医学专题血清型1

1、血清型和红细胞酶型2021/7/20 星期二1血清型概述血清是血液中的“无形成分”由多种蛋白质、有机高分子物质、无机盐和水等成分组成。2021/7/20 星期二2血清型的概念 人类某些血清蛋白具有遗传多态性，表型有个体差异，称为血清型 （serum types。 血清型也称为血清蛋白的多态性或遗传标记。2021/7/20 星期二32021/7/20 星期二4血清型的发展人们对免疫球蛋白型的研究较为深入。研究发现免疫球蛋白具有复杂的结构和功能，是血清蛋白质中多态性最多的一种蛋白质。正常人的免疫球蛋白很不均一，难以研究分析其抗体结构。2021/7/20 星期二5采用电泳（淀粉电泳、丙烯酰胺电泳）和

2、免疫学方法（免疫扩散，血凝抑制）及免疫电泳相结合的方法，以检出的血清蛋白型有触珠蛋白、转铁蛋白、低密度脂蛋白等21个系统，137个抗原。2021/7/20 星期二6免疫球蛋白人类免疫球蛋白已知有三类同种异型：Gm，Am和Km。2021/7/20 星期二7免疫球蛋白同种异型遗传标记 同种异型遗传标记是位于免疫球蛋白上反应个体差异的遗传标记。一、免疫球蛋白的结构与分类2021/7/20 星期二8氨基端羧基端2021/7/20 星期二9 IgG(链）、IgA（链）、IgM（链）、 IgD（链）、 IgE（链） 人类Ig 根据其重链稳定区的分子结构和抗原特异性的不同，分为五类：2021/7/20 星期

3、二10根据IgG重链恒定区氨基酸排列不同及二硫键的数目和位置不同将IgG进一步分为四个亚类: IgG 1、IgG2 、IgG3、 IgG4 根据轻链恒定区的不同可分为两型：型和型2021/7/20 星期二11二、Gm型与Km型的命名 位于IgG1、IgG2 、IgG3、 IgA、 IgE及轻链上的同种异型遗传标记分别以符号G1m、 G2m、 G3m、Am、 Em、Km代表2021/7/20 星期二12同种异型Gm（Gamma marker）为IgG表现出来的同种异型。Gm同种异型的抗原性已发现三十种左右，分别表现在gamma链上。 Gm系统中每对因子遗传位点无基因内组合，呈紧密连锁的单倍型。G

4、m单体型在不同的种族人群中表现各异，人种差别较大。在我国汉族和其他少数民族单倍体基因型和单倍型表现不一。 2021/7/20 星期二13由于各群体调查Gm因子的种类及个数不同，因而Gm因子单倍型中组合数目多寡也不同2021/7/20 星期二14 存在于IgG2亚类上的G2m(23）因子最早由Kunkel等发现。以后的研究表明，G2m(23）因子的分布有以下特点：(1)它是人类IgG2上唯一可检出的同种异型遗传标记; (2)在黑人中，G2m(23）因子极少存在，故它是识别人种非“非洲来源”的重要标记；(3）除人类外，它几乎不存在于其他灵长类动物，提示它具有高度的种属特异性。2021/7/20 星

5、期二15 因此，G2m(23)因子作为人类免疫系统的特征，可用于研究人类进化、种族特征、基因流动以及自然选择对人类免疫系统的作用等。2021/7/20 星期二16Gm型的遗传 通过对Gm因子的广泛群体遗传学及家系调查，证实Gm因子的遗传方式为常染色体共显性单倍型遗传。 2021/7/20 星期二17抗Gm抗体的产生输血：尤其是儿童患者，经多次输血后常常可测到可识别特异性的抗体。在成人，至少经过长期的刺激, 才能产生抗体。在经产妇, 单独一次注射免疫球蛋白, 不可能增加针对免疫球蛋白的抗体；妊娠：曾在孕妇中检测到抗G1m（1）, 后来她的婴儿证实为G1m（1）。 脐血血清中含有少量（1%或更少）

