阿司匹林含量测定综述

1、阿司匹林原料药及制剂的含量测定方法摘要：本文对阿司匹林原料药及制剂常见的含量测定方法的原理、步骤、计算公式以及 各方法的优缺点进行了介绍和综述。关键词：阿司匹林；原料药 ；制齐J;含量检测.前言：性，利用酸碱反应反应测定其含量。原理：COOHCOONa- NaOH _aOCSH测定方法：取本品约0.4g ,精密称定，加中性乙醇（对酚丈指示液显中性）20mL溶解后，加酚吹指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）滴定。每1mL的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）相当于 18.02mg 的 GHO计算公式：NaOHW定度T=0.1阿司匹林，化学名为 2-（乙酰氧基） 苯甲酸，作为解热镇痛

2、抗炎药临床上 用于治疗感冒发烧，牙痛、肌肉痛及神 经痛等慢性疼痛，急、慢性风湿病及 类风湿病等，还是各种心血管疾病的 预防、治疗药物。另外，在近年的流 行病学研究结果显示，阿司匹林与许 多疾病的有相关性，因此阿司匹林在 历经百余年的使用仍焕发出新的活力。 为了避免阿司匹林的胃肠道副作用，随着现代药学技术的发展，目前已有 片剂、肠溶剂、泡腾片、栓剂和散剂 等多种剂型，测定方法也各不相同。 由于阿司匹林的药效受剂量影响较大， 因此方便而准确的含量测定方法是阿 司匹林的临床研究及应用有着至关重 要的因素。因此，本文试图对其作一 综述。.阿司匹林原料药的含量检测方法酸碱滴定法直接滴定法阿司匹林结构中具

3、有竣基，显酸X 180.16 X （1/1）=18.02 （mg/ml）F=M（实际）/M（规定）含量（ = （VX TX F） /WX 100%（V为滴定液体积（ml）; T为氢 氧化钠的滴定度，W为供试品称样量（g）; F为滴定液浓度校正因子（F= 滴定液实际浓度/滴定液规定浓度）讨论：本法专属性较差，易受 阿司匹林的水解及其产物、有机酸类 稳定剂的干扰，使用时应注意规范操 作，避免水解引起的偏差。水解后剩余量滴定法阿司匹林酯结构在碱性溶液中易 于水解的特性，直接滴定易引起偏差， 则加入定量过量的氢氧化钠滴定液， 加热使酯键水解后，再用硫酸滴定液 回滴定剩余的氢氧化钠滴定液。原理：网1r

4、/y加欣二 cum岫M .恸T N副I岫测定方法：取本品1.5g,精密称定，加氢氧 化钠滴定液(0.5mol/L ) 50.0ml ,混 合，缓缓煮沸10min,放冷，加酚吹指 示液，用硫酸滴定液(0.25mol/L )滴 定，并将滴定结果用空白试验校正。计算公式：从上述反应式可知：阿司匹林与硫酸的摩尔比为1:1硫酸的 T=0.25 X ( 1/1 ) X 180.16=45.04(mg/ml)含量( =(V0-V) XFXT/ W100%(V0为空白试验消耗硫酸滴定液 的体积(ml); V为样品测定时消耗硫 酸滴定液的体积(ml); W为阿司匹林 样品的称取量(g);F为硫酸的浓度校 正因数

5、；T为硫酸溶液的滴定度)讨论：消除了酸性杂质和酯键水解的干扰毛细管电泳法原理：刘海兴等建立了毛细管 电泳测定阿司匹林中乙酰水杨酸含量 的新方法。确定的优化缓冲溶液是 30 mmoJ/L硼砂溶液，pH为9. 02。电泳 电压为320kV,紫外检测波长为214nm 在此条件下水杨酸和乙酰水杨酸分离 度较好，并测得了阿司匹林中乙酰水 杨酸的含量。【2】测定方法：依次用0.1 mol/L HCl、重蒸储水、1 mol/L NaOH、重蒸 储水各冲洗5分钟，然后用缓冲溶液冲 洗5分钟。每两次运行之间，毛细管仅 用缓冲溶液冲洗5分钟。三次运行之 后，毛细管需用上面的方法再清洗一 回。运行电压为20 kV,

