培养基模拟灌装试验验证方案

1、培养基模拟灌装试验验证方案(10ml)2011年08月(10ml)培养基模拟灌装试验验证方案验证方案的起草与审批页脚验证小组成员部门人员职责粉针车间主任李海龙负责验证方案的起草、组织、实施及培训。生产管理部刘明华负责验证方案的审核和实施的协调工作。设备部霍育生负责验证过程中设备设施的正常运行。部QA宋新莉负责安排验证过程中的监控和取样。QC部张华负责安排验证过程中物料、环境及样品的检测。A,l)rI-III，方案起草方案批准批准人批准日期年月日录目3.1概述4验证目的2.页脚页眉3风险评估44验证参考标准5验证范围5验证职责57验证前提条件6验证批次和时间7验证步骤810培养基的培养和检查14

2、11试验结果评价1412试验结果分析1513风险的评估与接受1514验证结果评审和结论1515方案修改记录1516再验证周期1517附件151概述本次培养基模拟灌装试验验证是以灭菌的乳糖粉末分装到10ml西林瓶中，整个过程模拟正常的粉针剂品种的分装状态，在盖塞前将胰蛋白胨大豆肉汤培养基灌入瓶内，压塞轧盖后进行培养，确认无菌分装工艺的无菌可靠性。页脚页眉2验证目的在各种干扰和最差条件下，评估灭菌工艺、人员更衣、行为习惯、A/B级气流模式、无菌环境的建立、消毒维持方法和物料的传递控制等整个流程的无菌保证水平。3风险评估经验证小组人员共同对培养基模拟灌装试验验证进行风险评估，对存在的质量风险提出了预

3、防和纠正措施建议，具体见下表：风险因素风险影响现有控制措施可能性P严重性S检测性D风险优先数RPN风险级别建议采取措施人员未按更衣程序更衣及不规范动作。污染无菌环境，使产品受到污染按相应SOP进行培训。人员进行更衣试验。34224中人员定期进行相关培训并进行更衣确认。分装线生产前检查及准备灭菌设备故障，人员操作不当。所灭菌部件灭菌不彻底，污染产品设备经过验证且定期维护，人员培训。34224中人员进行相关设备操作培训。灭菌设备定期验证。无菌生产中的正常干扰人员无菌操作不规范。无菌操作失败，使产品受到污染进入无菌生产区的操作人员经培养基灌装试验确认。34448高人员无菌培训，人员经培养基灌装试验确

4、认。级区沉降A菌采样无菌操作失败级区放置的沉降A在碟的操作平面低于产避免对品的操作平面，产品的影响。23318低取样人员进行相关及无菌操作SOP培训。原料进入A/B级区要SOP未按求清洁、消毒污染无菌环境，间接污染到产品SOP严格执行人员培训33212低定期监测,控加强监环境环境未得到控制环境对产品产生污染控检查相关验证情况，制关键操作区人数，定期监测23318低定期监测,毒.Q定期消时限性设备、器具、环境未及时清洁、未确定有效期微生物滋生，产品残留于设备中，导致交叉污染，人员制定相应SOP培训34336高SOP规定清洁时方法和有效期，间、人员培训到位。评估人年月曰验证参考标准药品生产质量管理

5、规范（2010年版）药品生产质量管理规范（2010年版）指南中国药典2010年版（二部）年版）药品生产验证指南（4.42003页脚页眉验证范围本方案适用粉针车间生产的全过程。包括：人员更衣、各房间的清洁消毒、物料传递、容器工具的处理、内包材的处理、中控取样、动态下环境监测、无菌分装、轧盖过程，并在分装过程中模拟正常与非正常干扰活动。方案中还规定瓶子、胶塞和铝盖灭菌后存放有效期的验证。验证职责验证委员会负责验证方案的审批，质量副总进行批准。6.1.2负责验证的协调工作，以保证本验证方案的顺利实施。6.1.3负责验证数据及结果的审核。6.1.4负责验证报告的审批。验证证书由验证委员会主任批准后，由

6、质量管理部发放，验证文件由质量管理部归档保存。负责再验证周期的确认。6.2验证小组负责验证方案的起草和验证实施。6.2.2负责验证数据、记录及结果的收集、整理。6.2.3负责起草验证报告，报验证委员会批准。6.3设备部负责组织所需仪器、设备的验证。6.3.2负责设备的维护保养。6.3.3.负责验证所需设备和HVAC系统、水系统及其他公用工程系统正常运行。6.3.4.负责生产辅助设施和公用工程系统的操作和清洁。6.4质量管理部6.4.1负责验证方案的审核。负责生产过程的监控和取样计划的制订。负责取样及对样品的检验并发放检验报告。负责收集验证记录，并加以分析。粉针车间负责组织验证方案的实施。负责合