6、的内源性IgG, 当婴儿的所载有的IgG决定簇与母亲不同时, 母亲即被免疫；婴儿对母亲IgG同种异型的免疫应答2021/7/20 星期二18吴国光等曾对上海2万名献血者进行抗Gm抗体检测，共检测出抗Gm抗体阳性标本9份，检出率为0.045%；抗Gm抗体虽然可能引起输血过敏反应等，但反应较轻微，因此输血中无需常规检测抗Gm。2021/7/20 星期二19Am同种异型属于IgA表现出来的同种异型。Am抗原存在于Alpha2重链的恒定区，例如IgA2亚型有A2m（1）和A2m（2）两种同种异型，受控于两个等位基因。二者在白人、黑人和黄种人中分布都不相同。临床上IgA缺乏症患者或少数IgA含量正常患者

7、因多次输血可产生抗IgA抗体。体内含有IgA抗体的患者输注含有IgA的血液或制品时可发生过敏反应，严重时会导致休克，甚至死亡。2021/7/20 星期二20Km同种异型Kappa marker是IgG在Kappa链上的同种异型表现。 Km系统有三个因子： Km（1）、Km（2）、 Km（3），Km系统的等位基因有Km1、 Km1，2和 Km3三个，按常染色体共显性规律遗传此系各个抗原在白人、黑人和东亚人分别均不相同。2021/7/20 星期二21 新生儿出生时带有来自母体的IgG，此期间具有母体的同种型。出生后约6个月，新生儿产生自己的免疫球蛋白，表现出自己的同种异型。 2021/7/20 星

8、期二22免疫球蛋白同种异型检测的意义很多疾病和其密切相关，如重症肌无力、慢性活动性肝病和类风湿关节炎和特定的Gm单体型相关。种系调查亲子鉴定输血反应2021/7/20 星期二235、法医学意义 Gm、Km系统个人识别率及非父排除率均高于已知的红细胞血型、红细胞酶型及其他血清型，且Gm与Km抗原在常温下或碱性环境中很稳定，溶血对抗原性无大影响，所以Gm、Km系统具有很高的法医学应用价值2021/7/20 星期二24免疫球蛋白同种异型与临床输血2021/7/20 星期二25Gm病人体内有抗Gm抗体，输全血、血液成分或血液制品所引起的反应一般较轻 2021/7/20 星期二26受血者体内缺乏lgA完

9、全缺乏：约有1/500的病人ABO血浆中几乎完全缺乏lgA，输入含有lgA的血液或血液制品，刺激病人产生很强的抗lgA抗体，以后再输入含有IgA血液或血液成分及血浆制品可发生严重过敏反应，甚至死亡。2021/7/20 星期二27 IgA完全缺乏的人，这种人即使从未输血或未注射血液制品，特异性抗-IgA抗体也十分常见。据 Schmide(1969) 描述一名 IgA 完全缺乏的妇女，第一次输血便发生十分严重的过敏性反应，测定其抗-IgA效价为1750，第二次输血后上升到17500。2021/7/20 星期二28部分缺乏：病人缺乏lgA亚类，输含lgA的血液或血反应，因为受输入抗体的刺激，于10天

10、后可能产生针对lgA亚类抗体，以后再此类制剂会发生反应，一般症状较轻，如荨麻疹等。2021/7/20 星期二29IgA缺乏症由Vyas于1968年首次报道，是已知病因最为明确的一种输血类过敏反应。抗IgA抗体多为IgG型，抗原抗体反应激活补体释放C3a、C5a等致敏物质，引起类过敏反应2021/7/20 星期二30类特异性抗-IgA，即aIgA：产生类特异性抗IgA的患者血清中检测不到IgA，其产生的抗IgA与所有的IgA均可发生反应，在患者血清中滴度高；限定特异性抗-IgA：产生限制特异性抗IgA的患者少见，其血清中可检测到正常含量或偏低含量的IgA，但某一种IgA亚类缺乏，因此其产生的抗I

11、gA具有限制性，仅与相应缺乏的亚类IgA(如IgA1或IgA2)反应，且在患者血清中滴度低。抗IgA抗体分类2021/7/20 星期二31IgA缺乏症患者必须输注IgA缺乏的血液或制品。在国外的血液中心已普遍筛选IgA（）的血液或制品冷冻保存以备急用。因此开展人群Ig同种异型研究，检出人血清中抗Ig，对疾病及输血反应的诊断、预防和治疗有积极意义。2021/7/20 星期二32思考：对IgA缺乏或部分缺乏的病人，应该如何输血？2021/7/20 星期二331、IgA完全缺乏献血员的全血或血浆（最理想）。 据文献报道,IgA缺乏献血员中,日本只有0.7/万人;芬兰只有125/万人,有文献报道在中国

