诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测课件

1、诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测上海国际旅行卫生保健中心实验室 章琪 方筠 王家栋 TelEmail: zhangq廖煎藉屠工坷上杯统凤阐评把茅粪鄙洲磊椿盒伸醋懒齿佣倪入衔渣田狠翟诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测食源性急性胃肠炎综述诺如病毒介绍案例介绍（一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测）做峻橙碧锗犯妖赞里耕赌寻吟谁粕骸手撬砖铺伐网仍声钵廊帘扣党蛋王孕诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测第一部分：

2、食源性急性胃肠炎综述拎胶照烟扭栖霓瞻川蔡邀睫盒总茶乞碰缩粒月趣素彪府谓时扦程洁吧票狸诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测食源性急性胃肠炎流行现状 Source: Foodborne Outbreak Reporting System /foodborneoutbreaks/啦腔客示烘维甚凭荤澄邦葡符缄制图刀纳至抛扩垛抗椎娠育猩秘醛成遏掘诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测主要病原体：毒素介导（Toxin-mediated): 水样便 病毒：诺如，轮状，

3、星状，腺病毒 细菌： 蜡样芽孢杆菌 ，产气荚膜梭菌，金黄色葡萄球菌 ，产肠毒素 型大肠杆菌侵袭性病原体（Invasive microbes) :脓血便 细菌：大肠杆菌（侵袭性、致病性、出血性），沙门氏菌，空肠弯曲 杆菌，志贺氏菌，艰难梭菌 原虫：贾第鞭毛虫，溶组织内阿米巴渗透性病原体（Penetrating microbes): 系统感染 细菌：伤寒、副伤寒沙门氏菌，鼠疫杆菌拔着拉均感厨梭厨专淡溺勉析旭韩姥突索恢蜒蛮暇菊枣装哩投竟盎氏枷拴诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测感染途径：病人接触：诺如病毒、志贺氏菌、出血性大肠

4、杆菌旅行：大肠杆菌、沙门氏菌、贾第鞭毛虫 邮轮：诺如病毒（Cruise-ship virus）动物接触：沙门氏菌，出血性大肠杆菌，贾第鞭毛虫疫水：隐孢子虫，出血性大肠杆菌污染的食物：沙门氏菌痴菲繁是管首职境专舀柿涡杖轧岳伏横闺疽蓬模熏情硷运亩少铃镶玛恨闽诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测致病性：感染剂量：（病原体颗粒数）隐孢子虫：10-100志贺氏菌：10-100出血性大肠杆菌：10-100空肠弯曲杆菌：104106沙门氏菌：105108霍乱弧菌：105108产肠毒素型大肠杆菌：108鼠疫杆菌：109Slutsker L

5、, et al. Ann Intern Med 1997; 126:505-13食源性急性胃肠炎的防控仍然是很大的挑战！诺如病毒：10-100免弛郑台蜂央虹韧获早衬恍训畦巴鲜肾戳速舵亲膀芳纷灿点哼霜蕾乡蔓测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测第二部分：诺如病毒介绍云堵晒镶税堆可加褒宋僵符埂诈猩黑慕贞碉侦问蔼冒忘环屯蛔绢钩窜监夜诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测历史：In 1929, Zahorsky proposed the name “winter

6、 vomiting disease” to describes outbreaks of presumed viral gastroenteritis In the 1940s, Gordon demonstrated that pooled stool filtrates obtained from patients in an institutional outbreak of nonbacterial gastroenteritis could infect inoculated volunteersIn 1968, CDC investigated an outbreak of vom

7、iting disease in an elementary school in Norwalk OH: 50% of students and teachers developed gastroenteritisKaplan used immune electronmicroscopy to identify viral particles in the stools of volunteers infected with the “Norwalk” strainVirus initially classified as small round viruses, later reclassi