7、理安排验证生产人员。页脚页眉7验证前提条件7.1验证中使用的文件是最新版本并已生效（见下表）。文件名称文件编号验证总计划管理规程S0P-0101-ZL-025/01确认与验证管理规程S0P-0101-ZL-019/01人员进出生产车间管理规程SOP-02-SC-014/01生产区卫生管理规程SOP-02-SC-001/01无菌生产洁净区人员行为规范标准操作规程S0P-02-SC-037/00般区物料传递岗位标准操作规程S0P-0203-PS-001/01灭菌岗位标准操作规程S0P-0203-PS-002/01DMH-百级净化双扉干热灭菌柜标准操作规程S0P-0203-E-001/01XG1.D

8、型机动门脉动真空灭菌器标准操作规程S0P-0203-E-002/01洗瓶岗位标准操作规程S0P-0203-PS-004/01KQCL60抗生素瓶立式超声波清洗机标准操作规程S0P-0203-E-003/01型隧道式灭菌干燥机标准操作规程KSZ620/60S0P-0203-E-006/01胶塞清洗灭菌岗位标准操作规程S0P-0203-PS-005/01KJCS-10ES全自动湿法超声波胶塞清洗机标准操作规程S0P-0203-E-005/01铝盖清洗灭菌岗位标准操作规程S0P-0203-PS-006/01全自动湿法铝盖清洗机标准操作规程KJSL-12ESS0P-0203-E-004/01FILGU

9、ARD-212A型完整性测试仪操作规程S0P-0203-E-002/01分装岗位标准操作规程S0P-0203-PS-007/01型抗生素瓶螺杆分装机标准操作规程KFG300DS0P-0203-E-007/01轧盖岗位标准操作规程S0P-0203-PS-008/01ZG300C型抗生素瓶轧盖机标准操作规程S0P-0203-E-008/01中间产品传递岗位标准操作规程S0P-0203-PS-009/01灯检岗位标准操作规程S0P-0203-PS-010/01表面微生物监测操作规程S0P-0102-T-047/00沉降菌监测操作规程S0P-0102-T-006/01浮游菌监测操作规程S0P-0102

10、-T-005/01悬浮粒子监测操作规程S0P-0102-T-007/01页脚页眉培养基适用性检查标准操作规程SOP-0102-T-009/01洁净区监测管理规程SOP-0101-ZL-028/01偏差处理管理规程SOP-0101-ZL-016/01变更管理规程SOP-0101-ZL-017/01参与验证实施人员都已接受相应的培训和本方案的培训，并考核合格。粉针车间洁净空调净化系统、纯化水系统、注射用水系统、纯蒸汽系统、压缩空气、车间生7.3培养室温度分布等已经过验证。产设备、称量衡器及7.4相关物料的准备。称名规格（编号）生产厂家胰蛋白胨大豆肉汤培养基250g/瓶北京陆桥技术有限公司无菌乳糖2

11、00目广州天润药业有限公司注射用无菌粉末用卤化丁基橡胶塞20-B2江阴兰陵瓶塞有限公司抗生素瓶用铝塑组合盖820 x7.1烟台福山区誉兴制盖有限公司低硼硅管制注射剂瓶10ml江苏潮华玻璃制品有限公司白色念珠菌98001湖北省食品药品监督管理局检验研究院枯草芽抱杆菌63501湖北省食品药品监督管理局检验研究院铜绿假单抱菌10104湖北省食品药品监督管理局检验研究院金黄色葡萄球菌26003湖北省食品药品监督管理局检验研究院大肠埃希菌64941湖北省食品药品监督管理局检验研究院注：乳糖经过辐射灭菌。验证批次和时间8瓶。按本方案连续进行三批培养基模拟灌装，每批灌装的数量大于5000序号号批（生产用具、

12、分装机组件清洗、培养基配制）模拟试验时间第1批原料搽消间20110901器具清洗间2第批201109023第批层流传递窗20110903（生产用具、分装机组件灭菌、培养基灭菌）灭菌间页脚页眉9验证步骤9.1模拟灌装试验前确认9.1.1模拟灌装用无菌乳糖溶解性试验称取模拟灌装用乳糖10g,于含胰蛋白胨大豆肉汤培养基为3%的100ml溶液中，在2025C的温度条件下，经轻微地振摇应全部溶解。9.1.2模拟灌装用乳糖微生物生长性试验的确认。9.1.3胰蛋白胨大豆肉汤培养基的无菌试验的确认。4胰蛋白胨大豆肉汤培养基的灵敏度试验的确认。9.2灌装前准备层流传递窗（铝塑盖、培养基、乳糖）（胶塞、管制瓶）瓶