12、正常人群中,IgA缺乏患病率为2.4/万人。因此,要找IgA缺乏的献血员十分困难。2021/7/20 星期二342、自体输血；3、生理盐水多次洗涤的红细胞悬液；4、脐带血？2021/7/20 星期二35 脐血中IgA极少主要是因为出生前的胎儿与外界隔绝，B细胞尚未受到抗原的刺激,不能转化为分泌抗体的浆细胞,除IgG外,其它IgM、IgA等大分子免疫球蛋白都不能过胎盘,均由出生后不断接触病原而逐渐产生,IgA一般出生后24个月才开始出现。9岁后接近成人水平。故胎儿娩出时,脐血中IgA不存在或极少。2021/7/20 星期二36思考IgA缺乏或者部分缺乏者，其体内含有抗-IgA抗体，能否作为献血者

13、？2021/7/20 星期二37研究方法：复查输血记录，找出有抗-IgA且IgA缺乏的血小板捐献者，将他们的血小板与非IgA缺乏的血小板作输血后比较。2021/7/20 星期二38结果：4个有抗-IgA且IgA缺乏的血小板捐献者共献出血小板25份，输给22个人，有1人发生了发热反应，经确定与输血无关。对照组60名献血者共献出78份血小板，输给56名受者，其中1人发生过敏反应。结论：输入带有IgA抗体的血液成分似乎不会增加输血反应率。2021/7/20 星期二392021/7/20 星期二402021/7/20 星期二412021/7/20 星期二422021/7/20 星期二432021/7/

14、20 星期二442021/7/20 星期二452021/7/20 星期二462021/7/20 星期二472021/7/20 星期二482021/7/20 星期二492021/7/20 星期二50IgA缺乏引起输血反应1例患者,男,65岁,O型血,因肝硬化住某医院,3月2日输O型血浆200ml,未见任何不良反应,3月24日再次输入O型血浆200ml时,患者出现了皮肤潮红,出汗,血压低,呼吸困难,恶心和会厌水肿等一系列过敏反应症状。于是立即停止输血,将患者血样和所输血浆送到血液中心进行检查。2021/7/20 星期二51核对用血申请单、血袋标签、交叉配血试验记录 核对受血者及供血者ABO血型，R

15、h（D）血型。用保存于冰箱中的受血者与供血者血样、新采集的受血者血样、血袋中血样，重测ABO血型、Rh（D）血型、不规则抗体筛选及交叉配血试验（包括盐水相和非盐水相试验）；2021/7/20 星期二52结果 对两份标本进行血型血清学检查,并对所输血浆进行细菌培养,均未发现任何异常情况。 同时根据患者输血情况及所出现症状以及患者即往史进行分析,推断其可能是由于患者血浆中缺乏IgA ,因输血浆产生抗体引起抗原抗体反应,进而产生过敏反应症状。 对患者血浆中IgA 情况进行检测,发现患者血浆中IgA 含量仅为4.5mg/ dl ,远远低于同年龄组平均水平下限;而其抗IgA 抗体效价为1 :3 000

16、； 同时对患者即往史调查发现,患者平时经常出现呼吸道、消化道感染症状,进一步证明了我们的推断2021/7/20 星期二53免疫球蛋白同种异型的其他应用2021/7/20 星期二54免疫球蛋白同种异型检测意义人类学研究 中国人免疫球蛋白同种异型的研究：中华民族起源的一个假说 赵桐茂（上海输血研究所），遗传学报，19892021/7/20 星期二55 目前已知的免疫球蛋白同种异型有Gm Am、Em 和Km等系统。Gm 在免疫球蛋白lg的重链上，受控于第14号染色体，已检出18种因子。这些Gm因子以比较固定的形式组成单体型遗传。Km 因子有3种，受控于第2号染色体。群体和家庭调查表明Gm 单体型稳定

17、，发生交换的情况极少。不同种族间不但Gm 单体型频率明显差异，而且还存在一些具有“人种特异性”的Gm 单体型，因此在人类学研究中Gm是个很有用的遗传标记 。2021/7/20 星期二56 摘要： 调查了我国24个民族、74个群体的免疫球蛋白同种异型Gm、Km分布。测定了9560例个体的Gm (1，2，3，5，21)因子和9611例个体的Km(1)因子。根据Gm单体型频率计算了遗传距离并绘制系统树。2021/7/20 星期二57Gm1，21分布2021/7/20 星期二58Gm（1，3，5）分布2021/7/20 星期二59这些群体可以分为南北两大类型，被假设分别起源于黄河流域和长江流域。北方类