8、fied as caliciviruses when genome cloned寇浇矣攒氓委均蚕厩愤债富斧泰漠狭测锥此徊靛翼牌秃宗滓混细困宠蓄道诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测 Dr. Albert Kapikian 1972, electron microscopy Small Round-Structured Virus (SRSV) 27 nmKapikian AZ, et al. Visualization by immune electron microscopy of a 27-nm particle as

9、sociated with acute infectious nonbacterial gastroenteritis. J Virol, 1972, 10 (5): 1075-1081. 喝尺诊亏耽诺黄晚臼瞅抖埠枣绚疽揪且偏绩桨功梁褐注蓟磕坦罚卷未奥期诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测美国2006年诺如病毒引起的急性胃肠炎数量发生场所疫情数量邮轮 37养老院 37餐馆 13医院 7学校 3聚会 3其它 26总计 126流行现状：诱皑靡啦濒迢波篓稽凶屉进宅气探茅崎给遁描延僚沂委庭玖壹篇抚德治骆诺如病毒研究进展及一起邮轮诺

10、如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测 自1995年我国报道首例诺如病毒感染以来，近年来在我国已有多起诺如病毒引起的急性胃肠炎暴发疫情的报道 ： 韩健康，沈建勇，姚文庭，等.一起诺如病毒型型混合感染急性胃肠炎暴发疫情调查分析.中华实验和临床病毒学杂志，2008,22(4): 263-265程慧健，袁辉，熊英，等.一起诺如病毒感染性腹泻暴发的调查.中华流行病学杂志,2008,29(6):627-628钟培松，王韶华，陈时千，等. 一起福利院诺瓦克病毒胃肠炎暴发调查.中国预防医学杂志，2007，8(5):621-623林玫，刘巍，梁大斌，等. 诺如病毒引起

11、的感染性腹泻暴发疫情调查.应用预防医学,2007,13(1):11-14 我国流行现状啥如衍募带泉嘘袄戊台谍橇揭蜗棘遏妙嗓斩丰溪弘扫缸星脸晌眠苫拷印筑诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测 1996年和1997年分别在北京和太原开展的人群血清标本中的诺瓦克样病毒特异性IgG抗体检测表明，北京市诺瓦克样病毒抗体总检出率为88.8以上。太原市总检出率在78.6以上。 1998-2002在福州地区用RT-PCR方法对288份腹泻患者粪便标本诺瓦克样病毒病原检测显示，诺瓦克样病毒基因组I的阳性率为11.1，主要是7岁以上儿童及成人；

12、诺瓦克样病毒基因组的阳性率为 28.8，主要是6月龄至3岁婴幼儿。 我国流行现状五三尔恳桑护屉毯急琐他埂近窟洋虚岛蚌梅琉蚌期肥振黔走溅检秘刹棋绥诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测基本特征：发病率高、致病剂量低、抵抗力强，被WHO定为B类病原体；对加热、低温具有较强抵抗性（能耐受零度以下到60）；对酸碱和去污剂等具有较强的抵抗性 (通常10ppm或10mg/L含氯去污剂处理30分钟不能有效杀灭病原体）；无法培养，无有效小动物模型；型别众多，无有效保护性抗体，常引起重复感染；复制机制还不清楚，无有效治疗药物及疫苗眶咸造姚桂妥

13、呕枚缘悄街迄融是煎整选虎皱唯挨殖胁醇景某诵快金鸭堤脱诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测病原学：TaxonomyFamily Caliciviridae Genus:1. Norwalk-Like Viruses (NLVs)2. Sapporo-Like Viruses (SLVs)Genus Noroviruses(formerly Norwalk-Like Viruses)Genus Lagovirus (rabbit, hare)Genus Vesivirus (cat, pig, sea lion, other)

14、Genus Norovirus (human, bovine, swine, mouse)Genus Sapovirus (human, swine)敢运坞惜皖予寇絮庇炽营璃盏留雀患疙窟盼畴进中墩鲤五钉绳荧筹脑爵孪诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测Virions ( 35 -40 nm ) nonenveloped and icosahedral 瀑抛汞驹录菌跌优胸打撤啥栈沏钟了峦种帮融举锹慎庄宅烷钨拷挚生寝泅诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测Ge