6、紫外检测波长 为214 nm,实验温度是20C ,重力进样 时间为5 s(12 cm高度差)。配制一系 列乙酰水杨酸标准溶液。在 30 mmol/ L硼砂溶液(pH=9.02)条件下运行各个 溶液。每种溶液分别运行三次，取平均 值。以谱图中峰面积为纵坐标，浓度为 横坐标，绘制标准曲线。得到的线性回 归方程。再配制样品，根据标准曲线 得到样品浓度。计算公式：原阿司匹林样品溶 液的浓度=CX f(C为阿司匹林样品稀释溶液的浓度(g/L ) ； f为稀释倍数)讨论：毛细管电泳以其高效、 快速、微量的优势，在药物分析中得到 了广泛应用，本法具有简便、快速、 准确特点。反相高效液相色谱法原理：李琳丽等建

7、立了一种适 用于阿司匹林稳定性及其降解动力学 研究含量测定的反相高效液相色谱法。 选用 ShimadzuODSft(250mnX 4.6mm 5m),以乙月青为溶剂，流动相为甲醇一 水一冰醋酸(40 : 60: 6,盐酸调节pH 为2.5),检测波长280nm柱温40 C, 流速为1.0mL/min ,采用导数色谱法鉴 定了色谱峰纯度。结果显示在选定色 谱条件下，阿司匹林能与相邻杂质完 全分离。阿司匹林在 601800仙g/mL 范围内，峰面积与浓度线性关系良好 (r=0.9998);平均回收率为 100.6%, RSM 1.3%,重复性试验RSM 0.9 % (n=5)。高、中、低3个浓度的

8、精密度 试验RSD匀小于1.4 %(n=5)。测定方法：精密称取样品150mg 置50mL*瓶中，加意境适量溶解并稀 释至刻度；精密称取10mL置25mL 瓶中，用乙月青稀释至刻度，摇匀，作 为供试品溶液，取15仙L注入液相色 谱仪，记录峰面积。制备对照品溶液(含阿司匹林1200Ng/mL) 15仙L,同 法测定，按外标法计算阿司匹林含量。计算公式：原阿司匹林样品溶 液的浓度=CX f(C为阿司匹林样品稀释溶液的 浓度(g/L ) ； f为稀释倍数)讨论：该方法快速简便，结果 准确可靠，可作为阿司匹林稳定性及 降解动力学研究的含量测定方法。可见分光光度法原理：朱柳腾等研究了用分光 光度法快速、

9、准确测定阿司匹林(ASP) 中水杨酸(SA)含量的方法。以 FeCl3 为显色剂，通过测含杂质的阿司匹林 溶液的吸光度来测定其中 SA含量，考 虑了 pH、温度、反应时间、显色剂用 量等因素对络合物生成量及稳定性的 影响，确定了最适宜的测定条件，并绘 制了标准工作曲线.结果表明，在pH值 =3 的 CH3COOH-CH3COONa溶液中， Fe3+与SA生成较稳定的络合物，络合 比为1:1,常温下10min即可络合完全， 该络合物的最大吸收波长为512nm该 定量方法测量误差在2.5%以内。测定方法：确量取不同体积的 标准水杨酸(SA)溶液(0.01mol/L)与3. 00mL Fe3+(0.

10、01mol/L)标准溶液于 50 mL容量瓶中，用pH值=3的缓冲液定容 配制成不同浓度的SA-Fe3+ 容液。以F e3+空白溶液作为参比液，分别测定每组溶液吸光度，绘制吸光度随水杨酸 浓度变化的标准曲线。当SA浓度在0 70仙g/mL即所取SA标准液体积在0 2.5mL之间时，吸光度与浓度呈良好的 线性相关。对该曲线线性拟合，得线性 方程。准确称取阿司匹林待测样品m(g),用V0(mL)体积乙醇溶解后(V0视m 而定，为保证试样完全溶解,V0 40m L),若有不溶杂质存在，需用滤纸过滤。 量取滤液V(mL)于50mL|f量瓶中，加入 稍过量Fe3切色齐1J,用pH值=3的CH3 COOH