18、型包括居住在我国北方的汉族、维吾尔族、哈萨克族、东乡族、鄂伦春族、蒙古族、朝鲜族、褡固族、满族、藏族、回族、锡伯族和保安族。南方类型包括南方汉族、土家族、白族、彝族、苗族、布依族、水族、畲族、仫佬族、壮族、侗族和京族。2021/7/20 星期二60 结果 支持作者早前提出的有关中华民族起源于古代两个不同群体的假说。这两个群体大致以北纬30度为界，分别居栖在黄河和长江流域。不同人种间的差异，大于同一人种内不同群体间的差异。与高加索人种关联的Gm 3，5单体型存在于中国西北地区的少数民族中，提示混有高加索人种血缘。很可能来源于中亚地区的高加索人，通过“丝绸之路”进入中国。Km因子在所调查的74个群

19、体中呈随机分布。 2021/7/20 星期二61Ig同种异型检测方法免疫学方法： 微量血凝抑制试验 ELISA等方法电泳(Electrophoresis): SDSPCR2021/7/20 星期二62抗原分型-红细胞凝集抑制试验将稀释的受检血清与等量最适稀释度抗Gm血清混合；室温反应30分钟；加入已知Gm抗原致敏的指示红细胞悬液；置室温1小时后离心, 观察结果。如果受检血清中含有某种Gm型免疫球蛋白，将抑制抗Gm凝集带有Gm因子的抗体所致敏的红细胞，使之呈阴性反应。2021/7/20 星期二63抗原分型ELISA技术：以检测G3m(16)为例EL1SA包板抗原为稀释的混合人IgG，第一抗体为抗

20、G3m(16)因子单克隆抗体，第二抗体为稀释兔抗鼠Ig辣根氧化酶标记抗体；第一抗体加入测定板之前，预先加等体积稀释好的待测血清，置室温反应2小时。然后再分别加入第一抗体和第二抗体；抑制率=(xY)x 式中x 为未经待测血清抑制的单克隆抗体的吸光度； Y为经待测血清抑制后的单克隆抗体的吸光度。抑制率大于50为阳性，抑制率小于或等于50%为阴性。2021/7/20 星期二64琼脂糖电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）等电聚焦电泳：是一种根据样品的等电点不同而使它们在pH梯度中相互分离的一种电泳技术，分辨率比常规凝胶电泳高，能够揭示许多普通电泳难以检出的多态性。如维生素D结合蛋白普通电泳分为三种表现型

21、，而等电聚焦技术分为六种。血清型分型技术电泳方法2021/7/20 星期二65 DNA分型技术也可用于血清型分型。个体差异的实质是人类基因组编码DNA的差异2021/7/20 星期二66小结血清型概念：人类某些血清蛋白具有遗传多态性，表型有个体差异，称为血清型 （serum types）；免疫球蛋白同种异型概念：是指同一种属不同个体间的Ig分子抗原性的不同，主要反映在Ig分子上的CH和CL上一个或数个氨基酸的差异。 血清型检测在临床输血中的意义 1、Gm不合引起输血反应的概率很低，且输血反应比较轻微； 2、对缺乏IgA的受血者，经输血或其他途径产生抗IgA抗体后，再次输入含IgA的全血、血浆或

22、血液制品时，会产生严重的输血过敏反应。起病急（仅输入1ml即可产生过敏反应），病情严重（严重的过敏性休克，甚至会造成死亡）2021/7/20 星期二67结合珠蛋白型2021/7/20 星期二681、Hp的生化性质与生物学功能 由肝脏合成，等电点为4.14.2，电泳 属于2球蛋白组分。含糖量为18.6 2021/7/20 星期二69结合珠蛋白是一种血浆糖蛋白，分子量约为90.000。能与红细胞外血红蛋白(Hb)结合形成紧密的非共价复合物Hb-Hp。每天降解的Hb约有10%释入血循环中，成为红细胞外游离的Hb，Hb与Hp结合成Hb-Hp复合物后分子量可达155,000，不能透过肾小球，从而防止游离

