糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因Slc4a1mRNA表达的影响

1、糖心康对糖尿病大鼠心肌构造基因Slc4a1mRNA表达的影响姜德友刘春红白玉宾柳成刚刘征姚丽周雪明王冬张琳【摘要】目的比力糖尿病性心肌病大鼠和中药复方糖心康治疗组大鼠心肌构造中基因表达的差异，并用Evegreen及时荧光RT-PR技能定量检测溶质载体家属4阴离子互换体成员Sl4a1RNA在各组大鼠心肌构造的表达程度。要领差异表达基因的挑选；荧光定量RT-PR的检测。效果糖尿病性心肌病模子组心肌构造基因Sl4a1RNA表达下调，中药复方糖心康治疗组心肌构造基因Sl4a1RNA表达上调。结论Sl4a1RNA在糖尿病状态下心肌构造也有表达，而且表达下调，而中药复方糖心康可使其上调，这也是中药复方糖心

2、康对糖尿病性心肌构造损伤具有庇护作用的机制之一。【关键词】糖心康糖尿病心肌损伤溶质载体家属4阴离子互换体成员糖尿病心肌损伤系糖尿病D常见慢性并发症之一，其病变可以是原发的，也可继发于冠状动脉供血停滞，且心肌病变出现较早，重要表示为心肌舒张和紧缩成效停滞，易产生充血性心力衰竭。其确切的病理机制尚未彻底分析，临床尚无殊效药物，而中医药在防治该病方面很有潜力，但因其病理机制庞大，其状态的形貌和中药复方多身分、多环节、多靶点的作用机制，又是传统单因素研究理论与要领难以办理的，为此借助分子生物学研究要领，接纳基因芯片技能，利用如今国际学术界公认的Affyetrix公司消费的Rat2302.0基因芯片，探

3、求糖尿病心肌病相干基因，探究糖尿病心肌病分子生物学机制,阐释中药复方糖心康治疗糖尿病心肌病的作用机理，对STZ诱导D大鼠的心脏基因表达谱举行了研究，并对挑选出的差异表达基因用Evegreen及时荧光RT-PR技能检测其在大鼠心脏构造中的含量及表达程度。本文仅陈诉糖心康对糖尿病心肌病大鼠心肌构造基因Sl4a1RNA表达的影响。1质料1.1试剂和药品链脲佐菌素STZ，ALBIHE，USA；糖心康为黑龙江中医药大学隶属第一病院制剂室制作；Rat2302.0基因芯片AFFYETRIX，USA。1.2动物造模及分组istar大鼠，雄性，体重200230g，除空缺比较组外，余者以25gkg-1STZ左下腹

4、腔注射，造模乐成后，再随机分为模子组和治疗组。各组均喂以高热量饲料。2要领与效果2.1给药要领治疗组以中药糖心康灌胃，空缺组及模子组以生理盐水灌胃。2.2标本网罗快速用180、12h处置惩罚过的手术铰剪摘取心脏，立即用预冷的生理盐水冲洗，冲洗后在冰上操纵，沿心室长轴切取心肌，置于液氮中冻存，以备提取RNA利用。2.3心肌构造差异表达基因的挑选散点图X轴为比较组信号值，Y轴为实行组信号值，图中赤色点为实行组和比较组该基因的Detetin均为P，蓝色为两组中有一个值不是P，而黄色点为两组均为A图14。根据比力严酷的条件挑选出差异表达基因，表达差异2倍以上的基因列表，包罗基因名称、GenBank号、

5、Uni号和染色体定位。此中，BE113640:slutearrierfaily4,aninexhanger,eber1，溶质载体家属4阴离子互换体成员1又称带3卵白，在糖尿病大鼠心肌构造表达下调，糖心康治疗组表达上调。2.4荧光定量RT-PR检测心肌构造Sl4a1RNA的表达接纳Evegreen法，senseprier:5/AGGAATGAGTGTTTT-3，length:22bp，T值:60.5；anti-senseprier:5-GATAAGGTGAGGATGAGG-3，length:22bp,T值:60.2；prdutlength:156bp，prdutT值:84.9。3讨论本研究以?金

