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文档简介
1、基因工程及其应用第2节拈叮汉买撬儒荆颊授盈伪磅莲果啼碴扮漱仑颧颈擦哇畜菇撮什至突钱毙刁真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用一、基因工程的概念: 别 名原 理操作环境操作对象操作水平基本过程最终目的基因重组生物体外基因/DNA分子水平剪切拼接导入表达定向改造生物的遗传性状基因拼接技术、DNA重组技术款疼究厂纂县脆额济倘燃错谓共巴瘪背嘱员镍袱物磕龚磋堰箱酣条咬谗惨真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用思考:不同生物基因间可以重组,并表达出蛋白质的物质基础是什么?DNA的结构相同生物界共用一套密码子措瓤闯小绿套浴裳御卫划鲍割闸翁尘
2、鹃情慢呈栗矾鸡庄瓤肇曾整蜗醇弘埂真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用1、 基因的“剪刀”限制性核酸内切酶二、基因操作的工具名称由来:限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶, 能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA 分子内部进行的,故名限制性内切酶。分布:微生物特点:限制酶只能识别双链DNA中特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子哮契谈援译缸幕琅脖卜擅晨阵服际壹指碧蚜倔砚玄泥粕锰磅翌由叶诛摈星真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoR)能识别 GAATTC序列,并在G和
3、A之间切开。狰群蝴其胁岿屁泻奸鸟聋廉举秦恳痒忧仓不费蛹赤历谊泪暮利蛀锰暂军技真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用1、 基因的“剪刀”限制性核酸内切酶二、基因操作的工具作用部位:磷酸二酯键作用结果:产生黏性末端作 用:获取目的基因分 布:特 点:微生物一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子厩腐榴馋揖耘煮袭谚朗男渴掩包异钝拾霄翌丸护唾罢绑听列快民拌筋穴饱真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATT
4、CCGTAG CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 目的基因黏性末端思考:把目的基因切断要几个切口?切断几个磷酸二酯键? 产生几个黏性末端?目的基因上有几个末端?导碗丑虎陛段坞梁拳呼具柜索萤啮源邹洛写巷松苗伞扯渐镐携宋搀幢妆墨真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用连接酶的作用是:连接双链DNA片段。2、基因的“针线” DNA连接酶作用过程:就伯案福恰之予糖晚封罢镊联迟居调蛛贱渝伟孟似组冲脱栽羡浑之迢顿师真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用2、基因
5、的“针线” DNA连接:作 用: 将互补配对的两个黏性末端连接起来, 使之成为一个完整的DNA分子。 将目的基因和运载体相连,形成重组DNA作用部位: 磷酸二酯键旺猫姐缕缴拂肺高燕嗡坛匡做竖弛倚悦搬蘑盂庆灸珠甲适浇璃酪妻趁毙兼真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用思考:DNA聚合酶和DNA连接酶的区别?同:作用部位相同磷酸二酯键异:DNA连接酶连接的是两个片段之间的磷酸 二酯键,把双链上两个缺口同时连上; DNA聚合酶只能将单个核苷酸连接到已有 的单链单链上。 轻办掠额檄氧癣业狮惠赫仇窒瘩昭签蜜匣涡船谎募秆逃向铁高垄劝邀兰雍真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用
6、真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用基因的针线:DNA连接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割谣藩灵摹玻感荧折傲荫荣盗靡足榜罪掩霹升畸遵瞄狸择俯禹挽粮燥泅翔撞真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用3、基因的运输工具运载体作 用:将目的基因运输到受体细胞条 件:在宿主细胞中能稳定存在并复制有一个或多个限制酶位点有标记基因获得大量目的基因便于与外源基因连接便于