13、塞清洗间脱内包洗瓶物料暂存间（乳糖）（胶塞清洗、灭菌）（瓶灭菌）（铝塑盖清洗、灭菌）隧道烘箱原料复核间瓶塞清洗间铝塑盖清洗间页脚轧盖间分装间（先分装乳糖，再灌装培养基）制品传出的要求进行清洗灭工衣清洗灭菌，瓶子、胶塞、铝盖、分装机部件和器具按相应岗位SOP9.2.2菌后进入分装间。SOP程（位标准操作规物操作人员按一般区料传递岗配9.2.3培养基制：培养基由分成两桶配制，（250g/瓶）-0203-ps-001/01）传至器具清洗间，取胰蛋白胨大豆肉汤培养基5瓶，搅1000g65L）,缓慢加入培养基先量取10000ml的注射用水（约70加入洁净的密封桶（分钟。取第二只1070C）加入密封桶中，

14、再搅拌拌10分钟，再量取15000ml的注射用水（约10,搅拌，缓慢加入培养基750g6700ml的注射用水（约70C），先加入洁净的密封桶（65L）7.30.2pH分钟。配制后培养基值应在的注射用水（约70C）搅拌10分钟，再量取10000ml脉动真空灭溶液。按XG1.D之间。将胰蛋白胨大豆肉汤培养基溶解完全稀释至浓度为30g/LA级区。121C、20分钟灭菌后，传入分装间菌器标准操作规程（sop-0203-E-002/01）操作，9.3模拟灌装过程KFG300D-0203-ps-007/01）和培养基冷却至室温后，按分装岗位标准操作规程（SOP9.3.10.5g进行操作，将无菌乳糖按每支-

15、0203-E-007/01）（S0P抗生素瓶螺杆分装机标准操作规程进行操作，-0203-E-010/01）蠕动泵标准操作规程（SOP分装于10ml西林瓶中，按BT300-1F型抗生素瓶轧盖机ZG300C7ml，扣好胶塞后按将灭菌的胰蛋白胨大豆肉汤培养基按每支灌装轧盖密封，在轧盖后缓冲间收集到不锈钢盘中（每个收集）SOP-0203-E-008/01标准操作规程（每个盛装培养基小瓶的托盘编号，并记录每盘的分装时间。支左右）。按分装时间对盘装载200人；为加大操作人员人，轧盖4分装人数为9.3.2模拟最差生产条件：人数最多，时间最长。8小时，正常生产中午疲劳程度和考察对产品的影响，模拟灌装超过工艺规

16、程规定时限，时间为81小时。休息9.3.3培养基模拟灌装试验操作过程装机。8：309.3.3.17:30至。，灌装培养基7ml9.3.3.2灌装量：每支西林瓶分装无菌乳糖0.5g蠕动泵标准操作BT300-1F按照分装岗位标准操作规程和：30装机后装原粉桶，89.3.3.3小时。规程调节装量0.5分钟。小时速度分装无菌乳糖和灌装培养基支以0099.3.3.4：开始2000/30页脚页眉轧盖爆瓶停机15分钟。中间模拟运行1小时。以2000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。拆装原粉桶0.5小时。以2000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。12：15至13：15操作人员出来吃饭。模拟设

17、备维修1小时，之后用消毒剂对分装机台面上各部件进行擦拭10分钟，调整装量5分钟，自净15分钟，继续分装。以2000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基30分钟。分装机拨瓶盘错位调整15分钟。模拟运行0.5小时。以3000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基至结束。灌装培养基的过程中进行各种正常干扰和非正常干扰的模拟。9.3.4.1正常干扰因素序号因素次数具体实施1装机1分装机分装部件的组装2胶塞转移3胶塞清洗机出料，转移至分装机旁的隔离器内3装原粉桶，调装量2装原粉桶和换原粉桶4灌装速度42000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基5灌装速度13000支/小时分装无菌乳糖和灌装培养基6模拟运行21次1小时