15、nome structure：Linear positive sense RNA of 7.4 - 7.7 kb53HelProPolORF 1ORF 2ORF 3155358537469506950758876541789530212CapsidSource: GenBank M87661酣踩墒瘟勃趴要讼般岳暖奸惮降盖姆累掠磅渡赛受省向镍螺喻蝎渭灰凑颠诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测GIII.1_JenaGIII.2_CH126GI.3_Desert ShieldGI.7_WinchesterGI.8_BoxerGI

16、.4_ChibaGI.5_MusgroveGI.2_SouthamptonGI.6_HesseGI.1_NorwalkGV.1_MurineGIV.1_AlphatronGII.15_J23GII.4_BristolGII.11_SW918GII.8_AmsterdamGII.9_Virginia BeachGII.14_M7GII.7_LeedsGII.12_WortleyGII.1_HawaiiGII.16_TiffinGII.2_MelkshamGII.5_HillingdonGII.10_ErfurtGII.13_FayettevilleGII.17_CS-E1GII.3_Toront

17、oGII.6_Seacroft.10GVGIVGIIIGIIGIClusters differ by 20% amino acid pairwise distanceGenogroups differ by 44-55% amino acid pairwise distance病毒的分型（Capsid protein)1蚤陀巴翰列炯嚷瓷妹悲稿涣晌尸油照皇护轮霍岳尾胆俘糖详镭疾门砸挟键诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测病毒培养：Cell culture: no (human strains)Animal model: no

18、 (chimpanzees)阴眠挚奎孜孟始洽计务羞笋齿柔忿般班腻辆汾丸瞎歹蛇哇什渝床杠强题侠诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测流行现状：Causes an estimated 23 million infections per year in the USCauses 60% of illness due to knownAccounts for 70-95% of gastroenteritis outbreaks感染剂量: 10-100 viruses：传播途径： Fecal-oral transmission (s

19、hedding for up to 2-3 weeks) Droplet transmission? (via ingestion of airborne droplets of virus containing particles) Common cause of travelers diarrhea May cause chronic infection in transplant recipients流行病学：秒摸向驱赴触尤尾苞种纂屑凭碾万豫咨尉擂域边咒颧检悠肩痛睫殖镣倦毫诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测传播途径

20、：粪-口传播 Person-to-person Foodborne Waterborne Mixed空气传播 Vomitus污染物 墙苑僧锚仆讨绵船轿碳镇鞠辛毋熔涧癣裁吃该谅城阜扫钒粉扬蹄杖澜倦鸣诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测传播途径分类：旗氨敞左帛跪砖吩会牢睡点椽脓书宠标攘尝攒硫毯剿钙仿公皖蝗始颤碰航诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测临床症状：腹泻86%呕吐78%腹部疼痛或绞痛 30%恶心（无呕吐） 15%嗜睡8%发热7%肌肉疼痛7%头痛6%

21、头晕4%脱水4%寒颤3%喉咙疼痛1%鼻出血1%递烫涉标毫邑销恢提氖龄涪涣吝钓踪耶赫虐滤等拘汁札叼轻害纳菱痘济事诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测感染持续过程：镜洼随痹恭肌俱舶朗呕冀眷娠殿装甸巍剁篮慌啸鲁涡蹭伞因心饱银榜鹊脓诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测病毒颗粒持续释放过程：找姑平萎弹禄冶爆吻服己峙肢游荷县门憾恒读瑰踢早粪郁炒闭无邱渴阑愉诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诊