11、-CH3COO缔中溶液稀释至亥ij度 后测吸光度。计算公式：w(SA)=CX 50 X V0 VX 1000X mx 100%讨论：该方法快速简便，结 果准确可靠，可作为阿司匹林稳定性 及降解动力学研究的含量测定方法。.阿司匹林制剂的含量检测方法两步滴定法因阿司匹林片剂中除存在其水解 产物水杨酸及醋酸外，在制剂工艺中 添加了抑制阿司匹林水解的稳定剂酒 石酸或枸檬酸，因而采用此法。两步滴定法系指测定过程分两步 进行：第一步中和制剂中的酸性水解 产物和酸性稳定剂(同时中和阿司匹林的游离竣基)，以消除其干扰；第 步水解与滴定，即水解后剩余量滴定 法。【1】原理：中和：水解与滴定:测定方法：中和：取本

12、品10片，精密称定， 研细，精密称取片粉适量(约相当于 阿司匹林0.3g),置锥形瓶中，加中性 乙醇(对酚猷指示剂显中性)20ml, 振摇使阿司匹林溶解，加酚吹指示液3 滴,滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/ml) 至溶液显粉红色。此时中和了供试品 中存在的游离酸，阿司匹林也同时成 为钠盐。水解与滴定：在中和后的供试品 溶液中，精密加氢氧化钠滴定液(0.1 mol/ml ) 40ml,置水浴上加热15分钟 并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫 酸滴定液(0.05mol/ml)滴定，并将滴 定的结果用空白试验校正。计算公式：从上述反应式可知：阿司匹林与 硫酸的摩尔比为2: 1硫酸的 T=0.05X

13、（2/1） X 180.16=18.02 （mg/ml）标示量 =（V0-V） XFXTX W（平 均）/ （WX标示量）X 100%（VD为空白试验消耗硫酸滴定液 的体积（ml）; V为样品测定时消耗硫 酸滴定液的体积（ml）; F为硫酸滴定 液的浓度校正因数；T为硫酸的滴定度 （mg/ml）； W为供试品片粉的取样量 （g）；W（平均）为供试品的平均片重（g）;标示量为片剂的规格（mg/片）讨论：两步滴定法是水解后剩 余滴定法的改进，第二步也应做空白 试验。柱分配色谱-紫外分光光度法原理：采用柱色谱分离法消除 阿司匹林胶囊和栓剂中辅料及降解产 物的干扰。测定方法：色谱柱的制备：于 玻璃柱（

14、20cm x 2.5cm）下端塞入少量 玻璃棉，装入硅藻土 3g和新制碳酸氢 钠（1-12）2ml的混合填充剂。对照溶 液的制备：取阿司匹林对照品约50mg 精密称定，置50ml量瓶中，加冰醋酸0.5ml，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度， 混匀。精密量取5ml,置100ml量瓶中， 用冰醋酸三氯甲烷（1-100）稀释至 刻度，混匀。制成每1ml中约50ug的 溶液。供试品的制备：取胶囊20粒，尽 可能完全倾出内容物，精密称定，研 细，混匀；取细粉适量（相当于阿司匹 林50mg）,精密称定，置50ml量瓶中， 加盐酸甲醇溶液（1-50） 1ml,加三 氯甲烷稀释至刻度，混匀。精密量取5 ml,移至色

15、谱柱填充剂上，用三氯甲 烷5ml、25ml相继洗涤，弃去洗液， 用冰醋酸三氯甲烷溶液（1-50） 10ml 洗涤后，再用冰醋酸三氯甲烷溶液（1 -100） 85ml洗脱，收集洗脱于100ml 量瓶中，并用冰醋酸三氯甲烷溶液（1 -100）稀释至刻度，混匀。测定法：用1cm吸收池，以三氯 甲烷为空白，立即于最大吸收波长 28 0nm处测定对照溶液和供试溶液的吸 光度。计算公式：阿司匹林（mg =CR X （AX/AR）（CR为阿司匹林对照溶液浓度（u g/ml ）; AX和AR分别为供试溶液和对 照溶液的吸光度）高效液相色谱法原理：附加成分显著影响主成分的测定，如在主成分最大吸收波长 处有显著吸

16、收。则使用高效液相色谱 分离检测。【1】测定方法：用ODS柱，以乙月青-四氢味喃-冰 醋酸-水（20: 5: 5: 70）为流动相； 检测波长为276nm理论板数按阿司匹 林峰计算不低于3000,阿司匹林峰与 水杨酸峰的分离度应符合要求。取本 品精密称定，置小烧杯中，在40-50C 水浴上微温熔融，在不断搅拌下冷却 至室温，精密称取适量（约相当于阿 司匹林0.1g）,置50ml量瓶中，力口 1% 冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀， 置冰浴中冷却1小时，取出，迅速滤 过，取续滤液作为供试品贮备液。精 密量取供试品贮备液5ml,置100ml量 瓶中，用1麻醋酸的甲醇溶液稀释至 刻度，摇匀，精密量取