18、、1次0.5小时7装量检查10每次分装无菌乳糖和灌装培养基检查2次8处理胶塞轨道堵塞5每次分装无菌乳糖和灌装培养基处理次9处理掉塞5每次分装无菌乳糖和灌装培养基处理次10空瓶扶瓶5每次分装无菌乳糖和灌装培养基扶瓶一次11轧盖爆瓶1停机15分钟12中间休息1中午休息、吃饭13胶塞上料25每次分装无菌乳糖和灌装培养基上料5次14环境监测1分装过程中15分装机操作工穿越轨道8次。8分装机操作工穿越轨道次数为生产过程中页脚页眉人员表面微生物中午休息出去时、使用结束时216非正常干扰因素9.3.4.1序号因素次数具体实施1出轨后倒瓶5每次分装无菌乳糖和灌装培养基倒瓶一次2设备维修1分钟，打开分装机台面下

19、控制60第二次灌装结束后，停止灌装分钟，之后用消毒剂对分装60箱，模拟检查维修。维修时间约机台面上各部件进行擦拭，调整装量，继续灌装3分装爆瓶1爆瓶，停机处理4拨瓶盘调整1挤瓶导致拨瓶盘错位试验过程监测9.4西林瓶的无菌检查及有效期验证9.4.1进行-0203-E-003/01）SOPKQCL60抗生素瓶立式超声波清洗机标准操作规程（西林瓶按进行灭菌后进SOP-0203-E-006/01）清洗，按KSZ620/60型隧道式灭菌干燥机标准操作规程（入分装间。硫乙醇酸盐流体培养支放入300ml6只西林瓶按直接接种法，其中39.4.1.1测试方法：每次取培养?CC和30-35基中、3支放入300ml

20、改良马丁培养基中，同时做阴性对照，分别在23-28?天；逐日观察并记录。14天后液体澄清，不得有菌生长。9.4.12判定标准：全部样品和阴性对照管培养1416、试验后（6h）12点取样，存放8h）、试验中（点取样，存放9.4.1.3取样时间：试验前（9。4h）点取样，存放及有效期验证9.4.2.胶塞的无菌检查清洗、SOP-0203-E-005/01）KJCS-10ES胶塞按全自动湿法超声波胶塞清洗机标准操作规程（A级区。灭菌后出料存放于分装间硫乙醇酸盐流体培养100ml只放入只胶塞按直接接种法，其中109.421.测试方法：每次取20培养C30-35?分别在改良马丁培养基中，同时做阴性对照，2

21、3-28?C和10基中、只放入100ml14天；逐日观察并记录。14天后液体澄清，不得有菌生长。9.4.2.2.判定标准：全部样品和阴性对照管培养、试验后）40h）36h、试验中（11点取样，存放点取样，存放试验前（9.423取样时间为：8。44h15（点取样，存放）页脚页眉9.4.3铝塑盖的无菌检查及有效期验证铝塑盖按KJSL-12ES全自动湿法铝盖清洗机标准操作规程（SOP-0203-E-004/01）清洗、灭菌后出料存放于轧盖间A级区。测试方法：每次取20只铝塑盖按直接接种法，其中10支放入300ml硫乙醇酸盐流体培养基中、10支放入300ml改良马丁培养基中，同时做阴性对照，分别在23

22、-28?C和30-35?C培养14天；逐日观察并记录。判定标准：全部样品和阴性对照管培养14天后液体澄清，不得有菌生长。943.3取样时间为：试验前（8点半取样，存放36h）、试验中（11点半取样，存放40h）、试验后（15点半取样，存放44h。9.4.4生产过程环境监测及表面微生物监测9.4.4.1测试方法：参见浮游菌测试标准操作规程（S0P-0102-T-005/01）、沉降菌测试标准操作规程（SOP-0102-T-006/01）、悬浮粒子测试标准操作规程（SOP-0102-T-007/01）、表面微生物监测标准操作规程（SOP-0102-T-047/00）。判定标准9.4.4.2.1悬浮

23、粒子洁净度级别静态动态0.5um5.0um0.5um5.0umA级352020352020B级3520293520002900C级35200029003520000290009.4.4.2.2微生物动态监测标准洁净度级别浮游菌cfu/m3沉降菌cfu/4小时（090mm）表面微生物接触（055mm）cfu/碟5指手套cfu/手套A级1111B级10555C级1005025取样计划及取样点取样点见下表。取样操作参见洁净区监测管理规程（SOP-0101-ZL-028/01）页脚页眉分装流程图：进瓶转盘（处理倒瓶）分装（上料、装量检查、添加胶塞、卡瓶、堵塞、停机维修、人员进出、环境监测）轧盖（添加铝