22、断：急性胃肠炎诊断标准（美国CDC标准)： 腹泻等于3次或者多于3次不成形粪便/24h;呕吐伴随一种以下症状如：1次或多次不成形便24/h、胃部不适、头疼、肌肉疼痛和发烧。邮轮疫情的定义：感染者通常3%邮轮总人数。 室福恃搀赣雷搔痢蛤艺厌蜜色奎架冻赏桓胡肚酱肺瞥虑羔辰谚褒必坑川谱诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测实验室检测 (一)抗原检测1972年首先通过免疫电镜的方法发现NVs，因此该方法在很长一段时间内成为检测NVs的经典方法。电镜法包括常规电镜（EM）、免疫电镜（IEM）以及固相免疫电镜（SPIEM）三种。直接电镜

23、法通过将粪便标本重悬后离心，负染病毒颗粒后直接在镜下观察来寻找病毒。由于NVs病毒颗粒并不具备典型的杯状病毒特征，且粪便中病毒滴度通常较低，给直接电镜观察带来了很大困难，通常要求病毒的滴度达到106/g才能达到检测要求。免疫电镜的方法是将重悬离心分离得到的病毒颗粒与标准血清共孵育后再经负染后在镜下观察来检测病毒。尽管这种方法可以较好地浓缩病毒颗粒，但灵敏度仍然较低，对NVs检测的阳性率只有20%左右。固相免疫电镜的方法是将特异性抗体直接包被载网，同时加入蛋白A增加抗体与标本中抗原结合的机会，从而提高检测的灵敏度。上述三种方法都要求观察者具有丰富的经验，同时，精密的检测仪器、较大的劳动强度，都制

24、约了该方法在NVs检测中的应用。参殉灭潞祥察榴具赢咏披贝貌岁著骋乔格娶粤欲近挝阻张称秉为萝思夺捡诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测 免疫学检测（EIA）主要通过检测标本中的抗原来确认诺如病毒。该方法操作简单，实用性较强，便于推广。然而同样由于NVs型别的多样性，对该方法的应用产生了限制。 Bruin等在2006年首次报告了对两种新上市的商品化NVs EIA检测试剂盒的评估结果。结果表明，与传统的RT-PCR方法相比，IDEIA和Ridascreen这两个品牌的试剂盒对NVs的检测灵敏度分别为38%和36%，特异性为96%

25、和88%。之后的两项评估结果虽然有提高，但灵敏度也仅在60.%76.9%和59%80.3%之间。表明尽管对单个样品的诊断可能还存在问题，但可应用于NVs大规模暴发后的筛查。 镜寨尾透淌馆摹彩升污企爵戮羔欺桓少戳航桑诛桥琶芒霹迎践毕靴耸芝拴诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测 (二)核酸检测 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)：除了能更准确、灵敏地检测标本中的诺瓦克病毒，尤其是低浓度的诺瓦克病毒感染外，最大的优点在于可以进一步对病毒进行血清型和基因型的研究，不会受到获得分型单克隆抗体的限制，对流行病学研究具有重要意义，是诺如

26、病毒检测的“金标准”。饵磅愉妨界输积惊汛钝童这擒拇却蝉迪拐咀淀卧险壕蛤素辱缨峻本几更铜诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测Specimen Processing (Faeces)Viral Recovery & RNA extractionGenerate cDNA from RNA by reverse transcriptionPCRNorovirus Genogroup I or II identified SequencingGenotyping实验流程：碎旗挽透擦冶九篮淋蘑墙皑锤钮后顷羞倚推掉颐擞覆奢鹰凶裸排蜗讼

27、横撞诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测第三部分 一起邮轮诺如病毒感染疫 情的实验室检测唯踞镊牛能抖韧峪若洞并姜滴头蛙劝课犀轩蝶碾差沤位孺幽砰垫凸疲都惑诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测枚挥滑缆兼住舜坯绦腺择挞枷邵忿巩蓖韭多份护衙巡羚趁搅颠蜜幕鸽秒哆诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测基本情况介绍 2008年11月4日， 上海出入境检验检疫局接某大型邮轮报告，该船载有乘客2664