23、血红蛋白从肾脏丢失，避免Hb所含铁的丢失。保证铁再用于合成代谢。 2021/7/20 星期二70 溶血性贫血患者血浆结合珠蛋白浓度下降。由于溶血时大量的Hb释出，Hp与游离Hb结合成复合物而被肝细胞摄取、清除。 此外，Hp也是一种急性期蛋白，患各种炎症时其血浆中含量升高。2021/7/20 星期二712、Hp的分子结构 Hp的分子结构类似免疫球蛋白，即由两条重链(链)和两条轻链（链）组成四聚体，而Hp的多态性主要是轻链的遗传变异造成。轻链有1和2二种。 1中又有1S和1F二种亚型，各由84个氨基酸组成，分子量约9100。两者区别在于第54位氨基酸(1 F为赖氨酸， 1 S为谷氨酸)，其余83个

24、氨基酸残基顺序均相同，因此可以推断这一区别是通过一次点突变形成。 链则由143个氨基酸组成，分子量约16 000。2021/7/20 星期二72Hp 1和2肽链是由一对等位基因Hpl和Hp2所决定，基因定位于16q221，呈共显性遗传，因此有三种基本基因型：Hpl-1型为HplHpl；Hp21型为Hp2Hpl；Hp2-2型为Hp2Hp2Hp1-1型由两条1链和两条链组成Hp2-1型由一条 1链、一条2链和两条链组成Hp2-2型由两条2链和两条链组成。2021/7/20 星期二73 除上述三型外，仅还有其它的变异型，由此组合成人群中Hp的多种多样的基因型和表现型如：Hp21M型；一部分无血管内溶

25、血者的血清中没有Hp或含量甚微，即所谓的Hp0 型。2021/7/20 星期二74 常见的三种Hp型别在不同人种中分布不同，Hpl和Hp2的基因频率也各异，Hp2基因频率以亚洲人中最高(075)，欧洲白人次之(060)，非洲人最低(030-一040)。可见，研究Hp型别分布不仅在遗传学上有意义，在人种学上也有一定价值。2021/7/20 星期二75带HP1基因者结合血红蛋白较多，HP2基因者结合血红蛋白较少，如1-1型平均结合血红蛋白为118g血红蛋白/L，1-2型为93g血红蛋白/L，2-2仅为75g血红蛋白/L。 2021/7/20 星期二76珠蛋白基因的多态性会导致珠蛋白本身与血红蛋白的

26、结合能力、抗氧化能力、人体内铁的代谢循环和免疫能力发生改变。既往的研究已经发现，珠蛋白基因的多态性对疟疾的发生和人体内红细胞溶解有着重要的意义 2021/7/20 星期二77珠蛋白2-2基因型是疟疾流行地区儿童贫血的危险因素，从而提示携带Hp2-2基因型的人体在疟疾引起红细胞溶血后，其珠蛋白结合游离血红蛋白的能力是下降的。 2021/7/20 星期二78此外，胎儿血液中不易测出Hp，部分新生儿可测出，4个月的婴儿Hp型别大部分可测出，个别情况直至15岁以后才能测出。胎儿及新生儿血中测不出Hp，不能称为Hp0型，这一点在涉及胎儿及婴幼儿的亲权鉴定时要注意2021/7/20 星期二79Hp型的分型

27、原理及方法 电泳前先使待测样品与血红蛋白形成HpHb复合物。电泳完后可以利用血红蛋白的过氧化物酶活性在过氧化氢存在时使联苯胺氧化成联苯胺蓝，染色2021/7/20 星期二80Hp与输血 Hp缺乏症的患者多次输入血浆制品可产生针对结合珠蛋白的抗体。日本红十字对19932000年间4138例非溶血性输血反应的调查数据显示，在日本人群中，结合珠蛋白缺乏导致的抗结合珠蛋白抗体产生引起的类过敏反应约比抗IgA引起类过敏反应高6倍，且在这些病人血清中同时检出IgE与IgG抗Hp抗体。2021/7/20 星期二81拟胆碱酯酶：表现出遗传多态性。转铁蛋白型：多种变异体，各人种基因频率各不相同。2球蛋白型：血浆