24、塑盖、堵盖、环境监测）风险因素取样位置级别监测项目取样方法取样频率人员操作及数1.量、着装更换。装量检查。2.3.物料转运操作。各种无菌操4.作。胸肘、手人员五指手套、部、腹部、头部、口罩目镜护A/B级表面微生物接触055mm碟中途更衣刖试验结束后进瓶转盘A级悬浮粒子沉降菌浮游菌粒子传感器090mm平皿浮游菌米集器在线监测实时监控试验结束后八装头分装头级A悬浮粒子沉降菌浮游菌粒子传感器090mm平皿浮游菌米集器在线监测实时监控试验结束后胶塞振荡器A级悬浮粒子沉降菌浮游菌粒子传感器090mm平皿浮游菌米集器在线监测实时监控试验结束后隔分装机隔离器表面、离器手套离器手套A级表面微生物接触55mm0

25、碟试验结束后分装间墙面、门把手、地面B级表面微生物接触055mm碟试验结束后轧盖机操作台面A级悬浮粒子沉降菌浮游菌粒子传感器平皿90mm0浮游菌米集器在线监测实时监控试验结束后轧盖机隔离器表面、隔离器手套级A表面微生物接触055mm碟试验结束后轧盖间墙面、地面B级表面微生物接触55mm0碟试验结束后试验样品的培养和检查10.1将试验正常样品和不良样品先置2328C培养7天，再置3035C培养7天，培养时一半正立，另一半倒置，第7天后交换；第7天观察培养基灌装品的微生物生长情况，并对污染的瓶页脚页眉中的微生物进行总结其特点。若发现污染应明确记录样品灌装时间及数量，若有破损情况应记录并检查其破损原

26、因。对于微生物污染的样品应进行鉴别试验。10.2如果培养基灌装产品存在污染，将污染瓶中的污染菌在营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基上划线和分离培养，挑取单个菌落形态进行形态学观察、革兰染色等初步鉴别。试验结果评价样品可接受标准所有样品均进行培养，全部样品无浑浊出现，则为阴性，合格。11.1.2若有1支出现浑浊现象需进行调查，并记录污染产生的原因。11.1.3有2支污染则视为验证失败。需进行调查，填写异常情况报告，根据调查所确定的或可能发生的原因制定纠正或改进方案并实施，在调查结束并采用相应的措施后重复进行无菌模拟分装试验。出现阳性的样品应进行密封性检查，剔除所有渗漏的样品。11.1.5物料平衡

27、的统计培养基灌装记录物料平衡部分应包括完整的数据统计和对该批丢弃的数量的描述。此外，根据无菌灌装验证的具体情况，采用分灌装瓶数进行物料平衡计算。合格标准为100。11.2最终判断标准：无菌灌装验证判定为合格必须满足以下三条：所有样品均为阴性（无浑浊现象）样品的促生长试验合格（都有浑浊）物料平衡结果符合要求（为100）11.2.2如果其中的任何一项不合格则表明无菌模拟灌装试验不合格。验证结果分析验证小组负责对验证数据、记录及验证结果的收集、整理，做验证总结，包括对验证过程的审核：验证试验是否有遗漏。验证实施过程中对验证方案有无修改，修改原因、依据以及是否经过批准。验证记录是否符合标准要求。验证试

28、验结果是否符合标准要求，偏差及对偏差的说明是否合理，是否需要进一步补充试验。页脚页眉风险的评估与接受通过对培养基模拟灌装试验结果的分析和判断，对关键性风险和非关键性风险所采取的初步风险控制措施进行评估，确认风险是否降至为可接受风险。验证结果评审和结论验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论，验证委员会主任批准后由质量管理部发放验证证书，确认再验证周期。对验证结果的评审应包括：验证试验是否有遗漏？验证记录是否完整？验证过程中验证方案有无修改？修改原因、依据以及是否经过批准？验证试验结果是否符合标准要求？偏差及对偏差的说明是否合理？是否需要进一步补充试验？有无需要改进的设备、生产条件、操作步骤？方案修改记录在执行过程中，本方案若有必要修改，应由验证小组提出，经验证委员会批准后方可执行，并记录在案。16.再验证16.1每半年进行一次培养基模拟灌装试验。空调系统、设备及生产工艺发生重大变化。定期环境监测出现异常，尤其是微生物超标时，通过质量管理部评估，需进行培养基模拟灌装试验。页脚页眉改变内包装材料供应商。分装