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文档简介
1、稳定性同位素内标与质谱检测稳定性同位素内标是质谱方法(稳定性同位素稀释法)独有的,没有别的临 床检测方法用到同位素内标。比如光吸收和免疫的方法,都无法分辨出被检测物 和同位素内标的区别,因为它们的理化性质太接近了。如果真的加进内标,那测 出来的值肯定大大的偏高。只有质谱才能把同位素内标和要检测的物质分得开, 虽然它们的差别只有几个道尔顿。现在的内标基本都是稳定同位素标记的,最常 见的是D和13C。同位素内标和被检测物是同一个物质,但是其中的几个氢原子 被氘所取代,或者是12C换成了 13C,理化性质基本不变。同样是标记,13C就比D要好。但是D要比13C便宜很多。绝大多数D做的 内标性能是很好
2、的。出问题的经常是一些疏水性比较差,保留时间比较短的物质。 出峰的时候跟很多其它物质一起出来,些许的偏差就能引起浓度测不准。临床检测的数据要想测的准,离不开一条好的标准曲线。通俗来讲,标准曲 线就像一把尺子。只有把尺子做准确了,才能把未知物品的长度测准确。从科学 上来讲,标准曲线就是检测物质的浓度和仪器读数的一种线形关系。一般是浓度 越高,读数越大。标准品的浓度是已知的,高中低都有。测完标准品以后,把它 们的浓度和仪器测得的读数在x/y的坐标纸上一画,连一条线就成了。测未知的 病人样品时,浓度(x)是未知的,只有仪器的读数(y),通过这条曲线可以把y 换算成浓度。标准品应该怎么做,怎么用,这里
3、面有很多学问。质谱是新鲜技术,大多的 检测项目还买不到标准品,只能自己配。做标准品需要有纯样品。最好的纯样品 应该是浓度和纯度都有保证书的,这样用起来放心。如果是液体的溶液就更好了, 省去自己称量和溶解的麻烦。高浓度的纯样品要稀释到不同的低浓度才能使用。 用什么来稀释是下一个非常关键的步骤,这里面牵扯到基质效应。因为基质效应 这块儿瓦是质谱临床应用里比较难理解的一个概念。目前同位素内标广泛应用于临床检测中:激素检测儿茶酚胺检测维生素检测全谱氨基酸检测全谱氨基酸1-甲基-L-组氨酸(IMHis)L-组氨酸(His)3-甲基-L-组氨酸(3MHis)8羟基赖氨酸(Hyl)L-a-氨基己二酸(Aad
4、)羟基-L-脯氨酸(Hyp)L-a-氨基正丁酸(Abu)L-异亮氨酸(Ile)L-丙氨酸(Ala)L-亮氨酸(Leu)L-氨肌肽(甲肌肽)(Ans)L-赖氨酸(Lys)L-精氨酸(Arg)L-蛋氨酸,L-甲硫氨酸(Met)精氨基琥珀酸(Asa)L-正亮氨酸(Nle)L-天门冬酰胺(Asn)L-正缬氨酸(Nva)L-大门冬氨酸(Asp)L-鸟氨酸(Orn)D, L-B-氨基异g(bAib)O-磷酸乙醇胺(PEtN)B-丙氨酸(bAla)L-苯基丙氨酸(Phe)L-肌肽(Car)L-脯氨酸(Pro)L-瓜氨酸(Cit)O-磷酸-L-丝氨酸(Pser)胱硫醚,丙氨酸丁氨酸硫醚(Cth)肌氨酸(Sar)L-胱氨酸(Cys)L-丝氨酸(Sar)乙醇酸(Cys)牛磺酸(Tau)Y-氨基正丁酸(GABA)L-苏氨酸(Thr)L-谷氨酰胺(Gln)L-色氨酸(Trp)L谷氨酸(Glu
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