猪呼吸病综合征（PRDC）的猪，剖检病理变化主要表现为大叶性肺炎、坏死性肺炎、胸膜肺炎、心包炎、浆膜炎、胸水和腹水增多等病理变化。5.

19、2组织学病变病变广泛分布于全身器官、组织，广泛性的病理损伤。肺有轻度多灶性或高度弥漫性间质性肺炎；肝脏有以肝细胞的单细胞坏死为特征的肝炎；肾脏有轻度至重度的多灶性间质性肾炎；心脏有多灶性心肌炎。在淋巴结、脾、扁桃体和胸腺常出现多样性肉芽肿炎症。PMWS病猪主要的病理组织学变化是淋巴细胞缺失。病理解剖变化因疾病类型不同而差异较大。六、诊断本病的诊断必须将流行病学、临床症状、病理变化和实验室的病原或抗体检测相结合才能得到可靠的结论。最可靠的方法为病毒分离与鉴定。6.1病理学检查此法在病猪死后极有诊断价值。当发现病死猪全身淋巴结肿大，肺退化不全或形成固化、致密病灶时，应怀疑本病。可见淋巴组织内淋巴细

20、胞减少，单核吞噬细胞类细胞浸润及形成多核巨细胞，若在这些细胞中发现嗜碱性或两性染色的细胞质内包涵体，则基本可以确诊。6.2血清学检查是生前诊断的一种有效手段。诊断本病的方法有：间接免疫荧光法（IIF），免疫过氧化物单层培养法，ELISA方法，聚合酶链式反应（PCR）方法，核酸探针杂交及原位杂交试验（ISH）等方法。6.2.1IIF方法宜检测细胞培养物中的PCV。用组织病料以盖玻片在PK-15细胞培养，丙酮固定，用兔抗PCV高免血清与细胞培养物中的PCV反应，可对PCV进行检测和分型。6.2.2ELISA诊断方法可用于检测血清中的病毒抗体。用细胞培养的病毒（PCV-2）作为抗原，用PCV2特异性

21、单克隆抗体作为竞争试剂建立竞争ELISA方法，竞争ELISA方法的检出率为99.58%，而间接免疫荧光法的检出率仅为97.14%。该方法可用于PCV2抗体的大规模监测。6.2.3PCR方法是一种快速、简便、特异的诊断方法。采用PCV2特异的或群特异的引物从病猪的组织、鼻腔分泌物和粪便进行基因扩增，根据扩增产物的限制酶切图谱和碱基序列，确认PCV感染，还有一种简单的复合PCR（multiplexPCR）法。6.2.4ISH方法此法可以检查PCV核酸。但不能区分PCV-1和PCV-2，具有群特异性，可以精确定位PCV在组织器官中的部位，可用于检测临诊病料和病理分析。6.3临床诊断要点（1）PMWS

22、主要发生在516周龄的猪，断奶前生长发育良好。（2）同窝或不同窝仔猪有呼吸道症状，腹泻、发育迟缓、体重减轻。有时出现皮肤苍白或黄疸。抗生素治疗无效或疗效不佳。（3）剖检淋巴结肿大，脾肿、肺膨大，间质变宽，表面散在大小不等的褐色突变区。其他脏器也可能有不同程度的病变和损伤。诊断：流行病学特点：公猪、后备母猪、经产母猪、空怀母猪、妊娠母猪、哺乳仔猪、断奶仔猪、大中小育肥猪等各种猪均可感染发病；多因诱发因子的作用发病，多具有相应的并发病的症状。最常见的诱发因子是断奶、免疫、运输、妊娠、气候骤变、断尾、打号、换料、转群等。临床症状特点：体表浅在性淋巴结高度肿大，特别是腹股沟淋巴结可肿大45倍；严重的呼

23、吸道症状，咳喘，腹泻，生长缓慢，皮肤苍白，黄疸；食欲减退甚至废绝，体温升高，使用抗菌药治疗无效。有时可见麻痹由后肢开始的渐进性神经症状。剖检病变特点：淋巴结：体表浅在性和内脏淋巴结高度肿大，肠系膜淋巴结肿大呈串珠状，腹股沟淋巴结肿大45倍；脾脏肿大；肺脏膨大、表面散在大小不一的褐色病灶；肾脏肿大、苍白、被膜下点状出血和坏死灶；脑组织充血出血；其他脏器也可见不同程度的病变。实验室诊断：病理学检查全身淋巴结肿大；肺脏退化不全或形成固化，致密性病灶；淋巴结组织内淋巴细胞减少。血清学检查：1）间接免疫荧光发（IIF）：检测细胞培养物中的PCV；2）ELISA法：检测血清中的PCV抗体，检出率99以上，

24、主要用于PCV抗体的大规模检测；3）聚合酶链式反应（PCR）法：简单、快速、特异的检测法；4）核酸探针杂交及原位杂交试验（ISH）：用于（PCV）在机体组织器官中的精确定位。七、防制本病无有效的治疗方法，加上患猪生产性能下降和高死亡率，使本病显得尤为重要。而且因为PCV-2的持续感染，使本病在经济上具有更大的破坏性。抗生素的应用和良好的管理有助于解决并发感染的问题。7.1加强饲养管理降低饲养密度、实行严格的全进全出制和混群制度、减少环境应激因素、控制并发感染、保证猪群具有稳定的免疫状态、加强猪场内部和外部的生物安全措施、购猪时保证猪来自清洁的猪场是预防控制本病、降低经济损失的有效措施。专利消毒

25、剂VirkonS在1250稀释消毒时能有效的杀灭圆环病毒，因此可将其应用于每批猪之间的终端消毒。7.2做好猪主要传染病的免疫工作PCV-2与其相关猪病的发生还需要另外的条件或共同因素才得诱发临床症状。目前世界各国控制本病的经验是对共同感染源作适当的主动免疫和被动免疫，所以做好猪场猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、气喘病和蓝耳病等疫苗的免疫接种，确保胎儿和吮乳期仔猪的安全是关键。因此根据不同的可能病原和不同的疫苗对母猪实施合理的免疫程序至关重要。7.3人工被动免疫疫情严重猪场可取猪圆环病毒病感染病猪含毒较多的脏器，如淋巴结、肺、脾等组织，捣碎研磨灭活后制成组织灭活苗，给全场的猪进行免疫注射，注射后1215 d可使新发病例减少，并使疫情逐渐平息。7.4自家疫苗的使用猪场一旦发生本病，可把发病猪的内脏加工成自家疫苗，据临床实践，效果不错。但现阶段有两种观点：一是母猪和断奶仔猪同时免疫，优点是免疫效果快，基本在12月内能控制本病；缺点是如果灭活不彻底，将使本病长期存在。二是只免疫断奶仔猪，优点是