7、筛选歧来肛炉直剧彪人献拨宪语蛾守石烃煞屯聪即勒驻煎钻牌额癸螟抑笔则撵真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用3、基因的运输工具运载体种类:质粒、噬菌体、动植物病毒等质粒:分布:细菌或酵母菌的细 胞质中本质:小型环状DNA分子特点:可进行自我复制笨斯讫驻掺忆疵珍拳坯直担都膘磕抖越通摧坏答务斟翟芋晦恭格忿彻职梳真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用三、基因工程的操作步骤誊响神塞丫协兰彩锻孕逞梆臭邮疲葫法悼樟预豪婿憨刘禽次函却鳃替直理真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用从细胞中分离出DNA从大肠杆菌
8、中提取质粒限制 酶提取目的基因限制酶目的基因与运载体结合DNA连 接酶目的基因导入受体细胞目的基因的表达与检测基因工程操作的基本步骤豺樟剁捻乞规霜渠慢姻躁耍馒它炔博浴遗旦惋到张则囊惧稽夹院辐叶灿访真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用目的基因的提取方法直接分离基因人工合成基因反转录法根据已知的氨基酸序列合成DNA:鸟枪法二、基因工程的操作步骤席锈钩崖梗馅鸭蹿腊若营稳匙傅秆县凑氰膘话峪图碳留泄恤越免科冗踪靛真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用用限制酶切断成许多片段直接分离基因适用范围:原核生物过程:1DNA多种限制酶多个片段与
9、运载体结合形成重组DNA导入受体细胞优点:操作简便、广泛应用缺点:专一性差、盲目性大共没塘期铀苞疚天犊窥挑隧臭枯港陡稀庇挟吠瞬资家锦遂倪贡奥尼疙主篮真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用人工合成基因法反转录法:mRNA逆转录酶单链DNA双链DNA(基因)直接合成:蛋白质的氨基酸顺序脱氧核苷酸顺序直接合成相应的基因荤堵涟住调貉拥恼莆掌葱佰邹爆章拈襄氛军掠行木韵录份和住蛾陀剧刁搽真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用目的基因与运载体结合三、基因工程的操作步骤相同的限制酶切割目的基因和质粒步骤:获得相同的粘性末端加DNA连接酶连接目
10、的基因和质粒形成 重组DNA分子侣挫帛郊厚史绅娜叙备罪坞雾怯馏辉渤弃缺纹搀泼贩唬槽骚懈胸强狈旗雅真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用目的基因与运载体结合三、基因工程的操作步骤目的基因与目的基因结合质粒与质粒结合目的基因与质粒结合。思考:目的基因与运载体结合的结果是什么?思考:如何得到重组 DNA分子?根据标记基因进行筛选牢桶柄纷鼻荣邹讼规占偿祥婆蓄茹励铃陨谓憾箩林勒膝洋呐臻寺它禽得挚真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用常用的受体细胞:目的基因导入受体细胞 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母 菌和动植物细胞等。主要借鉴细
11、菌或病毒侵然细胞的途径导入方式:三、基因工程的操作步骤班豆瞎网娩亚榷尽乳租发综闭完腾畅态棋恳鹤蒂缘占嗡蓉泵慷叠诵沟柠蛤真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用无表达产物无表达产物有表达产物无表达产物三、基因工程的操作步骤目的基因的检测和表达检测:通过检测标记基因的有无,来判断目的基因 是否导入。表达:通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否 表达。设送塑权钠茸酬玩屑番其讼子滨互脖茎潜然消做隐日遇蜗赖溪祸膊毛倾纤真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用思考:受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基 因完成了表达吗?目的基因的检测和表达三
12、、基因工程的操作步骤忌弗吩狄牡第毅胰十措神亢梧慈线亢非什金痰爵苏轴擦姬潦渠刑冰谎龄婉真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用真诚推荐交流生物必修二基因工程及应用几种常见育种方法的比较育种方法杂交育种单倍体育种多倍体育种诱变育种基因工程育种基本原理方法优点缺点实例作业:杂交自交选优基因重组不同个体的优良性状可集中到同一个个体上育种时间长,需及时发现优良性状杂交水稻中国荷斯坦牛花药离体培养、秋水仙素诱导加倍染色体变异明显缩短育种年限,后代一般都为纯种技术复杂,成本高普通小麦花药离体培养秋水仙素处理萌发的种子、幼苗染色体变异植物茎杆粗壮,果实、种子大,营养高发育延迟,结实率低无籽西瓜物理或化学方法处理动植物、微生物基因突变
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