17、1ul ,注入液相 色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林 对照品，精密称定，加1%K醋酸的甲 醇溶液振摇使溶解并定量稀释制成每 1ml中约含0.1mg的溶液，同法测定， 按外标法以峰面积计算，即得。计算公式：标示量%= CRX （AX /AR）义DX W”均）/（W X标示量） X 100%（CR为对照品溶液浓度（mg/ml）； AX和AR分别为供试品溶液和对照品溶液的峰面积；D为稀释体积（ml, D=5 0X 100/5=1000）; W为栓剂熔融物取样 量（g）； W均）为栓剂平均粒重（g）; 标示量为栓剂规格（mg成）线性扫描伏安法原理：蔡卓等人以玻碳电极为 指示电极，用线性扫描伏安法测定水

18、 杨酸，从而间接测定阿司匹林.在硫酸 -硫酸钾底液中，水杨酸在玻碳电极上 产生一灵敏的氧化峰，峰电位为1.16 V;在 4.0 义 10-5mol/L8.0 义 10-3mol/ L浓度范围内水杨酸与峰电流呈良好 线性关系，最低检测浓度为2.0 乂 10-5 mol/L o 测定方法：取10 mL待测溶液 置于电解杯中，在CH I600电化学工作 站上用线性扫描伏安法测定。仪器参 数设置为：扫描电位范围0.5 V1.5 V, 扫描速率0.1 V/s,静止时间2 s.读取 1.16 V处的峰电流（P229图1）.测定前, 玻碳电极用氧化铝糊状液抛光，再用 去离子水冲洗干净，用滤纸吸干表面 水分。

19、选择一系列试剂作为支持电解 质，与水杨酸形成测定体系，在CH I60 0电化学分析仪上选择不同参数进行 测定，观察支持电解质组成变化对峰 电流的影响，确定最佳的测定体系和 测定条件。工作曲线制作：取7个25 mL容 量瓶，依次加入由实验选定的测定体 系和不同体积的水杨酸标准溶液，用 水定容.在选定仪器条件下进行伏安 扫描，读取峰电流.以水杨酸浓度对峰 电流做一元线性回归，即得工作曲线。样品测定：称取一定量阿司匹林 样品，先用少量0.1mol/NaOH溶解同时 水解成水杨酸，待反应完全后（约10m in）,再用 0.1 m o l/L N aOH 定容。计算公式：根据工作曲线计算 含量，将峰电流

20、代入回归方程，求得 浓度。讨论：线性扫描伏安法具有简 便、快速、仪器简单的特点，不需要使 用昂贵的仪器，也不需要繁琐的制备 离子电极，可用于阿司匹林药片制剂 含量的快速测定。同步扫描荧光光谱法原理：同步扫描荧光光谱法单 次扫描同时测定阿司匹林和水杨酸双 组分的方法。荧光光度计同步扫描时， 得到两组分互不干扰的荧光峰，借此 分别测定两组分的含量。测定方法：对照液：精密称取 阿司匹林对照品适量，置100ml量瓶， 用乙醇定容。精密量取 2ml置100ml 量瓶，用乙醇定容，即得。供试品：精密称取阿司匹林注射 液适量，置100ml量瓶，用乙醇定容。精密量取2ml置100ml量瓶，用乙醇 定容，即得。用对照品溶液测定荧光强度与浓 度的线性关系后，再在每次测定前， 用一定浓度的对照品溶液校正仪器的 灵敏度；然后再相同的条件下，分别 读取对照品溶液及其试剂空白的荧光 强度与供试品溶液及其空白的荧光强 度计算公式：CX = （RARXb / （RrRrb） 乂 Cr（CX和Cr为供试品溶液、对照 品溶液的浓度，RX供试品溶液荧光强 度，RXb供试品溶液试剂空白的荧光强 度，Rr对照品溶液的荧光强度，Rrb 为对照品溶液的试剂的空白荧光强度）讨论：该法简单、快速准确、 易操作，二组分不互相干扰，测定速 度快，体系荧光性质稳定。可减少制 样和测定过程中阿司匹林的水解 ，因 而准确度