2022-2023学年新教材高中生物 第1章 发酵工程 第2节 微生物的培养技术及应用 二 微生物的选择培养和计数夯基提能作业 新人教版选择性必修3

1、 第1章 第2节 二一、选择题1土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种(B)A尿素酶B脲酶C蛋白酶D肽酶解析：土壤中的尿素分解菌体内能够产生一种脲酶，酶能够使土壤中的尿素分解为氨和水，植物才能利用土壤中的营养物质铵离子。2(2021吉林通化十四中高二期中)用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是(B)A未接种的选择培养基B接种了的牛肉膏蛋白胨培养基C未接种的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基解析：选择的目的是分离、筛选，对照实验遵循的原则是单一变量，要做对照实验就应该是选择作用与无选择作用对照，而有无选择作用取决于用来选择的物质，因此用接种了的普通培养基和选择培养基进行对

2、照，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目。故选B。3以下操作用到接种环的是(A)A平板划线操作B系列稀释操作C涂布平板操作D倒平板操作解析：常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，对于液体培养基中的微生物计数常需要进行系列梯度稀释。常用的接种工具主要有接种环、接种针、接种钩等。平板划线法需要接种环，A正确；系列稀释操作是用滴管和试管进行的，B错误；涂布平板法是用涂布器操作的，C错误；倒平板只需要培养基和培养皿，D错误。4若在固体培养基上用稀释涂布法培养细菌，看到的结果不可能是(D)解析：A、B、C选项的固体培养基上所形成的是一个个的单个菌落，是用稀释涂布法培

3、养细菌得到的结果，D选项的固体培养基上所形成的不是单菌落，是平板划线分离得到的结果。5某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)(B)A2.34108个B2.34109个C234个D23.4个解析：根据题意可以知道，每毫升样品中的菌落数平板上菌落数的平均值体积稀释倍数2340.11062.34109个，所以B选项是正确的。6用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比最可能是(B)A比实际值高B比实际值低C和实际值一致D比实际值可能高也可能低解析：用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目

4、时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，而样品稀释度无论多高都很难使其中的细菌都单个分布于培养基上，故计数结果比实际值低。7某种菌在30 的环境下，经过6周后会产生2种不同的酶，几乎可将PET塑料完全分解。下图是分离、纯化和保存菌株的过程，相关叙述正确的是(B)A塑料垃圾中含有大量微生物，是分离该菌株的首选样品B筛选培养基中需要加入PET塑料粉末，通过菌落特征挑出分解PET塑料的菌落C通过涂布平板法可以获得单菌落D斜面培养基中含有大量营养物质，可在常温下长期保存菌株解析：塑料垃圾中含有大量微生物，但不一定含有分解PET塑料的菌株，A项错误；筛选培养基中需要加PET塑料粉末，

5、通过菌落特征挑出分解PET塑料的菌落，从而获得分解PET塑料的菌株，B项正确；在涂布平板上长出的菌落，可以通过划线或稀释涂布平板法进一步纯化得到单个菌落，C项错误；斜面培养基中含有大量营养物质，可在低温下临时保存菌株，如果长期保存菌种应选择甘油管藏法，D项错误。8下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是(C)A在配制步骤的培养基时，应先调pH再进行高压蒸汽灭菌B步骤纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落C步骤采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D步骤挑取中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力解析：配制培养基时，

6、应先调pH再进行高压蒸汽灭菌，A项正确；步骤纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌通过稀释涂布平板法分散，获得单细胞菌落，B项正确；步骤筛选分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，C项错误；步骤挑取中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，D项正确。9(2020山东卷)野生型大肠杆菌可以在基本培养基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依赖型菌株需要在基本培养基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依赖型菌株M和苏氨酸依赖型菌株N单独接种在基本培养基上时，均不会产生菌落。某同学实验过程中发现，将M、N菌株混合培养一段时间，充分稀释后再涂布到基本培养基上，培养后出现许多由单个细菌形成的菌落，将

