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文档简介

第三节 细胞因子的检测技术一、 生物学检测技术 依赖细胞株测定法 二、 免疫学检测技术 ELISA法三、分子生物学检测技术 分子杂交、PCR 等检测mRNA 1生物学检测 依赖细胞株测定法PBMC + PHA 培养 取上清液 + CTLL-2细胞 培养 + MTT 培养 测OD570值 2第四节 免疫学常用的分子生物学技术一.免疫印迹试验(immunoblotting, Western blotting)(1)电泳：抗原(如蛋白质)在SDS-聚丙烯酰胺凝胶内电泳，各组分按分子量大小分开。(2)转印：将电泳后的蛋白质转移至硝基纤维膜上。(3)鉴定：用酶标记或同位素标记的抗体确定抗原的位置，并可得知其分子量的范围。 34二、免疫PCR (immuno-polymerase chain reaction)原理： 抗原包被 + 抗体 + 亲和素-SPA融合蛋白 + 生物素-DNA片段 PCR扩增 测定扩增产物应用： 同一样品中多种抗原的分析与鉴定。56

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