28、铜蓝蛋白：Ceruloplasmin碱性磷酸酶AKP2 巨球蛋白型2021/7/20 星期二82红细胞酶型2021/7/20 星期二83酶：活细胞产生的一类具有生物催化作用的有机物,它能使化学反应迅速进行，而本身性质不变。酶型：酶所具有的遗传多态性或遗传标记；2021/7/20 星期二84同工酶的遗传概念：若同一种酶在不同的个体中表现有遗传差异，且根据这些差异可以把人群分为两个或更多类型，在遗传上把这种酶称为同工酶。同工酶的生化概念：在人体的血液、组织和各种体液中所存在的能催化相同的化学反应但蛋白质分子结构不相同的一类酶。 活性中心： 结构相同 非活性部分：结构差异2021/7/20 星期二8

29、5现已发现有多种同工酶。如6-磷酸葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、酸性和碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酸、肌酸磷酸激酶、核糖核酸酶、过氧化酶和胆碱酯酶等 2021/7/20 星期二86红细胞酶型红细胞酶型：不同个体红细胞酶的遗传多态性。RBC表面酶型呈遗传多态性，目前有20余种常用电泳方法进行分析红细胞酶型应用：其多态性作为遗传标记在研究细胞来源、基因分析、法医中的亲子鉴定和个体识别。2021/7/20 星期二87同工酶的分型方法（电泳分离、酶谱显示） （一）电泳分离 1、历史 1955年，发现了淀粉凝胶电泳法。 1963年，应用淀粉凝胶电泳法发现了第一种红 细胞多态性酶型：酸性磷酸酶。 70年代

30、， 等电聚焦技术的应用 ，多种酶型亚型的发现 1972年， 发现了磷酸葡糖变位酶PGM1的亚型2021/7/20 星期二882、同工酶的分型多采用区带电泳或等电聚焦技术。 区带电泳利用酶蛋白分子的电荷密度的差异，不同酶蛋白分子在介质中的迁移率不同，从而形成清晰的区带； 等电聚焦技术根据酶蛋白分子的等电点不同，在pH梯度介质中，酶蛋白分子聚焦在相应的等电点pH位置上，形成狭窄而清晰的区带。2021/7/20 星期二89磷酸葡萄糖变位酶(PGM) 2021/7/20 星期二901、生物化学性质与生物学功能 PGM是参与糖代谢的重要酶类 PGM葡萄糖1磷酸盐 葡萄糖6磷酸盐 葡萄糖1，6二磷酸盐 2

31、021/7/20 星期二91分子量：PGM2：61KD PGM3：53KDPGM1:51KD。热稳定性：PGM1 PGM2 PGM3 活性：PGM1：占组织中PGM酶活性的80，红细胞中50 PGM2：在人体组织中，其余的PGM酶活性来自PGM2。 在红细胞中两者活性相当，各占红细胞酶活 性的50。PGM3：胎盘、精子、白细胞和毛根鞘细胞中 PGM4：主要见于哺乳期妇女的乳汁中2021/7/20 星期二922、PGM1表型 PGM1的多态性首先由Spencer等在1964年发现。2021/7/20 星期二93PGM1普通型 3种由普通凝胶电泳发现的表型： PGM11-1（a、c带） PGM12

32、-2（b、d带） PGM11-2（a、b、c、d带） 等位基因： PGM1*1、PGM1*22021/7/20 星期二94 PGM1的稀有表现型 : 稀有的表现型都是由一个普通型等位基因与一个稀有型等位基因（PGM1*3PGM1*8 ）所形成的杂合子 。2021/7/20 星期二953、PGM1的亚型聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术可区分10种亚型： PGM11+、PGM11、PGM12、PGM12+ PGM11+2 +、PGM112 、PGM11+2 PGM112+、PGM11+1、PGM12+2 PGM1的10种亚型受控于4个共显性等位基因： PGM1*1+、PGM1*1、PGM1*2+、PGM

33、1*22021/7/20 星期二964、群体遗传学 （ 一）普通型 大多数群体以PGM1*1频率最高，最高可达 0.90左右。中国各民族的PGM1*1基因频率在0.59 0.83之间，绝大多数民族的PGM1*1频率与亚洲其他 地区、美洲黑人、白人和欧洲多数群体之间无明显差异。2021/7/20 星期二97（二）亚型： PGM1亚型的基因频率在各群体之间多无显 著性差异 2021/7/20 星期二985、PGM1的电泳分型和酶谱显示。 普通型：淀粉凝胶电泳或琼脂糖凝胶电泳。 电子转移染料染色法亚型：聚丙烯酰胺等电聚焦法 电子转移染料染色法。2021/7/20 星期二99谷丙转氨酶谷丙转氨酶（GP