7、这些菌落分别接种到基本培养基上，培养后均有菌落出现。该同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是(B)A操作过程中出现杂菌污染BM、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸C混合培养过程中，菌株获得了对方的遗传物质D混合培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变解析：据题意可知，甲硫氨酸依赖型菌株M和苏氨酸依赖型菌株N单独培养时均不会在基本培养基上出现菌落，两者混合培养一段时间后，再接种在基本培养基中却出现菌落，除了操作过程中出现杂菌污染，杂菌在基本培养基上生长形成菌落的原因以外，还可能的原因是菌株获得了对方的遗传物质，或菌株中已突变的基因再次发生突变，使突变菌株能产生所需的氨基酸，而变成了非依赖型菌株

8、，从而能在基本培养基上生长形成菌落，A、C、D项正确；M、N菌株混合培养一段时间，稀释涂布到基本培养基上后，培养出现的菌落是由单个细菌形成的，菌落中不可能有M、N菌株同时存在而互为对方提供所缺失的氨基酸，故B项错误。10(不定项)下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中正确的是(ABD)A甲涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能涂菌液B甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的计数C乙中接种环需要灼烧5次D乙中连续划线的起点是上一次划线的末端解析：甲图中采用了稀释涂布平板法，涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液，A项正确；乙图平板划线法无法计数，B项正确；图乙为平板划线法

9、，平板中划了5个区域，因此操作过程中接种环需要灼烧6次，C项错误；乙图中每次划线的起点是上一次划线的末端，D项正确。11(不定项)下列关于微生物培养过程的操作的叙述，正确的是(AB)A稀释涂布平板法的工具使用前应进行灼烧灭菌B连续划线法和交叉划线法接种的微生物不适合计数C从土壤中分离尿素分解菌时应向培养基中加入刚果红指示剂D将菌种接种到试管的固体斜面上培养至出现菌落，再把试管放入4 的冰箱中保藏，这种方法保存的菌种纯净不易变异解析：稀释涂布平板法的工具是涂布器，使用前应灼烧灭菌，A项正确；连续划线法和交叉划线法接种的微生物不适合计数，适合计数的是稀释涂布平板法，B项正确；从土壤中分离尿素分解菌

10、时应向培养基中加入酚红指示剂，C项错误；将菌种接种到试管的固体斜面上培养至出现菌落，再把试管放入4的冰箱中保藏，这种方法保存的菌种易变异，D项错误。12(不定项)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，得到如下图所示的两个菌落，培养平板经稀碘液处理，出现了以菌落为中心的透明圈。相关叙述正确的是(CD)A培养基中的淀粉也可为微生物提供氮源B两个菌落中的微生物为同一种微生物C两个菌落中的微生物均能将淀粉酶分泌至细胞外D透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大解析：淀粉只含有C、H、O三种元素，因此培养基中的淀粉不能为微生物提供氮源，A项错误；两个菌落的周围均

11、有透明圈，说明两个菌落中的微生物都能分解淀粉，但不一定为同一种微生物，B项错误；两个菌落的周围均有透明圈，说明两个菌落中的微生物均能产生淀粉酶并将淀粉酶分泌至细胞外，C项正确；透明圈是由培养基中的淀粉被微生物产生的淀粉酶分解后而产生的，因此透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越大，D项正确。二、非选择题13(2021重庆质量调研抽测)果胶是一类广泛存在于植物细胞壁，以聚半乳糖醛酸为主的杂多糖，大量存在于柑橘、柠檬、柚子等果皮中。果胶酶是应用于果酒生产的重要酶制剂之一，它广泛存在于细菌、酵母菌等多种微生物细胞中。研究者欲筛选出能大量产生果胶酶的细菌并对其进行计数。回答下列问

