![测序质量判断和测序常见问题_第1页](http://file4.renrendoc.com/view/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d3/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d31.gif)
![测序质量判断和测序常见问题_第2页](http://file4.renrendoc.com/view/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d3/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d32.gif)
![测序质量判断和测序常见问题_第3页](http://file4.renrendoc.com/view/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d3/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d33.gif)
![测序质量判断和测序常见问题_第4页](http://file4.renrendoc.com/view/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d3/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d34.gif)
![测序质量判断和测序常见问题_第5页](http://file4.renrendoc.com/view/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d3/36b9a95a0dd834acc90fd86204d783d35.gif)
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、测序质量判断和测序常见问题1DNA测序原理目前用于测序的技术主要有Sanger等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert(1977)发明的化学降解法。 2Sanger 法测序的原理Sanger 法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dN
2、TPs和ddNTPs的相对浓度可以调整,使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。3它们具有共同的起始点,但终止在不同的的核苷酸上,可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段,凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。4自动化测序首先,通过对ddNTP进行不同的荧光标记实现在一个泳道实现四种碱基判读。后来,各公司有改进了电泳方法,将毛细管电泳技术引入了测序仪,大大提高了分辨率。(排除了横向扩散和泳道间的干扰)5影响测序结果的因素6常见问题反应整体差,杂峰很多,序列完全比不上序列能比上,但很多地方有“突变”,有“插入”,有“缺失”测序长度太短了7常见问题的原因反应整体差,杂峰很多,序列完全比不上根本没反应,引物和模版不匹配序列能比上,但很多地方有“突变”,有“插入”,有“缺失”,测序长度太短了有反应,但质量差分析一下原因可帮助大家却认测序结果,确定是否需要重新测序。分析时应从大到小,从整体入手89软件Sequenc
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 浅谈小学书法教学中兴趣的培养 论文
- 2022人教版四年级上册数学期中测试卷及参考答案【黄金题型】
- 人教版小学四年级下册数学 期末测试卷及答案(名师系列)
- 人教版一年级下册数学期末测试卷含答案(轻巧夺冠)
- 人教版四年级下册数学第六单元《小数的加法和减法》测试卷完整版
- 2023年部编版五年级下册道德与法治期末测试卷含答案【研优卷】
- 人教版二年级上册数学期中考试试卷含答案【新】
- 人教版小学六年级上册数学期末测试卷往年题考
- 人教版四年级下册数学期中测试卷附答案(基础题)
- 2023年部编版五年级下册道德与法治期末测试卷含完整答案(夺冠)
- 期末试卷试题2023-2024学年人教版一年级数学下册
- GB/T 26764-2024多功能路况快速检测设备
- 考前预测-2024年广东中考数学精准预测卷
- 伦理学原理智慧树知到期末考试答案章节答案2024年湖南师范大学
- 2024年保安员考试题库及参考答案(综合题)
- 人类与生态文明智慧树知到期末考试答案章节答案2024年云南大学
- 共享厨房技术方案
- 乡村抗击疫情先进事迹材料7篇
- 2024-断绝父女关系协议书
- 湖南长沙青竹湖重点中学2024届中考四模生物试题含解析
- 小学语文一年级下册期末质量模拟试卷测试题(及答案)
评论
0/150
提交评论