34、T）：又称丙氨酸氨基转移酶，是氨基酸代谢中的重要酶类。其多态性是1971年用垂直板淀粉凝胶电泳发现的2021/7/20 星期二1001、生化特征 GPT广泛存在于各组织器官的细胞中，肝的含量最为丰富，其活性远比其他组织高。GPT以两种形式存在于细胞中：一种存在于细胞浆中，称为可溶性GPT（sGPT）；另一种存在于线粒体中，称为线粒体型GPT（mGPT）2021/7/20 星期二101 血清GPT活性显著升高是由于细胞坏死或病变细胞膜通透性增强所致，故临床上将血清GPT活性测定用于肝脏疾病的诊断 GPT分子由两个亚基构成，相对分子质量为100000。催化丙氨酸与谷氨酸的氨基互换2021/7/20

35、 星期二1022、遗传多态性 1971年采用淀粉凝胶电泳分离并经特殊染色，首次确定可溶性GPT的三种常见表现型：GPT1、GPT2-1、GPT2，并确定该表现型由人类第8号染色体上的一对共显性基因GPT1、GPT2所控制，其遗传方式符合孟德尔定律。2021/7/20 星期二103以后相继发现了GPT基因座上的多个稀有等位基因GPT3GPT8及沉默基因GPT0。中国人群中尚没有检出稀有基因的报道。琼脂糖凝胶电泳检出的GPT谱型：纯合子1型和2型各有一条谱带，2型带泳动较快，靠近正极；1型带泳动较慢，靠近负极；杂合子21型有三条谱带，在1型和2型的谱带中间还多一条带2021/7/20 星期二104

36、3、群体遗传学调查 黄种人和白种人各人群GPT型的基因频率分布差异不明显。GPT1的频率较GPT2略高。非洲黑种人GPT1的基因频率高达0.85，与白种人及黄种人差异明显。 GPT属高鉴别能力的酶型系统，在个人识别中极具实用价值。2021/7/20 星期二1054、GPT的分型方法 方法有：淀粉凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、乙酸纤维素膜及聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦等，其中较常用的是琼脂糖凝胶电泳。GPT酶谱显示方法为荧光染色；2021/7/20 星期二106 其原理为：GPT能催化酮戊二酸与L丙氨酸反应，分别生成谷氨酸和丙酮酸，后者转化为乳酸，同时使NADH变为NAD，NADH为荧光物质，而NAD则无

37、荧光性，故有GPT存在的部位不发荧光，属于负显影。2021/7/20 星期二107 红细胞酸性磷酸酶（EAP）2021/7/20 星期二1081、生物化学性质与生物学功能 酸性磷酸酶又称为磷酸单酯磷酸水解酶或酸性磷酸酯酶（ACP)，是一组在酸性条件下，催化磷酸单酯水解的酶类，能催化磷酸单酯水解成磷酸和醇。2021/7/20 星期二109可分为3大类： 1、ACP1-红细胞酸性磷酸酶（EAP） 2、ACP2-细胞分泌的酸性磷酸酶，如精液ACP(SAP)、 阴道液ACP(VAP) 3、ACP3-组织细胞溶酶体中的ACP 在这三类同工酶中，红细胞酸性磷酸酶是具有遗传多态性的同工酶。2021/7/20

38、 星期二1102、EAP表型 6种普通表型： EAP A、EAP B、EAP C、 EAP BA、EAP CA和EAP CB 2号染色体短臂上单一基因座的 3个等位基因： EAP*A、EAP*B、EAP*C 此外，EAP基因座存在稀有等位基因EAP*D、 EAP*E、EAP*F、EAP*G、EAP*R、EAP*Tic-1及EAP*0 等。2021/7/20 星期二1113、EAP基因 EAP基因位于人类2p25 2021/7/20 星期二1124、群体遗传学各群体中EAP*B的频率都明显高于EAP*A，其中 以黑人EAP*B的基因频率最高，高达0.9以上，黄 种人EAP*B基因频率介于黑人和白人之间。 EAP基因频率的分