12、题。(1)配制培养基时，培养基通常应该含有水、_碳源_、氮源和无机盐等物质。实验室通常用_高压蒸汽灭菌_法对培养基进行灭菌。(2)可从腐烂的柑橘、柠檬、柚子等果皮中进行取样，其原因是这些腐烂的果皮中含有_果胶分解菌_。(3)下表是某同学配制的果胶分解菌的培养基配方(将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL)。从培养基的物理性质看，该培养基属于_液体_培养基。这个培养基对果胶分解菌_不具有_(填“具有”或“不具有”)选择作用，原因是_培养基中含有葡萄糖，聚半乳糖醛酸(果胶)不是唯一碳源_。成分葡萄糖聚半乳糖醛酸NaNO3Na2HPO47H2OKClMgSO47H2O酵母膏水解酪素含量(g

13、)5511.20.50.50.50.5(4)对选择培养的菌液进行一系列梯度稀释，然后采用_涂布平板_法接种在培养基上进行单菌落分离并计数，推测出菌液样品中活菌数目。解析：(1)培养基通常含有水、碳源、氮源、无机盐等物质，对培养基一般采用高湿热灭菌中的高压蒸汽灭菌。(2)果皮中大量微生物繁殖说明微生物产生果胶酶分解果皮。(3)题干中用蒸馏水定容到1 000 mL表明该为液体培养基，该培养基中含有葡萄糖，聚半乳糖醛酸不是唯一碳源。(4)对培养液进行一系列梯度稀释，采用涂布平板法进行分离和计数，可推测出菌液中活菌的数目。14(2021湖南衡阳一中高二下月考)微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物

14、能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自_长期被石油污染(或含石油多)_的土壤。(2)为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用_选择_培养基，此培养基中添加_石油_作为微生物生长的唯一碳源。培养基灭菌采用的最适方法是_高压蒸汽灭菌_法。常用的接种方法是_平板划线法_和_稀释涂布平板法_。(3)接种后需密封培养，由此推测该类微生物的代谢类型是_异养厌氧型_，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取_降油圈大的菌落_就可获

15、得高效菌株。解析：(1)该类微生物能降解石油，则该类微生物只能存在于被石油污染或者浸泡的土壤中。所以该类微生物应取自长期被石油污染(或含石油多)的土壤。(2)从功能上分，筛选和纯化降解石油的微生物的培养基属于选择培养基，此培养基中应添加石油作为微生物生长的唯一碳源。培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。微生物的实验室培养中，最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。(3)该类微生物需密封培养，说明该类微生物的细胞呼吸不需要氧气，其呼吸类型是无氧呼吸；该生物以石油为碳源，为异养生物，故其代谢类型为异养厌氧型。培养一段时间后在培养基上形成降油圈，降油圈越大，说明该类微生物分解石油的能力越强

16、，所以选取降油圈大的菌落就可获得高效菌株。15(2020辽宁沈阳东北育才中学高三下模考)某校生物研究性学习小组的同学欲调查某冷饮店的冰块中大肠杆菌的含量，具体实验步骤如下：第一步：配制培养基(成分：蛋白胨、氯化钠、乳糖、蒸馏水、X和Y)；第二步：制作无菌平板；第三步：设置空白对照组和实验组，对照组接种，实验组接种。第四步：将各组平板置于37 恒温箱中培养一段时间后，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：(1)培养基中的乳糖可以为大肠杆菌提供_碳源_。为了方便大肠杆菌的鉴定，需要在培养基中添加成分X_伊红美蓝(或伊红亚甲蓝、深紫色)_，在该培养基表面，大肠杆菌的菌落呈现_黑色_(填颜色)。为了完成第二步，该培养基中的成分Y通常是_琼脂_。(2)完善第三步，是_适量无菌水_，是_等量冰块水_。(3)若该小组在空白对照组的平板上检测到少许菌落，请分析可能的原因：_培养基灭菌不合格或倒平板(或接种)过程中被污染_。(4)将1 mL冰块水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接种0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为_3.8107_