6、匮要略?治疗消渴病理法及相干表达为引导，并结合临床履历，根据该病气阴两虚、血瘀错综庞大的病变性子，主张随病证宜多法联用，从而确定了益气养阴活血为该病的重要治法，研制中药复方糖心康，由太子参、黄芪、麦冬、玉竹、枸杞、丹参、土鳖虫等药构成。诸药相合，补而不滞腻，通而不伤正，滋而不助湿，温而不伤阴，共奏益气养阴、通络化瘀之效。溶质载体家属4阴离子互换体成员1与糖尿病的产生生长有着非常严密的干系，尤其是Sl4a1RNA在调治能量代谢在糖尿病的产生、生长中起着紧张作用。比年来对Sl4a1RNA在呼吸衰竭、血虚中的作用机制研究比力多，而中药复方对糖尿病状态下Sl4a1RNA调控研究未见专门报道。BE113

7、640:slutearrierfaily4,aninexhanger,eber1，溶质载体家属4阴离子互换体成员1Sl4a1，又称带3卵白，是一种红细胞嵌膜卵白，占总卵白的25%35，含有911个氨基酸，分子量约为95kD，在红细胞、淋巴细胞、肾、肝、脑和心等构造细胞中均有表达1，其基因家属成员所表达的端55kD为跨膜区，布局呈高度相似，重要生理成效是转运阴离子H3-，l-，S42-，HP42-等，此中最紧张的是介导H3-/l-互换，排H3使细胞酸化，胞内的氨基酸、多元醇、甲胺类等都是通过具有阴离子通道特性的卵白介导转移到胞外的。而N端40kD为胞浆区，其氨基酸序列差异很大，有锚卵白、带4.1

8、卵白、带4.2卵白、糖酵解酶类、过氧化氢酶和血红卵白的结合位点。带3卵白以同2，3二磷酸甘油酸2，3DPG相似的方法结合血红卵白。2，3DPG是红细胞无氧糖酵解的中心产物，对Hb的亲和力比对Hb2的亲和力要大的多，可以或许低落血红卵白对氧气的亲和力，使细胞向构造开释更多的氧。而带3卵白反向转运H3-/L-的成效，可以或许使血红卵白完成运载2的使命，保持血液pH正常。本实行前期效果亦表现，糖尿病状态下葡萄糖与Hb结合形成糖化血红卵白，使血糖向构造供氧本领落落2，氧化磷酸化停滞，ATP天生淘汰。带3卵白胞浆区ytplasidainfband3prtEin，DB3N端也是糖酵解酶的结合域。生理状态下

9、，带3卵白不但调治糖酵解历程，产生大量的ATP以满意机体能量代谢的必要，而且可以庇护酵解酶活性，免受胞浆卵白酶落解。而在糖尿病性心肌损伤状态下，大鼠心肌带3卵白含量显着淘汰，酵解酶失去庇护而落解，不克不及促进糖酵解的举行，使心肌能量天生不敷，ATP不敷可引起a2超载，使心肌紧缩性削弱，反响在心脏成效上为必要斲丧大量ATP的舒张期顺应性落落。同时心肌细胞内的钙离子过负荷，可导致左室压和舒张末期压升高，加重糖尿病性心肌病大鼠心肌损伤。本实行效果表白，糖尿病性心肌病时Sl4a1RNA呈低表达，而应用中药糖心康后，Sl4a1RNA表达上调，说明糖心康对Sl4a1RNA的表达具有调治作用，这也是中药复方糖心康对心肌损伤庇护作用机制之一。【参考文献】1FuGH,DUHQ,LiHT,etal.Expressinandharater