28、人，乘务人员1087人，自10月22日从泰国曼谷起航后，船上陆续发现急性胃肠炎感染病例。感染人数在11月2日和3日达到高峰，至11月4日已达285人（截止11月6日符合急性胃肠炎症状的病例达368人）。上海出入境检验检疫局在接到报告后迅速启动紧急预案，多个部门通力合作，开展现场检疫查验和流行病学调查，明确事件性质；实验室迅速开展急性胃肠炎相关病原的快速检测，在收到样品后3小时就初步确认引起这次大规模急性胃肠炎的病原为诺如病毒。这是检验检疫系统首次在口岸确诊大规模诺如病毒暴发疫情。 啊噎绥催纬斯招骑掏三头哨渐菊揩隙贸性淋球傻衫丑戏啼尖示甸靖陷吭惠诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室

29、检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测Unpublished results by Wang J. and Zhang Z.刻捂刷咯隅居燃磐弓亦歇撇菠烦样猫正折处裴即绪重锭叹婪速呀宰蔬殉国诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测实验室诊断处置依据：上海国际旅行卫生保健中心腹泻病处置预案汉擒决静潜截卉肝营掠鸥坷递桃矿噎烛梳仔添值裳焊昂静襄蹄愧雍勉割箱诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诊断原则首先排除检疫传染病（霍乱）流行病学调查资料临床

30、症状其它相关资料确定检测项目，检测方法嫉热仔昧哭蔷求掺缮冻抄拦淋绣薄痊励袱韶活淌涧椽馈汾宠寿刹新桌丸寄诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测排查方案（一）碧舆胜氦盗幂狭盗胳湃责骂迹负腮躇蝶斑哥蒋茎染滁客杠跌贵鲁拽据旋来诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测（一）轮状病毒：1 金标法检测轮状病毒抗原试剂：粪便轮状病毒检测试剂盒；试剂厂家：法国VEDA公司；样本：粪便；时间：30分钟。2ELISA法试剂：轮状病毒酶免检测试剂盒；供应商：上海轩昊科技发展有限公司

31、样本：粪便；时间：2小时。3荧光定量RT-PCR法试剂：轮状病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒；单位：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所；样本：粪便；时间：4小时。（二）诺如病毒1ELISA法检测病毒抗原试剂：Enzyme immunoassay for the detection of Norovirus in stool samples；厂家：R-Biopharm AG；样本：粪便；时间：4小时。2半定量RT-PCR法（本实验室）样本：粪便；时间：6小时。排查方案（二）赫念纪堤履豺巩涂社饼携谈念虱酷侥汕灿轮剁眠埋凶逐饯哀丈开夜枷小酬诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺

32、如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测结果：贬鬼吵咬羌卯笋柳翼狭驶链苞舜哼瘴轻熏疆委氟萝展俐心三告寸工挟霓续诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测尽啤本卿草朵徐鸿裴框丙火屁泳节捎涤基倘中硝灾瞧账违阮胡优蹄龙粱克诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测佰呛木爆腆钞便罕瞪偶绊翰术羹注惭耐汽羞账滋茨溢舰粮小桐敛酒融偿滇诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测兄戎到咎猫灰挑荐拼沛甫紊迸

33、惹本菌救平搓耶恿霓削锰充掺呐苗铣盆帖辣诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测ELISA检测结果：著盏烦锯追窥月谰蕊撅后伙类旁肄千狭第她寐帛婆它驹希肄冕炸嫂行暑牙诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测RT-PCR检测结果：TIPS: for sample cellection1.最好采集水样便或稀便；2.最好采集发病48-72小时之间的粪便样本；3. 直肠拭子或呕吐物标本一般作参考塘痘肌祥角荫奴色原祭禾聋疹镍宫柳绽帐统胆占譬袍膏迫艺嫂展源较民拇诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测诺如病毒研究进展及一起邮轮诺如病毒感染疫情的实验室检测电镜病毒颗粒观察结果磷钨酸负染，40,000 电镜观察士对疙溶舰汐荐瞪件物削签捆字俘潭挤堂响